公开(公告)号：CN106929421A

公开(公告)日：2017-07-07

申请号：CN201710108142.3

申请日：2017-02-27

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 傅博强 ,  陈敏璠 ,  林婧 ,  张玲 ,  隋志伟 ,  王晶

IPC: C12N1/04

Abstract: 本发明实施例涉及一种定量保存微生物的冷冻干燥小球的制备方法，所述制备方法包括：将目标菌株经营养琼脂接种及单菌落营养肉汤增菌后，获取对数生长期后期的微生物菌液；将微生物菌液进行稀释，并使用紫外光吸收辅助控制菌浓度，获得定量浓度的均匀菌悬液；将保护剂与无菌水混合配成保护剂溶液；将菌悬液与保护剂溶液进行混合，得到混合液；其中，混合液的菌浓度为102cfu/50μl～106cfu/50μl；取定量的混合溶液，利用液氮将混合溶液冷冻成球，然后迅速进行预冻；其中，预冻时间不少于2小时，预冻温度为‑80℃～‑20℃；将预冻后的小球进行真空冷冻干燥，得到冷冻干燥小球。

公开(公告)号：CN106929421B

公开(公告)日：2020-12-01

申请号：CN201710108142.3

申请日：2017-02-27

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 傅博强 ,  陈敏璠 ,  林婧 ,  张玲 ,  隋志伟 ,  王晶

IPC: C12N1/04

Abstract: 本发明实施例涉及一种定量保存微生物的冷冻干燥小球的制备方法，所述制备方法包括：将目标菌株经营养琼脂接种及单菌落营养肉汤增菌后，获取对数生长期后期的微生物菌液；将微生物菌液进行稀释，并使用600nm波长的光吸收辅助控制菌浓度，获得定量浓度的均匀菌悬液；将保护剂与无菌水混合配成保护剂溶液；将菌悬液与保护剂溶液进行混合，得到混合液；其中，混合液的菌浓度为102cfu/50μl～106cfu/50μl；取定量的混合溶液，利用液氮将混合溶液冷冻成球，然后迅速进行预冻；其中，预冻时间不少于2小时，预冻温度为‑80℃～‑20℃；将预冻后的小球进行真空冷冻干燥，得到冷冻干燥小球。