公开(公告)号：CN105823890B

公开(公告)日：2018-04-13

申请号：CN201610217176.1

申请日：2016-04-08

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 杨永庆 ,  程光远 ,  彭磊 ,  徐倩 ,  董萌 ,  徐景升 ,  翟玉山 ,  邓宇晴 ,  郑艳茹 ,  高世武 ,  郭晋隆

IPC: C12N15/66

Abstract: 本发明涉及一种利用高粱花叶病毒P3N‑PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒，包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体：SrMV‑P3N‑PIPO‑GFP、pSrMV‑P3N‑PIPO‑RFP、pSrMV‑P3N‑PIPO‑YFP和pSrMV‑P3N‑PIPO‑CFP；4个无特异亚细胞定位的对照载体：pSAT6‑EGFP‑C1、pSAT6‑ERFP‑C1、pSAT6‑EYFP‑C1和pSAT6‑ECFP‑C1；限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。

公开(公告)号：CN105823888A

公开(公告)日：2016-08-03

申请号：CN201610216221.1

申请日：2016-04-08

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 徐景升 ,  程光远 ,  彭磊 ,  徐倩 ,  董萌 ,  杨永庆 ,  翟玉山 ,  邓宇晴 ,  郑艳茹 ,  高世武 ,  郭晋隆 ,  许莉萍

IPC: G01N33/68 ,  G01N21/64 ,  C12N15/82 ,  C12N15/66

CPC classification number: G01N33/68 ,  C12N15/66 ,  C12N15/8205 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明涉及一种利用甘蔗条纹花叶病毒P3N?PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒，包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体：SCSMV?P3N?PIPO?GFP、pSCSMV?P3N?PIPO?RFP、pSCSMV?P3N?PIPO?YFP和pSCSMV?P3N?PIPO?CFP；4个无特异亚细胞定位的对照载体：pSAT6?EGFP?C1、pSAT6?ERFP?C1、pSAT6?EYFP?C1和pSAT6?ECFP?C1；限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。

公开(公告)号：CN101294221B

公开(公告)日：2011-05-04

申请号：CN200810071267.4

申请日：2008-06-23

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 陈平华 ,  王恒波 ,  陈由强 ,  陈如凯 ,  许莉萍 ,  郭晋隆 ,  徐景升 ,  蔡澜峰 ,  潘永保

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/10

Abstract: 一种大批量快速制备PCR模板的方法，属植物分子检测技术领域，具体涉及植物组织在裂解液中加热裂解和裂解液中和。本发明的技术方案是：将微量植物叶片放入一定体积的裂解液中加热裂解，然后中和，反应混合液可直接作为PCR反应的模板，在添加适量聚合酶稳定剂的情况下，PCR反应稳定，重复性强。该方法特别适宜大批量PCR反应模板的快速制备，可以大幅度提高分子检测和遗传分析的效率，极显著地降低成本。

公开(公告)号：CN105039356B

公开(公告)日：2019-07-12

申请号：CN201510570284.2

申请日：2015-09-09

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 徐景升 ,  杨永庆 ,  程光远 ,  高世武 ,  郭晋隆 ,  翟玉山 ,  彭磊 ,  邓宇晴 ,  郑艳茹 ,  许莉萍

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/11 ,  C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi沉默SceIF4E1基因培育抗条纹花叶病毒转基因甘蔗的方法，包括SceIF4E1基因的克隆、RNAi干扰载体构建、遗传转化、抗花叶病转基因甘蔗材料的培育及抗病性鉴定。以SceIF4E1作为RNAi干扰靶序列，经遗传转化后获得的转基因植株，产生了对甘蔗条纹花叶病毒不同株系的广谱抗性，具有抗病性好、抗性持久且生物安全性高的特点，使转基因甘蔗的培育摆脱了对抗源基因的依赖，并且可以有效缩短甘蔗抗花叶病育种周期。采用本发明的方法培育抗花叶病转基因甘蔗，在转基因生物安全上，优于转入病毒序列的转基因甘蔗。

公开(公告)号：CN105823889A

公开(公告)日：2016-08-03

申请号：CN201610217004.4

申请日：2016-04-08

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 杨永庆 ,  程光远 ,  彭磊 ,  徐倩 ,  董萌 ,  徐景升 ,  翟玉山 ,  邓宇晴 ,  郑艳茹 ,  高世武 ,  郭晋隆

IPC: G01N33/68 ,  G01N21/64 ,  C12Q1/02 ,  C12N15/82

CPC classification number: G01N33/68 ,  C12N15/8205 ,  G01N21/64 ,  G01N33/5097

Abstract: 本发明涉及一种利用甘蔗花叶病毒P3N?PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒，包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体：SCMV?P3N?PIPO?GFP、pSCMV?P3N?PIPO?RFP、pSCMV?P3N?PIPO?YFP和pSCMV?P3N?PIPO?CFP；4个无特异亚细胞定位的对照载体：pSAT6?EGFP?C1、pSAT6?ERFP?C1、pSAT6?EYFP?C1和pSAT6?ECFP?C1；限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。

公开(公告)号：CN103125355B

公开(公告)日：2014-03-12

申请号：CN201310067566.1

申请日：2013-03-04

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 高世武 ,  林庆良 ,  许莉萍 ,  阙友雄 ,  徐景升 ,  郭晋隆

