一种用于检测番茄不孕病毒的方法

    公开(公告)号:CN101451166A

    公开(公告)日:2009-06-10

    申请号:CN200810240416.5

    申请日:2008-12-19

    Abstract: 本发明的目的是提供一种检测番茄不孕病毒(TAV)的方法,该方法利用环介导等温扩增反应(LAMP)检测番茄不孕病毒(TAV);该方法包括的步骤依次为:配制反应体系、温育处理、灭活处理、产物检测;所述的反应体系中包括:Betaine:0.5-1.5mol/L,dNTP:2-25mmol/L,Mg2+:2-15mmol/L,外引物,内引物;所述的内引物和外引物的浓度之比为1∶1-1∶8。本发明的有益效果为:不需要特殊仪器(如PCR仪),较实验室常规律方法更快捷,经济;鉴定简便,有极高的特异性,只要用肉眼观察或浊度仪紫外成像系统检测沉淀浊度就能够判断目的片段扩增与否,从而判断出用于检测的样品植株是否感染有番茄不孕病毒,而不必用凝胶电泳的方法来观察。

    双斑萤叶甲V-ATPase A基因及其应用
    14.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118546958A

    公开(公告)日:2024-08-27

    申请号:CN202410772898.8

    申请日:2024-06-14

    Abstract: 本发明公开了一种双斑萤叶甲中编码Vacuolar‑type H+‑ATPase(V‑ATPase)A subunit的V‑ATPase A基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,本发明还公开了所述双斑萤叶甲V‑ATPase A基因的表达蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明克隆得到了一种双斑萤叶甲V‑ATPase A基因并研究了其在防治害虫方面的应用,开发基于玉米自身抗虫品质提升的防控策略,对于有效管理这一新型害虫至关重要。本发明为基于RNAi原理的转基因抗虫植物的开发提供了坚实的科学基础。

    一种不依赖小麦受体基因型的花粉纳米磁珠遗传转化方法

    公开(公告)号:CN117126877A

    公开(公告)日:2023-11-28

    申请号:CN202311058269.0

    申请日:2023-08-22

    Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域,具体涉及一种不依赖小麦受体基因型的花粉纳米磁珠遗传转化方法。采用带正电荷的磁性纳米颗粒作为载体与带负电荷的DNA结合,在磁场作用下,结合了DNA的磁性纳米颗粒通过花粉孔将DNA转运至小麦花粉中,并通过授粉和结实的自然生殖过程,实现外源目的基因的导入及在花粉中的瞬时表达。本发明的方法规避、克服了细胞壁的阻碍问题,通过纳米磁珠质粒复合物在磁场的牵引下进入花粉孔,从而实现外源DNA导入小麦花粉的过程;不涉及小麦愈伤组织再生问题,不受小麦基因型限制;不涉及再生植株抗性筛选问题。

    玉米异荭草素含量相关的KASP标记及其应用

    公开(公告)号:CN113817861B

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202111192614.0

    申请日:2021-10-13

    Abstract: 本发明公开了一种玉米异荭草素含量相关的KASP标记及其应用。本发明提供了一种KASP引物组,包括第一引物组和/或第二引物组;所述第一引物组由序列表中序列1所示的引物1的衍生物、序列表中序列2所示的引物2的衍生物和序列表中序列3所示的引物3组成;所述第二引物组由序列表中序列4所示的引物4的衍生物、序列表中序列5所示的引物5的衍生物和序列表中序列6所示的引物6组成。本发明能在幼苗阶段对玉米花丝异荭草素含量进行准确预测,将有助于实现高效分子辅助育种的现实目标。

