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公开(公告)号：CN103409414A
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201310294696.9
申请日：2013-07-15
申请人： 福建农林大学
摘要： 本发明公开了甘蔗基因组内标基因乙酰乳酸合酶基因PCR引物序列及扩增方法，引物序列是由ScALS-F和ScALS-R组成，PCR扩增方法包括反应体系和扩增条件。本发明为转基因甘蔗PCR检测和物种特异性鉴定提供了基因组内标基因，同时为转基因甘蔗检测精度和结果的准确性提供了保证。
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公开(公告)号：CN103409413A
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201310292837.3
申请日：2013-07-12
申请人： 福建农林大学
摘要： 本发明公开了甘蔗基因组内标基因果糖-6-磷酸2-激酶基因PCR引物序列及扩增方法。引物序列是由ScF2KP-F和ScF2KP-R组成，PCR扩增方法包括反应体系和扩增条件。本发明为转基因甘蔗PCR检测和物种特异性鉴定提供了基因组内标基因，同时为转基因甘蔗检测精度和结果的准确性提供了保证。
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公开(公告)号：CN103134714A
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201310067558.7
申请日：2013-03-04
申请人： 福建农林大学
IPC分类号： G01N1/28
摘要： 本发明涉及一种适用于双向电泳的甘蔗蛋白质提取方法。本发明对甘蔗蛋白质提取体系进行优化，将冰浴超声与漩涡震荡交替使用，提高了蛋白质得率。本发明的方法具有药品配制简单、操作方便、蛋白得率高、杂质少的优点。该方法比较适用于稀有材料或蛋白质提取纯化较困难的材料。使用本方法得到的蛋白占粗蛋白粉末的48%-60%，显著高于传统方法的8%-15%，同时所得粗蛋白粉末质量好，完全满足双向电泳的要求，对甘蔗蛋白质组学的研究具有重要意义。
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公开(公告)号：CN102367485B
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201110388017.5
申请日：2011-11-30
申请人： 福建农林大学
摘要： 本发明提供了一种用于PCR检测植物病害的内参基因的引物及其应用，属于生物工程技术领域。所述内参基因为rbcL基因，所述引物为：正向：5’TATCTTGGCAGCATTCCGAGTA3’，反向：5’ACCCTCTTCAAATAGGTCTAATGG3’，所述引物特异性的扩增rbcL基因的228bp的DNA片段，用于出入境植物寄生病害检测过程中PCR模板的评价。本发明首次提出在植物病害定性PCR检测中建立通用的内参基因；首次提出将植物叶绿体的rbcL基因作为内参基因应用于植物病害定性PCR检测；本发明提出的检测引物，克服了针对一种植物一个内参基因的缺陷，大大的提高了检测效率、缩短了检测时间。
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公开(公告)号：CN102965436A
公开(公告)日：2013-03-13
申请号：CN201210461215.4
申请日：2012-11-16
申请人： 福建农林大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明涉及一种检测转cry1Ac基因甘蔗的恒温扩增方法，包括甘蔗模板DNA提取、恒温扩增体系的建立和恒温扩增产物的鉴定。转cry1Ac基因甘蔗的恒温扩增检测方法针对抗螟虫转基因甘蔗的外源目的基因cry1Ac的碱基序列，设计了4条特异性引物，在Bst聚合酶作用下进行链置换扩增反应，特异性高。同时，扩增反应仅需水浴锅与可完成瞬时离心的常温低速离心机就能完成，因此，所需仪器设备简单，比常规PCR技术需要昂贵的凝胶扫描系统和PCR仪（或real-timePCR）等，扩增成本相对较低且扩增时间短、效率高，目视法颜色反应看结果直观方便。体系建立后，直接以提取的甘蔗基因组DNA作为模板，是一种适用于实验室和田间筛选转cry1Ac基因甘蔗以及进行cry1Ac基因成分检测、跟踪的低成本、快速、灵敏、简单、准确的方法。
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公开(公告)号：CN102559748B
