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公开(公告)号:CN101550427B
公开(公告)日:2011-09-14
申请号:CN200910066596.4
申请日:2009-02-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/06 , A01K67/027 , C12Q1/25
Abstract: 本发明提供一种检测Cre位点特异重组酶活性的转基因报告猪及培养方法,采用基因工程的方法构建LoxP位点锚定终止子,后接报告基因的打靶载体,当Cre重组酶存在的情况下,将Loxp卯定的终止子删除,使后接的报告基因得以表达,从而用于监测Cre重组酶的活性;通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以特异性检测Cre活性的成纤维细胞;利用体核移植技术进行克隆猪。用于在体内监测Cre重组酶的活性,为建立人类疾病模型提供了监测工具,解决了目前转基因克隆猪的技术不成熟,克隆效率较低问题。
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公开(公告)号:CN108315339B
公开(公告)日:2021-09-07
申请号:CN201711284310.0
申请日:2017-12-07
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供一种连接多泛素基因的方法,提供了优化的泛素(ubiquitin、Ub)基因作为多泛素基因连接的基本单位,用于表达载体的构建,同时本方法利用泛素基因的3’端核苷酸序列的特殊性来设计特殊的平末端酶切位点,并通过平末端限制性核酸内切酶stuI的特殊性将泛素基因连接成一个串联基因。线性多泛素分子可作为细胞内修饰靶蛋白并参与免疫调节的蛋白因子,具有非常广阔的研究及应用前景。本发明中涉及的多泛素基因的连接方法能够快速制备出所需长度泛素的基因,具有工艺简单、安全无毒,成本低等优点。
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公开(公告)号:CN112826818A
公开(公告)日:2021-05-25
申请号:CN202110290097.4
申请日:2021-03-18
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明涉及穗花杉双黄酮在制备金黄色葡萄球菌转录调控因子MgrA抑制剂中的应用,以金黄色葡萄球菌转录调控因子MgrA为药物靶标,使用荧光各向异性分析法从天然化合物中筛选出能够显著抑制MgrA的活性的药物穗花杉双黄酮,并在不影响细菌正常生长的前提下可显著降低耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的毒力,不易导致细菌耐药性的产生。在体内实验中,穗花杉双黄酮对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染引起的小鼠肺炎的治疗效果显著,能够大幅提高感染小鼠的生存能力和减轻肺脏组织的炎症反应。综上所述,本研究提出穗花杉双黄酮作为一种有效的金黄色葡萄球菌转录调控因子MgrA抑制剂,为临床上有效防治耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染提供了新的研发策略和先导化合物。
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公开(公告)号:CN106191043B
公开(公告)日:2019-07-02
申请号:CN201610595053.1
申请日:2016-07-26
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明公开了一种基因片段,所述基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,本发明还提供了一种载体pPlasmid‑Clearance,所述载体pPlasmid‑Clearance是通过同源重组的方法,在接合转移载体pEF01的抗性基因区域插入核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段构建而成,所述接合转移载体pEF01的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该基因片段和载体pPlasmid‑Clearance可以逆转环境及动物内菌群中多粘菌素耐药基因mcr‑1耐药菌的耐药性,阻断多粘菌素耐药基因mcr‑1的传播,在细菌性疾病的预防和临床治疗上具有极大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN105106188A
公开(公告)日:2015-12-02
申请号:CN201510600000.X
申请日:2015-09-21
Applicant: 吉林大学
IPC: A61K31/216 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了一种绿原酸的新用途,将绿原酸作为Sortase A抑制剂进行应用,包括绿原酸直接添加以及以绿原酸为主要成分的植物提取物为添加物用于治疗病原菌感染。本发明的优点是在绿原酸添加剂量远低于其MIC的浓度下即可有效抑制SortaseA的活性,从而抑制其与细胞外基质的粘附,来有效治疗金黄色葡萄球菌等病原菌的感染。这种以毒力因子为靶标的作用机制有别于传统的抗生素,不易产生耐药性,也与现有抗生素没有交叉耐药性,因此对现在临床耐药病原菌感染也能有效治疗。
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公开(公告)号:CN106188260A
公开(公告)日:2016-12-07
申请号:CN201610537646.2
申请日:2016-07-08
Applicant: 吉林大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12Q1/37 , C12R1/19
CPC classification number: C07K14/43595 , C12N15/70 , C12N2800/101 , C12Q1/37
Abstract: 本发明公开了一种检测分选酶Sortase A活性的底物蛋白,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,该底物蛋白是用原核表达载体表达制备,不需要化学合成和修饰,一般实验条件下就可制备,成本低、周期短,且不受化学合成技术的限制,底物蛋白的制备成功率高,具有很好的应用前景。本发明还公开了一种检测分选酶Sortase A活性的底物蛋白表达载体及其构建方法,还公开了一种利用上述底物蛋白表达载体检测金黄色葡萄球菌的分选酶Sortase A活性的方法。
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公开(公告)号:CN101892257A
公开(公告)日:2010-11-24
申请号:CN201010185086.1
申请日:2010-05-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/63
Abstract: 本发明涉及一种表达猪源Cre重组酶载体pCEP4-Cre的构建,其特征在于:首先采用基因工程的方法构建pCEP4-Cre质粒,并用载体pCEP4-Cre与载体pEF-stop-eGFP共转染进入细胞,在表达Cre重组酶的情况下,将转入到细胞中的载体pEF-stop-eGFP中的Loxp卯定的终止子删除,使后接的报告基因eGFP得以表达,从而用于剪切条件性表达绿色荧光蛋白载体中的LoxP元件;其应用基因工程技术构建了一个表达Cre重组酶的质粒,并且重组质粒pCEP4-Cre可以在药物压力下独立于细胞染色体外存在,并在撤去药物压力后以每代10%的速率丢失;可有效的防止细胞基因组因插入外源基因而导致的基因突变;其使用的简便性和安全性可被广泛的应用,为人类Cre重组酶系统的检测发展起到积极的推动作用。
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公开(公告)号:CN101570763A
公开(公告)日:2009-11-04
申请号:CN200910066584.1
申请日:2009-03-04
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明提供一种用于制备人类疾病动物模型的转基因猪及其培养方法,采用基因工程的方法构建诱导性表达Cre重组酶表达载体pET28a-Mxl-Cre-BGHpolyA-FRT2neoR,用干扰素诱导剂聚肌胞(polyI:C)进行诱导后能够表达Cre重组酶,从而用于敲除靶基因;通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以诱导性表达Cre重组酶的猪成纤维细胞;利用体细胞核移植技术进行克隆猪。该克隆猪可用于制备人类疾病的基因敲除的动物模型。
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公开(公告)号:CN101550427A
公开(公告)日:2009-10-07
申请号:CN200910066596.4
申请日:2009-02-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/06 , A01K67/027 , C12Q1/25
Abstract: 本发明提供一种检测Cre位点特异重组酶活性的转基因报告猪及培养方法,采用基因工程的方法构建LoxP位点锚定终止子,后接报告基因的打靶载体,当Cre重组酶存在的情况下,将Loxp锚定的终止子删除,使后接的报告基因得以表达,从而用于监测Cre重组酶的活性;通过细胞转染及细胞筛选技术筛选出可以特异性检测Cre活性的成纤维细胞;利用体核移植技术进行克隆猪。用于在体内监测Cre重组酶的活性,为建立人类疾病模型提供了监测工具,解决了目前转基因克隆猪的技术不成熟,克隆效率较低问题。
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