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公开(公告)号：CN109293747B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201811126936.3
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3B抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系2H1，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，并且与检测血清有强竞争性。本发明准确鉴定了单抗2H1所识别的抗原表位，其序列为SEQ ID No.2所示；本发明对该抗原表位肽突变得到系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体与口蹄疫感染猪、牛、羊的FMDV抗体阳性血清呈现良好反应能力，用其作为包被抗原建立的抗体ELISA试剂盒能准确区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，并且用一种该检测试剂盒就能检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN106318955B
公开(公告)日：2020-08-14
申请号：CN201510391127.5
申请日：2015-07-06
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 中国食品药品检定研究院
IPC: C12N15/41 , C12N15/861 , C12N7/01 , A61K39/125 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了表达人肠道病毒71型衣壳蛋白的重组腺病毒、由其制备的疫苗和应用。本发明分别以融合有碱性蛋白酶裂解位点的口蹄疫病毒2A基因、口蹄疫病毒IRES元件为Linker构建得到两组含有EV71病毒衣壳蛋白P1基因和3CD基因的EV71亚基因组；本发明进一步将所述亚基因组重组至腺病毒表达载体中，经筛选分别获得一株复制能力好、遗传稳定且蛋白表达量高的重组腺病毒，其在感染的细胞中能够高效表达P1和3CD蛋白，同时3CD能够对P1进行正确切割；在小鼠体内能诱导高水平的EV71特异性广谱中和抗体，其诱导抗EV71特异性细胞免疫应答的能力显著优于灭活全病毒抗原，可应用于防治由EV71引起的人手足口病。
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公开(公告)号：CN108085302B
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201711093774.3
申请日：2017-11-08
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/04 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒温度敏感减毒株及其构建方法和用途。本发明发现，FMDV IRES结构域4的K区环上的一个胞嘧啶突变为鸟嘌呤或腺嘌呤可获得温度敏感减毒株，该突变株具有高度的遗传稳定性，接种猪能够诱导产生高水平的O型FMDV中和抗体、并能够完全抵抗当前优势流行的O型不同基因型FMDV异源毒株的攻击，而且具有良好的安全性。本发明还发现，IRES C351是所有血清型FMDV毒株温度敏感减毒表型的分子决定因素。本发明提供的口蹄疫病毒温度敏感减毒突变株及其全长cDNA感染性克隆、IRES突变体或嵌合IRES序列，可用于制备口蹄疫减毒活疫苗、作为口蹄疫灭活疫苗生产用种毒、或用于制备口蹄疫RNA疫苗。
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公开(公告)号：CN109295006A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811126938.2
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体3A10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号为CGMCC NO.16213的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，与血清竞争性强，可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明还提供了采用该单抗为检测抗体建立的阻断ELISA检测试剂盒，采用该一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN109295005A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811126187.4
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体2H1的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号是CGMCC NO.16212的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强,与血清竞争性强，可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明进一步提供了采用该单抗为检测抗体所建立的阻断ELISA检测试剂盒，采用一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、竞争性强、检测更为快捷方便等优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101838658B
公开(公告)日：2012-02-08
申请号：CN201010160669.9
申请日：2010-04-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/42 , C12N7/00 , C12N15/63 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N5/10 , C07K14/09 , C07K7/08 , A61K48/00 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了O型口蹄疫病毒变异株及其编码基因和应用。本发明首先分离到一株O型泛亚谱系口蹄疫病毒O/YS/CHA/05株，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示。VP1氨基酸序列比对发现本发明毒株有7个变异位点，其中5个变异位点集中在G-H环内。这些位点的突变使本发明病毒变异株具备了逃逸宿主免疫的能力，使其有优势成为主要流行毒株。因此，可利用本发明变异株制备防治该变异株及相关毒株的灭活疫苗，利用本变异株的优势抗原表位制备合成肽疫苗，以及用其研制O型口蹄疫新型疫苗如VLP疫苗等，这对于控制O/YS/CHA/05及相关变异毒株的流行具有重要价值。
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公开(公告)号：CN106749646B
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN201611199486.1
申请日：2016-12-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C07K14/09 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位及其应用。本发明首先公开了单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示。本发明所述口蹄疫病毒血清型共享性表位是七个血清型口蹄疫病毒的共享型表位。本发明利用筛选得到的与单克隆抗体3D9特异性结合的噬菌体克隆作为模拟抗原建立的间接ELISA方法，能够特异性的检测出口蹄疫病毒阳性血清。本发明所述单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位在口蹄疫的诊断或防治中具有应用价值。
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公开(公告)号：CN105859880B
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201610183404.8
申请日：2016-03-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了抗A型口蹄疫病毒的单克隆抗体的制备和应用，属于口蹄疫的防治领域。本发明构建了分泌抗A型FMDV的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞系，其微生物保藏号是：CGMCC 12049，其分泌的单克隆抗体为A型FMDV血清型特异性单抗，有高强度的中和能力；用该单克隆抗体建立的A型FMDV抗体的检测方法，本发明单克隆抗体在A型FMDV抗体检测方法中与A型FMDV的强阳性、弱阳性和疑似血清呈现良好的竞争能力，而与O型和Asia1型FMDV强阳性血清以及FMDV阴性血清没有竞争性，能够特异性区分A型FMDV的阴阳性血清，在A型口蹄疫的诊断、预防或治疗等方面具有重要的应用前景。
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公开(公告)号：CN109293748A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811126944.8
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系3A10，其分泌的单抗具有广谱性及高亲和力，并且与血清竞争性强。本发明进一步对单抗3A10所识别的抗原表位进行了精确鉴定，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，位于口蹄疫病毒非结构蛋白3A蛋白。本发明进一步对该抗原表位肽进行突变得到一系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体作为包被抗原建立的口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒能够特异性区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，采用一种该检测试剂盒即能准确检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN104388437B
公开(公告)日：2017-12-19
申请号：CN201410587130.X
申请日：2014-10-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/42 , C12N15/861 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了表达O型口蹄疫病毒空衣壳的重组缺损型腺病毒及其构建方法和应用。本发明在保证3C蛋白酶对口蹄疫病毒衣壳蛋白的剪切及正确组装和形成的前提下，对O型FMDV的3C基因进行改造或突变，构建3C蛋白酶活性改变的表达O型FMDV P1、2A和3C亚基因组或其突变体的重组腺病毒表达载体，将其转染293细胞筛选获得两株稳定表达O型或O型突变株亚基因组且能正确形成空衣壳的重组腺病毒。两株重组腺病毒的3C蛋白酶活性呈明显下调，对细胞的毒力得以显著降低，有效提升了在动物体内的免疫原性和免疫保护效力的指标。本发明构建的两株重组腺病毒还可组合作为二价口蹄疫候选疫苗覆盖当前中国O型FMDV流行株的抗原谱。
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