基于关键指标提高准确性的单细胞测序方法

    公开(公告)号:CN113151425A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110378925.X

    申请日:2021-04-08

    Abstract: 本发明公开一种基于关键指标提高准确性的单细胞测序方法。建立了10X Genomics和BD Rhapsody平台样本制备方法并加以优化确定了关键参数,确定单细胞转录组测序技术样本的评价标准;通过建立细胞系对不同单细胞转录组测序平台的结果分析,进而解决单细胞转录组测序技术存在可比性和重复性差、缺乏质量控制标准的问题。

    一种针对植物单细胞测序样本处理破碎的方法

    公开(公告)号:CN112795622A

    公开(公告)日:2021-05-14

    申请号:CN202110249558.3

    申请日:2021-03-08

    Abstract: 本发明公开了一种针对植物单细胞测序样本处理破碎的方法,所述方法包括对植物样品进行物理破碎处理;对所述植物样品通过加入酶解液后得到酶解混合物,在pH6.0下温度控制在25‑35℃进行酶解,所述酶解液包括纤维素酶,果胶酶,氯化钙,甘露醇,离析酶R‑10按照mol比30:1:50:600:1进行混合后制得;对所述酶解混合物进行过滤后分离单个细胞或者多组细胞用于测序样本的上机前置程序。本发明通过物理破碎和酶解的形式促进细胞从生物样品中溶出至水中,提高细胞得率和纯度,采用多种方法建立、优化植物单细胞转录组测序样本的制备方法,获取的植物细胞纯度高、活性高,便于进行检测。

    一种用于检测乳腺癌HER2拷贝数变异的数字PCR方法及检测试剂盒

    公开(公告)号:CN110616251A

    公开(公告)日:2019-12-27

    申请号:CN201910933145.X

    申请日:2019-09-29

    Inventor: 董莲华 王霞 王晶

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测乳腺癌HER2拷贝数变异的数字PCR方法及检测试剂盒,所述试剂盒包括用于检测HER2基因拷贝数变异的至少一对引物及其相配套的一条探针,和用于检测的内参基因的一对引物及其相配套的一条探针。本发明的方法采用三组HER2基因的特异性引物探针和一组内参基因的方式进行,从而有效地排除了单一引物探针扩增导致的假阴性结果,因此相较于现有技术中具有更高的准确性,而且将现有方法的不确定区间1.8-2.2降低至1.0-1.2,具有更高的灵敏度。

    一种基于分子排阻色谱-电感耦合等离子体质谱联用的线性质粒DNA含量的检测方法

    公开(公告)号:CN110487923A

    公开(公告)日:2019-11-22

    申请号:CN201910221954.8

    申请日:2019-03-22

    Abstract: 本发明涉及线性质粒DNA含量的检测方法,包括下述步骤:(1)待测线性质粒DNA样本的纯化;(2)将经纯度检测符合要求的待测线性质粒DNA方法进行消解;(3)以磷标准物质为标准,以磷标准物质特性量值和相对应的分子排阻色谱-电感耦合等离子体质谱检测得到的质谱峰面积制作标准曲线,然后对消解后的线性质粒DNA样本进行分子排阻色谱-电感耦合等离子体质谱分析,用得到的线性质粒DNA对应的质谱峰面积和标准曲线进行定量分析。本发明用分子排阻色谱方法对线性质粒DNA进行纯度分析,可有效的将无机磷、核苷酸、寡聚核苷酸与质粒DNA分离开,可有效排除核苷酸、寡聚核苷酸、无机磷等非质粒DNA来源的磷干扰,保障了基于质粒DNA中磷元素定量的质粒DNA定量的准确可靠。

