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公开(公告)号:CN105821051B
公开(公告)日:2019-01-29
申请号:CN201610217153.0
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi阻断病毒胞间移动培育抗花叶病转基因甘蔗的方法,包括RNAi载体构建、遗传转化、转基因甘蔗植株的筛选鉴定及对花叶病的抗性鉴定。本发明采用融合PCR技术,克隆了SCMV的P3N‑PIPO的编码序列,以pGBKT7‑SCMV‑P3NPIPO为诱饵从甘蔗的酵母文库中筛选到了与P3N‑PIPO互作的甘蔗基因ScPCaP。以ScPCaP作为RNAi干扰靶序列,经遗传转化后获得了对SCMV,SrMV和SCSMV均有抗性的转基因甘蔗植株,并具有抗性广谱、抗病性好、抗性持久的特点,有效缩短了甘蔗抗花叶病育种周期。采用本发明的利用RNAi阻断病毒胞间移动的方法培育抗花叶病转基因甘蔗,在转基因生物安全上,优于转入病毒序列的转基因甘蔗。
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公开(公告)号:CN105823888B
公开(公告)日:2018-05-11
申请号:CN201610216221.1
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/66
Abstract: 本发明涉及一种利用甘蔗条纹花叶病毒P3N‑PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒,包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体:SCSMV‑P3N‑PIPO‑GFP、pSCSMV‑P3N‑PIPO‑RFP、pSCSMV‑P3N‑PIPO‑YFP和pSCSMV‑P3N‑PIPO‑CFP;4个无特异亚细胞定位的对照载体:pSAT6‑EGFP‑C1、pSAT6‑ERFP‑C1、pSAT6‑EYFP‑C1和pSAT6‑ECFP‑C1;限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。
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公开(公告)号:CN103134714A
公开(公告)日:2013-06-05
申请号:CN201310067558.7
申请日:2013-03-04
Applicant: 福建农林大学
IPC: G01N1/28
Abstract: 本发明涉及一种适用于双向电泳的甘蔗蛋白质提取方法。本发明对甘蔗蛋白质提取体系进行优化,将冰浴超声与漩涡震荡交替使用,提高了蛋白质得率。本发明的方法具有药品配制简单、操作方便、蛋白得率高、杂质少的优点。该方法比较适用于稀有材料或蛋白质提取纯化较困难的材料。使用本方法得到的蛋白占粗蛋白粉末的48%-60%,显著高于传统方法的8%-15%,同时所得粗蛋白粉末质量好,完全满足双向电泳的要求,对甘蔗蛋白质组学的研究具有重要意义。
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公开(公告)号:CN105823889B
公开(公告)日:2018-05-11
申请号:CN201610217004.4
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/66
Abstract: 本发明涉及一种利用甘蔗花叶病毒P3N‑PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒,包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体:SCMV‑P3N‑PIPO‑GFP、pSCMV‑P3N‑PIPO‑RFP、pSCMV‑P3N‑PIPO‑YFP和pSCMV‑P3N‑PIPO‑CFP;4个无特异亚细胞定位的对照载体:pSAT6‑EGFP‑C1、pSAT6‑ERFP‑C1、pSAT6‑EYFP‑C1和pSAT6‑ECFP‑C1;限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。
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公开(公告)号:CN105823890A
公开(公告)日:2016-08-03
申请号:CN201610217176.1
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
CPC classification number: G01N33/68 , C12N15/8205 , G01N21/64 , G01N33/5097
Abstract: 本发明涉及一种利用高粱花叶病毒P3N?PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒,包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体:SrMV?P3N?PIPO?GFP、pSrMV?P3N?PIPO?RFP、pSrMV?P3N?PIPO?YFP和pSrMV?P3N?PIPO?CFP;4个无特异亚细胞定位的对照载体:pSAT6?EGFP?C1、pSAT6?ERFP?C1、pSAT6?EYFP?C1和pSAT6?ECFP?C1;限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。
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公开(公告)号:CN105821051A
公开(公告)日:2016-08-03
申请号:CN201610217153.0
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8283
Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi阻断病毒胞间移动培育抗花叶病转基因甘蔗的方法,包括RNAi载体构建、遗传转化、转基因甘蔗植株的筛选鉴定及对花叶病的抗性鉴定。本发明采用融合PCR技术,克隆了SCMV的P3N?PIPO的编码序列,以pGBKT7?SCMV?P3NPIPO为诱饵从甘蔗的酵母文库中筛选到了与P3N?PIPO互作的甘蔗基因ScPCaP。以ScPCaP作为RNAi干扰靶序列,经遗传转化后获得了对SCMV,SrMV和SCSMV均有抗性的转基因甘蔗植株,并具有抗性广谱、抗病性好、抗性持久的特点,有效缩短了甘蔗抗花叶病育种周期。采用本发明的利用RNAi阻断病毒胞间移动的方法培育抗花叶病转基因甘蔗,在转基因生物安全上,优于转入病毒序列的转基因甘蔗。
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公开(公告)号:CN105823889A
公开(公告)日:2016-08-03
申请号:CN201610217004.4
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
CPC classification number: G01N33/68 , C12N15/8205 , G01N21/64 , G01N33/5097
Abstract: 本发明涉及一种利用甘蔗花叶病毒P3N?PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒,包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体:SCMV?P3N?PIPO?GFP、pSCMV?P3N?PIPO?RFP、pSCMV?P3N?PIPO?YFP和pSCMV?P3N?PIPO?CFP;4个无特异亚细胞定位的对照载体:pSAT6?EGFP?C1、pSAT6?ERFP?C1、pSAT6?EYFP?C1和pSAT6?ECFP?C1;限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。
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公开(公告)号:CN105823890B
公开(公告)日:2018-04-13
申请号:CN201610217176.1
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/66
Abstract: 本发明涉及一种利用高粱花叶病毒P3N‑PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒,包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体:SrMV‑P3N‑PIPO‑GFP、pSrMV‑P3N‑PIPO‑RFP、pSrMV‑P3N‑PIPO‑YFP和pSrMV‑P3N‑PIPO‑CFP;4个无特异亚细胞定位的对照载体:pSAT6‑EGFP‑C1、pSAT6‑ERFP‑C1、pSAT6‑EYFP‑C1和pSAT6‑ECFP‑C1;限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。
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公开(公告)号:CN105823888A
公开(公告)日:2016-08-03
申请号:CN201610216221.1
申请日:2016-04-08
Applicant: 福建农林大学
CPC classification number: G01N33/68 , C12N15/66 , C12N15/8205 , G01N21/64
Abstract: 本发明涉及一种利用甘蔗条纹花叶病毒P3N?PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒,包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体:SCSMV?P3N?PIPO?GFP、pSCSMV?P3N?PIPO?RFP、pSCSMV?P3N?PIPO?YFP和pSCSMV?P3N?PIPO?CFP;4个无特异亚细胞定位的对照载体:pSAT6?EGFP?C1、pSAT6?ERFP?C1、pSAT6?EYFP?C1和pSAT6?ECFP?C1;限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。
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