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公开(公告)号：CN105420161A
公开(公告)日：2016-03-23
申请号：CN201510964760.9
申请日：2015-12-21
Applicant: 江苏省农业科学院
CPC classification number: C12N1/20 , A61K39/0208 , A61K2039/52 , A61K2039/543
Abstract: 本发明涉及一种猪胸膜肺炎放线杆菌外膜囊泡的制备方法及其疫苗，属生物技术领域。体外以铁离子限制的培养基培养猪胸膜肺炎放线杆菌shope菌株，经离心、0.22μm过滤处理后获取无细胞培养上清，继而超速离心制备出细菌释放的外膜囊泡，经过透射电镜观察可见大部分外膜囊泡直径50nm~100nm之间，以外膜囊泡作为亚单位疫苗二次鼻内免疫小鼠，外膜囊泡免疫小鼠长期增重及肺脏眼观形态与PBS免疫组无显著差异。同时实验表明外膜囊泡是一种高效免疫刺激物，不仅能够刺激小鼠血清产生高水平的IgG，而且在小鼠肺脏中产生高水平的IgA，有效的刺激了小鼠肺脏的黏膜免疫，显现出外膜囊泡作为亚单位疫苗较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN105061602A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510481575.4
申请日：2015-08-03
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明提供用于检测抗猪产肠毒素性大肠杆菌抗体的融合蛋白、制备方法及应用，属于生物技术领域。所述融合蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。制备融合蛋白的方法，包括：将所述融合蛋白的编码基因插入pCold I质粒，得到重组载体；将所述重组载体转化宿主细胞，获得阳性重组菌；诱导所述阳性重组菌表达融合蛋白，纯化后得到所述融合蛋白。本发明融合蛋白，免疫反应性良好，产量较高，可以用于同时检测抗F4和F5型猪产肠毒素性大肠杆菌抗体。本发明试剂盒方面，检测准确、操作简便，特异性、敏感性、重复性均良好，适合于在临床应用中进行推广，为抗ETEC抗体的快速检测提供了可靠手段。
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公开(公告)号：CN103235121B
公开(公告)日：2015-08-05
申请号：CN201310087506.6
申请日：2013-03-18
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种用于检测猪输血传播病毒2型（TTV2）抗体的间接ELISA试剂盒，属于生物技术领域。包括抗原重组蛋白的制备、间接ELISA的建立、判定标准及临床血清学检测的应用。所述的抗原重组蛋白是利用pcoldI原核表达载体，构建表达猪TTV2 ORF1截短蛋白的基因工程菌pcoldI-ORF1，并将表达的重组蛋白纯化作为抗原建立了间接ELISA检测方法。该方法用于检测猪血清中TTV2的抗体水平具有重复性好、特异性高的特点，可用于猪TTV2的血清学调查，为该病的防治和流行情况的掌握提供一种快速、简便的血清学检测方法。目前该方法是国内首次利用猪TTV2 ORF1重组蛋白建立检测猪群中TTV2抗体的ELISA检测方法。
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公开(公告)号：CN102888471B
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201210436587.1
申请日：2012-11-06
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor： 温立斌 , 何孔旺 , 高晓静 , 王小敏 , 李彬 , 郭容利 , 俞正玉 , 茅爱华 , 倪艳秀 , 张雪寒 , 吕立新 , 周俊明 , 胡屹屹 , 汪伟 , 叶青 , 祝昊丹 , 于洋 , 沈江萍 , 周萍
Abstract: 本发明涉及一种利用SYBR Green I实时荧光定量PCR检测类猪圆环病毒P1的方法，属于分子生物学领域。本发明方法包括特异性引物的设计、标准质粒的构建、实时荧光定量PCR扩增方法的建立和优化、样本DNA提取及结果检测判定。本发明检测灵敏度高，稳定性高、特异性好，可以检测样本中类猪圆环病毒P1的含量，同时可以鉴别样本中猪圆环病毒2型的感染。
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公开(公告)号：CN101830985B
公开(公告)日：2012-04-25
申请号：CN201010118499.8
申请日：2010-03-05
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C07K19/00 , C12N15/31 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61P31/04 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7转位紧密粘附素受体(Tir)与内膜素受体偶联细胞骨架蛋白(TccP)重组蛋白的制备方法及应用，属于生物技术领域。取tir和tccp基因C端序列串联克隆，获得pGEM-T-tir-tccp重组质粒，构建重组质粒pGEX-4T-1-tir-tccp，转化入感受态细胞BL21(DE3)中，获得重组菌株，经IPTG诱导后获得高效表达。本发明制备的重组蛋白Tir-TccP具有良好的免疫原性，可诱导机体产生高滴度的保护性抗体。Tir-TccP可作为研制亚单位疫苗的候选多价融合蛋白，为预防和治疗肠出血性大肠杆菌O157:H7感染提供了技术平台和防控手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100594237C
