β-1,4-内切木聚糖酶催化域(AorXyn10BC)基因的克隆及表达

    公开(公告)号:CN102492707A

    公开(公告)日:2012-06-13

    申请号:CN201110410397.8

    申请日:2011-12-12

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提出了一种源自米曲霉(Aspergillus oryzae)CICC 40186的新型10家族木聚糖酶催化域基因cDNA序列的克隆及分析、质粒构建及表达方法,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1。生物信息学分析表明该木聚糖酶催化域属于糖苷水解酶第10家族,命名为Aor Xyn10BC,其氨基酸序列为SEQ ID NO:2,相应的基因命名为Aor xyn10BC。这为该基因的异源表达和工业化生产奠定了理论基础。本发明还公开了木聚糖酶工程菌的构建以及重组木聚糖酶的高效表达和纯化的方法。作为一种新型酶制剂,该木聚糖酶具有较大的工业化生产和应用潜力及经济价值,也为其它木聚糖酶的研究奠定了理论基础。

    姜黄素/抗坏血酸稳定化核-壳粒子及其制备方法

    公开(公告)号:CN114868916B

    公开(公告)日:2023-07-25

    申请号:CN202210273198.5

    申请日:2022-03-18

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种姜黄素/抗坏血酸稳定化核‑壳粒子及其制备方法和应用,属于功能食品技术领域。本发明所述的制备方法包括以下步骤:(1)将壳聚糖与抗坏血酸通过静电作用结合,利用三聚磷酸钠离子交联壳聚糖,形成抗坏血酸‑壳聚糖复合体系;(2)碱性条件下去质子化溶解姜黄素,并使酪蛋白酸钠结构展开,得到酪蛋白酸钠‑姜黄素混合溶液;(3)向步骤(2)所得的酪蛋白酸钠‑姜黄素混合溶液中加入所述抗坏血酸‑壳聚糖复合体系,经优化调节pH至弱酸性,得到所述的姜黄素/抗坏血酸稳定化核‑壳粒子。本发明所述的粒子具有良好的水溶性、稳定性以及抗氧化活性,不涉及醇相溶剂的添加;同时本发明提供了一种简单便捷的制备方法和应用。

    一种N端替换提高米曲霉木聚糖酶(AoXyn11A)热稳定性的方法

    公开(公告)号:CN104388412B

    公开(公告)日:2017-10-31

    申请号:CN201410757519.4

    申请日:2014-12-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种N端替换提高米曲霉木聚糖酶热稳定性的方法。基于高性能计算机及其相关生物学软件对Aspergillus oryzae常温木聚糖酶AoXyn11A耐热性改造的理性设计,将AoXyn11A N端41个氨基酸替换成同一家族耐热木聚糖酶TfGH11 N端42个氨基酸,获得了一种耐热杂合木聚糖酶ATX11A,其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。该杂合酶基因ATx11A是采用大引物PCR技术由AoXyn11A和TfGH11基因的相应片段拼接而成的,其核苷酸序列为SEQ ID NO:2。将重组毕赤酵母GS115/ATx11A在30℃诱导72 h,期间每隔24 h添加1.0%(v/v)甲醇。表达的耐热杂合酶ATX11A的最适温度由AoXyn11A的50℃提高至65℃;在60℃处理1 h,ATX11A的半衰期由AoXyn11A的1.3 min延长至55 min。

    一种GH11耐热木聚糖酶基因的异源表达

    公开(公告)号:CN104388450A

    公开(公告)日:2015-03-04

    申请号:CN201410758794.8

    申请日:2014-12-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一种源自嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)GH11耐热木聚糖酶的密码子优化基因在大肠杆菌中表达、活性测定和酶学性质分析的方法。其基因命名为Syxyl11,它的核苷酸序列为SEQ ID NO:1,编码的蛋白质为SyXyl11,氨基酸序列为SEQ ID NO:2。该酶活性为47.5U/mL;其最适反应温度为70℃,70℃下保温60min,残余酶活为78.3%,表明该酶的热稳定性比较好;其最适pH为6.0,在pH5.0~8.0范围内较稳定;金属离子对该酶活性影响较小。这为该酶的产业化生产奠定了理论基础,有较大的工业化应用潜力及经济价值。

    一种双酶法从小麦麸皮中制备阿魏酸的方法

    公开(公告)号:CN103642851A

    公开(公告)日:2014-03-19

    申请号:CN201310666358.3

    申请日:2013-12-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一种双酶法从小麦麸皮中制备阿魏酸的方法。利用来源于本实验室的重组阿魏酸酯酶(reAorFaeA)和重组木聚糖酶(reAoXynllA)协同作用对小麦麸皮进行酶解,释放阿魏酸,得到阿魏酸粗提液。采用HPD-300弱极性大孔树脂对阿魏酸粗提液进行纯化,将纯化得到的含有阿魏酸的馏分进行真空干燥得到阿魏酸产品。采用本发明提取制备阿魏酸原料廉价易得,产物纯度较高,制备工艺简单,操作简便易行,环境友好,适用于工业化放大生产。

    β-1,4-内切木聚糖酶(AorXyn10B)基因的克隆及序列分析

    公开(公告)号:CN102492708A

    公开(公告)日:2012-06-13

    申请号:CN201110410508.5

    申请日:2011-12-12

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提出了一种源自米曲霉(Aspergillus oryzae)CICC 40186的新型10家族木聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法及分析,其核苷酸序列分别为SEQ IDNO:1和SEQ ID NO:2。生物信息学分析表明该木聚糖酶属于糖苷水解酶第10家族,命名为Aor Xyn10B,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3,相应的基因命名为Aor xyn10B。这为该基因的异源表达和工业化生产奠定了理论基础。作为一种新型酶制剂,该木聚糖酶具有较大的工业化生产和应用潜力及经济价值,也为其它木聚糖酶的研究奠定了理论基础。

    一种制备共包埋双重抗氧化剂的方法

    公开(公告)号:CN112126519B

    公开(公告)日:2022-04-29

    申请号:CN202010971483.5

    申请日:2020-09-16

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种制备共包埋双重抗氧化剂的方法,所述方法是以酪蛋白粒子为载体,共包埋两种具有不同溶解性的抗氧化剂。本发明所得均一共包埋体系,酪蛋白具有很好的营养价值,同时包埋不同溶解性的白藜芦醇和EGCG特点,它们的包埋率分别约为68%和99%。此外,将所得的共包埋体系用于稳定化鱼油乳状液,EGCG和白藜芦醇在油‑水界面含量分别为87%和78%,两者依序起作用,EGCG先于白藜芦醇对鱼油起到保护作用,提高了鱼油的氧化稳定性,延长了鱼油的储藏期。

    一种添加二硫键以提高阿魏酸酯酶A热稳定性的方法

    公开(公告)号:CN104531729B

    公开(公告)日:2017-06-13

    申请号:CN201410758084.5

    申请日:2014-12-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明的目的是提供一种阿魏酸酯酶A热稳定性改造、突变阿魏酸酯酶A工程菌构建以及突变阿魏酸酯酶A高效异源表达的方法。根据来源于A.usamii E001阿魏酸酯酶A(AuFaeA)的空间结构设计突变A126C和N152C,得到突变阿魏酸酯酶A:AuFaeAA126C‑N152C,其成熟肽基因序列为SEQ ID NO:1,C126和C152可以形成一个二硫键。实验结果表明突变后该酶热稳定性有了明显的提高,为其它酶的改造提供新的技术路径,作为一种耐热型的酶制剂,该阿魏酸酯酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

Patent Agency Ranking