IPC: A01G31/00

Abstract: 本发明涉及一种促壮甘蔗种苗循环水培方法，包括材料选择、驯化培养、过渡培养、促壮培养和壮苗假植。本发明操作简单，只需在种苗循环水培的不同阶段，使用相应浓度的甘蔗水培营养液即可，无需特别处理，实用性强，推广性好。使用本发明的方法，一般带根瓶苗经过循环水培促壮后，假植成活率可以高达95%以上，降低了甘蔗种苗脱毒快繁技术成本，经济效益显著。

公开(公告)号：CN103125355A

公开(公告)日：2013-06-05

申请号：CN201310067566.1

申请日：2013-03-04

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 高世武 ,  林庆良 ,  许莉萍 ,  阙友雄 ,  徐景升 ,  郭晋隆

IPC: A01G31/00

Abstract: 本发明涉及一种促壮甘蔗健康种苗循环水培方法，包括材料选择、驯化培养、过渡培养、促壮培养和壮苗假植。本发明操作简单，只需在健康种苗循环水培的不同阶段，使用相应浓度的甘蔗水培营养液即可，无需特别处理，实用性强，推广性好。使用本发明的方法，一般带根瓶苗经过循环水培促壮后，假植成活率可以高达95%以上，降低了甘蔗健康种苗脱毒快繁技术成本，经济效益显著。

公开(公告)号：CN105039355B

公开(公告)日：2019-07-12

申请号：CN201510570201.X

申请日：2015-09-09

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 徐景升 ,  杨永庆 ,  程光远 ,  高世武 ,  郭晋隆 ,  翟玉山 ,  彭磊 ,  邓宇晴 ,  郑艳茹 ,  许莉萍

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi沉默翻译起始因子基因培育抗花叶病甘蔗的方法，包括SceIF4E1基因和SceIF4E2基因的克隆、RNAi干扰载体构建、遗传转化、抗花叶病转基因甘蔗材料的培育及抗病性鉴定。以SceIF4E1和SceIF4E2作为RNAi干扰靶序列，经遗传转化后获得的转基因植株，产生了对甘蔗花叶病的三种病原即甘蔗花叶病毒、高粱花叶病毒和甘蔗条纹花叶病毒不同株系的广谱抗性，具有抗病性好、抗性持久且生物安全性高的特点，使转基因甘蔗的培育摆脱了对抗源基因的依赖，并且可以有效缩短甘蔗抗花叶病育种周期。采用本发明的方法培育抗花叶病转基因甘蔗，在转基因生物安全上，优于转入病毒序列的转基因甘蔗。

公开(公告)号：CN105821051B

公开(公告)日：2019-01-29

申请号：CN201610217153.0

申请日：2016-04-08

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 徐景升 ,  程光远 ,  徐倩 ,  董萌 ,  彭磊 ,  杨永庆 ,  邓宇晴 ,  高世武 ,  郭晋隆 ,  许莉萍

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明涉及一种利用RNAi阻断病毒胞间移动培育抗花叶病转基因甘蔗的方法，包括RNAi载体构建、遗传转化、转基因甘蔗植株的筛选鉴定及对花叶病的抗性鉴定。本发明采用融合PCR技术，克隆了SCMV的P3N‑PIPO的编码序列，以pGBKT7‑SCMV‑P3NPIPO为诱饵从甘蔗的酵母文库中筛选到了与P3N‑PIPO互作的甘蔗基因ScPCaP。以ScPCaP作为RNAi干扰靶序列，经遗传转化后获得了对SCMV，SrMV和SCSMV均有抗性的转基因甘蔗植株，并具有抗性广谱、抗病性好、抗性持久的特点，有效缩短了甘蔗抗花叶病育种周期。采用本发明的利用RNAi阻断病毒胞间移动的方法培育抗花叶病转基因甘蔗，在转基因生物安全上，优于转入病毒序列的转基因甘蔗。

公开(公告)号：CN105823888B

公开(公告)日：2018-05-11

申请号：CN201610216221.1

申请日：2016-04-08

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 徐景升 ,  程光远 ,  彭磊 ,  徐倩 ,  董萌 ,  杨永庆 ,  翟玉山 ,  邓宇晴 ,  郑艳茹 ,  高世武 ,  郭晋隆 ,  许莉萍

IPC: C12N15/66

Abstract: 本发明涉及一种利用甘蔗条纹花叶病毒P3N‑PIPO构建的植物亚细胞定位试剂盒，包括4个分别标记绿色、红色、黄色和青色荧光蛋白的胞间连丝定位载体：SCSMV‑P3N‑PIPO‑GFP、pSCSMV‑P3N‑PIPO‑RFP、pSCSMV‑P3N‑PIPO‑YFP和pSCSMV‑P3N‑PIPO‑CFP；4个无特异亚细胞定位的对照载体：pSAT6‑EGFP‑C1、pSAT6‑ERFP‑C1、pSAT6‑EYFP‑C1和pSAT6‑ECFP‑C1；限制性内切酶Xho I、Hind III、无RNase水和侵染液。使用本试剂盒可以快速明确目的基因表达产物是否具有胞间连丝定位的特性。