    一种制备转基因玉米花粉的方法及其使用的试剂盒

    公开(公告)号:CN114621973B

    公开(公告)日:2022-07-19

    申请号:CN202210532986.1

    申请日:2022-05-17

    Abstract: 本发明公开了一种制备转基因玉米花粉的方法及其使用的试剂盒。该方法包括如下步骤:向玉米花粉中加入8℃预冷的玉米花粉培养液,混匀,之后8℃处理10min,得到开孔预处理液;之后加入携带目的基因的质粒和PEG转化液,混匀,之后8℃处理20min;收集沉淀并干燥,获得转基因玉米花粉;转基因玉米花粉中含有目的基因。玉米花粉培养液由蔗糖、H3BO3、KNO3、Ca(NO3)2·4H2O、MnSO4·H2O、MgSO4·7H2O、GA3和水组成。本发明提供的方法价格低廉,既能通过低温环境保持大部分的玉米花粉活力,又能提高外源DNA的导入效率,且不受玉米基因型限制。本发明具有重要的应用价值。

    一种制备转基因玉米花粉的方法及其使用的试剂盒

    公开(公告)号:CN114621973A

    公开(公告)日:2022-06-14

    申请号:CN202210532986.1

    申请日:2022-05-17

    Abstract: 本发明公开了一种制备转基因玉米花粉的方法及其使用的试剂盒。该方法包括如下步骤:向玉米花粉中加入8℃预冷的玉米花粉培养液,混匀,之后8℃处理10min,得到开孔预处理液;之后加入携带目的基因的质粒和PEG转化液,混匀,之后8℃处理20min;收集沉淀并干燥,获得转基因玉米花粉;转基因玉米花粉中含有目的基因。玉米花粉培养液由蔗糖、H3BO3、KNO3、Ca(NO3)2·4H2O、MnSO4·H2O、MgSO4·7H2O、GA3和水组成。本发明提供的方法价格低廉,既能通过低温环境保持大部分的玉米花粉活力,又能提高外源DNA的导入效率,且不受玉米基因型限制。本发明具有重要的应用价值。

    一种改良的玉米花粉磁转染方法

    公开(公告)号:CN114085866A

    公开(公告)日:2022-02-25

    申请号:CN202111418727.8

    申请日:2021-11-26

    Abstract: 本发明公开了一种改良的玉米花粉磁转染方法,包括如下步骤:(1)制备转染用质粒DNA;(2)纳米磁珠MNP与质粒DNA在室温条件下结合,形成MNP‑DNA复合物;(3)收集玉米盛花期的新鲜花粉,隔水在冰盒保存条件下,迅速带回室内;(4)将玉米花粉转化液与过筛的玉米花粉混匀,低温条件下进行开孔预处理;(5)将MNP‑DNA复合物加入到开孔预处理液中,轻柔混匀,置于低温预冷的磁板上进行转染;(6)转染结束后,将花粉悬液用冰盒带至田间,直接对玉米雌穗进行授粉。本发明方法直接利用大田种植的玉米进行转化,仅需常规制冷设备,操作简便,成本低廉,适用于所有玉米品种。

    一种用于检测菊花B病毒的方法

    公开(公告)号:CN101451165A

    公开(公告)日:2009-06-10

    申请号:CN200810240415.0

    申请日:2008-12-19

    Abstract: 本发明的目的是提供一种利用环介导等温扩增反应(LAMP)检测菊花B病毒(CVB)的方法,该方法利用环介导等温扩增反应(LAMP)检测菊花B病毒(CVB);该方法包括的步骤依次为:配制反应体系、温育处理、灭活处理、产物检测;所述的反应体系中包括:Betaine:0.6-1.4mol/L,dNTP:0.25-2.5mmol/L,Mg2+:2-12mmol/L,外引物,内引物;所述的内引物和外引物的浓度之比为1∶1-1∶8。本发明的有益效果为:不需要特殊仪器(如PCR仪),较实验室常规律方法更快捷,经济;鉴定简便,有极高的特异性,只要用肉眼观察或浊度仪紫外成像系统检测沉淀浊度就能够判断目的片段扩增与否,从而判断出用于检测的样品植株是否感染有菊花B病毒,而不必用凝胶电泳的方法来观察。

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