公开(公告)日：2012-12-19
申请号：CN201210070463.6
申请日：2012-03-17
申请人： 福建农林大学
摘要： 本发明涉及一种简便的农杆菌介导甘蔗转基因方法，包括抑菌剂的配制、培养容器消毒、农杆菌转化、培养基配制、共培养、选择培养、筛选培养、壮苗培养和生根培养；本发明的抑菌剂配制方法简单；培养基配制，只要按不同的培养基配方常规方法配制后，再加上抑菌剂即可；培养容器和培养基都无需高温高压灭菌，这在以农杆菌介导的甘蔗转基因的培养基配制上，大大地减少了工作量和能源消耗，简化了组培环节，降低了组培成本，与常规的农杆菌介导甘蔗转基因方法对比，可以降低成本10%以上。本发明简便的农杆菌介导甘蔗转基因方法，操作简单，实用性强，推广性好。
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公开(公告)号：CN102586440A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210051544.1
申请日：2012-03-02
申请人： 福建农林大学
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 一种利用SCAR标记鉴定甘蔗抗黑穗病性的方法，包括基因组DNA的提取、SCAR-PCR标记的检测体系建立和SCAR-PCR产物的检测。本发明的利用SCAR标记鉴定甘蔗抗黑穗病性的方法，具有灵敏度高，所需要的DNA用量少的特点；与常规的人工接种田间抗性鉴定相比，具有操作简便、检测时间短、准确性高、容易判断、重复性好和不受环境条件影响等优点。为甘蔗种质资源的评价和新品种的审定工作，提供了简便有效的抗黑穗病性鉴定体系，对科研和生产具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN102367485A
公开(公告)日：2012-03-07
申请号：CN201110388017.5
申请日：2011-11-30
申请人： 福建农林大学
摘要： 本发明提供了一种用于PCR检测植物病害的内参基因的引物及其应用，属于生物工程技术领域。所述内参基因为rbcL基因，所述引物为：正向：5’TATCTTGGCAGCATTCCGAGTA3’，反向：5’ACCCTCTTCAAATAGGTCTAATGG3’，所述引物特异性的扩增rbcL基因的228bp的DNA片段，用于出入境植物寄生病害检测过程中PCR模板的评价。本发明首次提出在植物病害定性PCR检测中建立通用的内参基因；首次提出将植物叶绿体的rbcL基因作为内参基因应用于植物病害定性PCR检测；本发明提出的检测引物，克服了针对一种植物一个内参基因的缺陷，大大的提高了检测效率、缩短了检测时间。
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公开(公告)号：CN102312015A
公开(公告)日：2012-01-11
申请号：CN201110316556.8
申请日：2011-10-18
申请人： 福建农林大学
摘要： 本发明涉及一种检测甘蔗中寄生白条病菌拷贝数的实时荧光定量PCR方法。首先提供了一种利用实时荧光定量PCR方法检测甘蔗中寄生白条病菌的引物及探针，所述的引物为以下序列的引物对：正向引物序列5’-GGTTCCATTGCTTACCGATT-3’，反向引物序列5’-CAAGTTTCGACAGGAACAGC-3’，探针序列是FAM-5-CCACGGCTACGTCAATTCGGG-3-TAMRA，然后采集和处理甘蔗蔗汁并提取总DNA，利用实时荧光定量PCR方法检测甘蔗中感染的白条病菌HrpB基因，通过扩增过程生成的Ct值，代入标准曲线方程，转换成起始反应的DNA分子拷贝数，从而达到定量检测甘蔗中感染白条病菌数量的目的。
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公开(公告)号：CN101560493B
公开(公告)日：2011-09-21
申请号：CN200910111896.X
申请日：2009-06-03
申请人： 福建农林大学
摘要： 本发明涉及一种提高甘蔗愈伤组织繁殖系数的方法，具体是通过添加一定体积的椰乳大幅度提高甘蔗愈伤组织的分化率和培育壮苗。该发明的设计方案是：将处理过的甘蔗茎尖心叶经过诱导产生愈伤组织后，在分化阶段往培养基中添加5％～20％体积的椰乳，可以极显著地提高愈伤组织分化率，一般比对照提高100％，并且培育壮苗。该方法解决了甘蔗组织培养中某些品种能够正常诱导愈伤组织但分化困难的问题，有效完善了甘蔗组培再生体系，极显著提高愈伤组织分化率，促进组织培养在良种快繁中的广泛应用。
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