    食用油的品质鉴别方法
    25.
    发明授权

    公开(公告)号:CN107478744B

    公开(公告)日:2019-11-05

    申请号:CN201710685196.6

    申请日:2017-08-11

    Abstract: 本发明实施例涉及一种食用油的品质鉴别方法,包括:以特定羟基脂肪酸为鉴别标志物,对已知食用油油样中的羟基脂肪酸进行甲酯化和三甲基硅烷化衍生,对衍生后油样中的三甲基硅烷化羟基脂肪酸甲酯采用气相色谱串联质谱法进行定量,确定羟基脂肪酸的含量;羟基脂肪酸包括2‑羟基脂肪酸和3‑羟基脂肪酸;根据对不少于50种已知食用油油样中特定羟基脂肪酸的定量结果,建立食用油中特定2‑羟基脂肪酸和3‑羟基脂肪酸含量的标准数据库;对待测油样以相同方法衍生,测定待测油样中特定羟基脂肪酸的含量,将其含量与标准数据库中已知食用油油样中的同种2‑羟基脂肪酸和3‑羟基脂肪酸的含量采用主成分分析进行比对,确定待测油样的品质。

    基于气相色谱-同位素稀释红外光谱的化合物含量计量基准方法

    公开(公告)号:CN109725083A

    公开(公告)日:2019-05-07

    申请号:CN201910095447.4

    申请日:2019-01-31

    Abstract: 本发明公开了一种基于气相色谱-同位素稀释红外光谱的化合物含量计量基准方法,包括如下步骤:(1)准备样品、待测目标物的标准品和同位素标记物;(2)根据样品中目标物的含量,配制与其含量接近的标准品溶液和同位素标记物溶液;(3)取一定量的样品,在样品中加入同等量的同位素标记物溶液,准确称量各自质量;采用单点法或括号法校准;按照同样的过程配制混合标准溶液;(4)将配制好的含有标记物的样品、标准混合溶液分别进行气相色谱-红外光谱分析;(5)分析完成后,选取出峰时间段进行谱图累加,得到出峰时间段的红外光谱图,从红外光谱图上得到非标记的目标物与标记物特征峰处的红外吸光度;(6)计算样品中目标物的浓度。

    Illumina平台高通量测序文库定量标准物质的制备方法

    公开(公告)号:CN107447015A

    公开(公告)日:2017-12-08

    申请号:CN201710787170.2

    申请日:2017-09-04

    Abstract: 本发明公开了一种Illumina平台高通量测序文库定量标准物质的制备方法,将大肠杆菌基因组DNA经过超声波片断化,通过末端修复和接头连接,磁珠选择回收后可获得文库定量标准物质,再通过建立的染料数字PCR方法进行量值的确定。本发明提供了标准物质的制备方法,采用片段化的大肠杆菌基因组DNA作为文库定量标准物质,可以更好的模拟实际检测中样本的文库构建。本标准物质的定值方法准确度高,不依赖于DNA标准品,测量结果可溯源至个数,从而保证测量结果的可靠和可溯源。本标准物质可作为测量标准用于illumina平台高通量测序文库DNA的准确定量。

    定量保存微生物的冷冻干燥小球的制备方法

    公开(公告)号:CN106929421A

    公开(公告)日:2017-07-07

    申请号:CN201710108142.3

    申请日:2017-02-27

    Abstract: 本发明实施例涉及一种定量保存微生物的冷冻干燥小球的制备方法,所述制备方法包括:将目标菌株经营养琼脂接种及单菌落营养肉汤增菌后,获取对数生长期后期的微生物菌液;将微生物菌液进行稀释,并使用紫外光吸收辅助控制菌浓度,获得定量浓度的均匀菌悬液;将保护剂与无菌水混合配成保护剂溶液;将菌悬液与保护剂溶液进行混合,得到混合液;其中,混合液的菌浓度为102cfu/50μl~106cfu/50μl;取定量的混合溶液,利用液氮将混合溶液冷冻成球,然后迅速进行预冻;其中,预冻时间不少于2小时,预冻温度为‑80℃~‑20℃;将预冻后的小球进行真空冷冻干燥,得到冷冻干燥小球。

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