公开(公告)号：CN102965436A

公开(公告)日：2013-03-13

申请号：CN201210461215.4

申请日：2012-11-16

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 许莉萍 ,  郭晋隆 ,  周定港 ,  阙友雄 ,  林庆良 ,  陈如凯 ,  高世武

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种检测转cry1Ac基因甘蔗的恒温扩增方法，包括甘蔗模板DNA提取、恒温扩增体系的建立和恒温扩增产物的鉴定。转cry1Ac基因甘蔗的恒温扩增检测方法针对抗螟虫转基因甘蔗的外源目的基因cry1Ac的碱基序列，设计了4条特异性引物，在Bst聚合酶作用下进行链置换扩增反应，特异性高。同时，扩增反应仅需水浴锅与可完成瞬时离心的常温低速离心机就能完成，因此，所需仪器设备简单，比常规PCR技术需要昂贵的凝胶扫描系统和PCR仪（或real-timePCR）等，扩增成本相对较低且扩增时间短、效率高，目视法颜色反应看结果直观方便。体系建立后，直接以提取的甘蔗基因组DNA作为模板，是一种适用于实验室和田间筛选转cry1Ac基因甘蔗以及进行cry1Ac基因成分检测、跟踪的低成本、快速、灵敏、简单、准确的方法。