公开(公告)日：2010-03-17
申请号：CN200710134465.6
申请日：2007-10-23
Applicant: 江苏省农业科学院 , 南京天邦生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)猪链球菌2型(SS2)缺失株，属于生物技术领域。包括设计引物，获取impdh基因上下游序列(IN和IC)和氯霉素(cat)基因完整表达盒，基因经串联并克隆入simple pMD18-T载体，串联片段经测序后再经酶切后克隆入温敏质粒pSET4s载体，构建重组基因敲除质粒pSET4s-IN-cat-IC，转化入SS2。IMPDHm培养特性、生化特性和致病性较亲本菌株SS2有明显的不同。本发明构建了IMPDH缺失菌株(IMPDHm)，可用于研制SS2的基因缺失灭活疫苗，为更加安全而有效的防控猪链球菌病提供技术方法。
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公开(公告)号：CN103255171B
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201310072085.X
申请日：2013-03-07
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N15/866 , A61K48/00 , A61K39/12 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及猪圆环病毒（PCV）2型密码子优化的ORF2基因重组杆状病毒病毒样粒子，属于生物制药领域。将所有PCV2 ORF2序列进行比对分析，得到人工合成的密码子优化的PCV2 ORF2序列，命名为YHsfORF2。将YHsfORF2克隆、转染，获得重组杆状病毒vFBHYHsfORF2。密码子优化的ORF2基因能够在重组病毒中高效表达，并能形成病毒样颗粒。本发明还涉及该重组病毒在疫苗方面的应用，动物免疫保护试验表明该重组病毒灭活疫苗，可刺激机体产生高效的免疫应答，有效抑制PCV2在动物体内的复制，对PCV2感染有较好的免疫预防保护作用。
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公开(公告)号：CN102928605B
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201210436636.1
申请日：2012-11-06
Applicant: 江苏省农业科学院
Inventor： 何孔旺 , 文世富 , 温立斌 , 王小敏 , 李彬 , 郭容利 , 俞正玉 , 茅爱华 , 倪艳秀 , 张雪寒 , 吕立新 , 周俊明 , 胡屹屹 , 汪伟 , 叶青 , 祝昊丹 , 于洋 , 沈江萍 , 周萍
IPC: G01N33/68 , G01N33/531
Abstract: 本发明涉及一种用于检测类猪圆环病毒P1抗体的间接ELISA试剂盒。属于生物技术领域。包括抗原重组蛋白的制备、间接ELISA建立、判定标准及临床血清学检测的应用。所述的抗原重组蛋白是利用pET-28a(+)原核表达载体，构建的表达类猪圆环病毒P1Cap衣壳蛋白C端部分氨基酸序列的3个重复的基因工程菌BLpET-28a-3pCap,并将表达的重组蛋白纯化后的Cap蛋白。该方法用于检测猪血清中类猪圆环病毒P1的抗体水平具有重复性好、特异性高的特点，可用于类猪圆环病毒P1血清学调查，为该病的防治和流行情况的掌握提供一种快速、简便的检测方法。目前该方法是国际上首次利用P1衣壳蛋白建立检测猪群中P1抗体的ELISA。
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公开(公告)号：CN102876620B
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201210413985.1
申请日：2012-10-26
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一株无毒ST28猪链球菌及其应用，属生物技术领域。采集健康屠宰猪的扁桃体样品，增菌处理后提取细菌的DNA，应用聚合酶链式反应鉴定cps2j基因，随后经过细菌平板分离获得纯培养细菌，对纯培养细菌进行革兰氏染色、血清凝集和聚合酶链式反应、多位点序列分型，确定分离到猪链球菌2型菌株及其序列型；经过Balb/c小鼠、新西兰兔、长白仔猪的动物实验，证实该菌HA0609为无毒菌株。该菌1次肌肉注射新西兰兔、2次腹腔注射CD1小鼠后，能够提供受免动物一定的免疫能力，对HA0609免疫保护性抗原的分析，能用于猪链球菌病亚单位疫苗的研制。
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公开(公告)号：CN103235121A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310087506.6
申请日：2013-03-18
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种用于检测猪输血传播病毒2型（TTV2）抗体的间接ELISA试剂盒，属于生物技术领域。包括抗原重组蛋白的制备、间接ELISA的建立、判定标准及临床血清学检测的应用。所述的抗原重组蛋白是利用pcoldI原核表达载体，构建表达猪TTV2ORF1截短蛋白的基因工程菌pcoldI-ORF1，并将表达的重组蛋白纯化作为抗原建立了间接ELISA检测方法。该方法用于检测猪血清中TTV2的抗体水平具有重复性好、特异性高的特点，可用于猪TTV2的血清学调查，为该病的防治和流行情况的掌握提供一种快速、简便的血清学检测方法。目前该方法是国内首次利用猪TTV2ORF1重组蛋白建立检测猪群中TTV2抗体的ELISA检测方法。
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