一种分子检测和鉴定甘蔗赤条病菌不同株系的试剂盒

    公开(公告)号:CN106222291B

    公开(公告)日:2019-06-28

    申请号:CN201610686714.1

    申请日:2016-08-19

    Abstract: 本发明涉及一种分子检测和鉴定甘蔗赤条病菌Acidovorax avenae subsp.avenae(Aaa)不同株系试剂盒。本发明的试剂盒中至少包括外侧引物对16S‑F4/23S‑R4和内侧引物对ITS‑F1/ITS‑R1,试剂盒内还有PCR反应液I和II、限制性内切酶反应液、Ex Taq酶液、HindIII内切酶、EcoRI内切酶、阳性样品DNA、阴性样品DNA和无核酸酶无菌水。本发明集合了巢式PCR检测方法的高度灵敏性和限制性内切酶切条带长度多态性与唯一性等优点,为甘蔗赤条病菌检测和鉴定提供了一种简便、快速、准确的方法。采用本发明试剂盒提供的试剂,经检测可判定是甘蔗赤条病菌及其株系类型。

    一种甘蔗黄蚜室内人工饲养繁殖方法

    公开(公告)号:CN107182945A

    公开(公告)日:2017-09-22

    申请号:CN201710411546.X

    申请日:2017-06-05

    CPC classification number: A01K67/033 A01H4/008 A23K50/90

    Abstract: 本发明涉及一种甘蔗黄蚜室内人工饲养繁殖方法。甘蔗黄蚜室内人工饲养繁殖方法包括无菌无毒甘蔗组培瓶苗的培养、甘蔗黄蚜的消毒、甘蔗黄蚜无病毒、无菌化、均一化培养、甘蔗黄蚜无病毒无菌化传代培养。本发明在室内利用无菌无毒甘蔗组培瓶苗为饲养介质,人工饲养繁殖无菌无毒甘蔗黄蚜,甘蔗黄蚜在密闭的培养容器内生长繁殖,常年保持无菌状态,不受环境微生物和天敌影响,也不会迁移至外界环境中,避免了对周边作物病原的传播和相应病害的流行。用无菌无毒甘蔗组培瓶苗作为饲养介质,成本低、易操作,可以周年提供足够数量的无毒、均一的甘蔗黄蚜虫源。

    一种检测甘蔗中寄生白条病菌的实时荧光定量PCR方法

    公开(公告)号:CN102312015B

    公开(公告)日:2013-01-09

    申请号:CN201110316556.8

    申请日:2011-10-18

    Abstract: 本发明涉及一种检测甘蔗中寄生白条病菌拷贝数的实时荧光定量PCR方法。首先提供了一种利用实时荧光定量PCR方法检测甘蔗中寄生白条病菌的引物及探针,所述的引物为以下序列的引物对:正向引物序列5’-GGTTCCATTGCTTACCGATT-3’,反向引物序列5’-CAAGTTTCGACAGGAACAGC-3’,探针序列是FAM-5-CCACGGCTACGTCAATTCGGG-3-TAMRA,然后采集和处理甘蔗蔗汁并提取总DNA,利用实时荧光定量PCR方法检测甘蔗中感染的白条病菌HrpB基因,通过扩增过程生成的Ct值,代入标准曲线方程,转换成起始反应的DNA分子拷贝数,从而达到定量检测甘蔗中感染白条病菌数量的目的。

    一种甘蔗杂交组合白条病抗性鉴定及抗病组合筛选方法

    公开(公告)号:CN108342448A

    公开(公告)日:2018-07-31

    申请号:CN201810190659.6

    申请日:2018-03-08

    Abstract: 本发明涉及一种甘蔗杂交组合白条病抗性鉴定及抗病组合筛选方法,包括配制甘蔗白条病病原菌菌悬液、甘蔗杂交组合实生苗培育、接种鉴定、病情调查。本发明通过剪叶接种方式对甘蔗杂交组合的白条病抗病性进行鉴定,该方法接近于田间人工接种白条病发病的实际情况,能直观的表现出甘蔗杂交组合对甘蔗白条病的抗性水平;接种甘蔗白条病菌后发病率显著、重演性好、操作简便,对实验设备要求不高,方便开展鉴定工作。本发明在甘蔗杂交组合实生苗移栽大田前对其进行接种,及时淘汰抗病性差的组合和单株,使抗白条病筛选关口提前,节约了土地资源和劳力物力,缩短育种年限,大大提高了抗白条病甘蔗品种选育效率。

    一种分子检测和鉴定甘蔗赤条病菌不同株系的试剂盒

    公开(公告)号:CN106222291A

    公开(公告)日:2016-12-14

    申请号:CN201610686714.1

    申请日:2016-08-19

    CPC classification number: C12Q1/689

    Abstract: 本发明涉及一种分子检测和鉴定甘蔗赤条病菌Acidovorax avenae subsp. avenae(Aaa)不同株系试剂盒。本发明的试剂盒中至少包括外侧引物对16S-F4/23S-R4和内侧引物对ITS-F1/ITS-R1,试剂盒内还有PCR反应液I和II、限制性内切酶反应液、Ex Taq酶液、HindIII内切酶、EcoRI内切酶、阳性样品DNA、阴性样品DNA和无核酸酶无菌水。本发明集合了巢式PCR检测方法的高度灵敏性和限制性内切酶切条带长度多态性与唯一性等优点,为甘蔗赤条病菌检测和鉴定提供了一种简便、快速、准确的方法。采用本发明试剂盒提供的试剂,经检测可判定是甘蔗赤条病菌及其株系类型。

    一种甘蔗愈伤组织显色控制基因ScSN及其应用

    公开(公告)号:CN103966233B

    公开(公告)日:2016-01-06

    申请号:CN201410197758.9

    申请日:2014-05-13

    Abstract: 本发明提供了一种甘蔗愈伤组织显色控制基因ScSN及其应用,根据玉米花青素转录因子基因SN(GenBank:X60706.1)的上游、下游序列设计引物,利用同源克隆技术,从甘蔗上得到花青素转录因子基因ScSN的全长序列。甘蔗ScSN基因开放读码框长度为1722 bp,编码573个氨基酸。将甘蔗ScSN基因的编码区序列在NCBI中进行BLAST分析,与众多玉米花青素相关基因的BLAST同源搜索中,E值等于零,说明了所克隆的基因确实为甘蔗花青素合成相关基因。在ScSN序列两端分别添加KpnⅠ、SalⅠ酶切位点,构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScSN,再通过基因枪轰击转化甘蔗愈伤组织,转化的愈伤组织颜色转变为暗红色,进一步证实所克隆的基因具有使甘蔗愈伤组织显色的功能。

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