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公开(公告)号:CN117625574A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202311687975.1
申请日:2023-12-08
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一种玉米ALS2基因突变体,该突变体是由野生型的ALS2基因在第10位的碱基G被碱基A取代发生点突变而得到的,核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示,其编码的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.2所示。所述玉米ALS2基因突变体能使玉米具有抗苯磺隆除草剂的特性。
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公开(公告)号:CN114085866B
公开(公告)日:2022-09-23
申请号:CN202111418727.8
申请日:2021-11-26
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一种改良的玉米花粉磁转染方法,包括如下步骤:(1)制备转染用质粒DNA;(2)纳米磁珠MNP与质粒DNA在室温条件下结合,形成MNP‑DNA复合物;(3)收集玉米盛花期的新鲜花粉,隔水在冰盒保存条件下,迅速带回室内;(4)将玉米花粉转化液与过筛的玉米花粉混匀,低温条件下进行开孔预处理;(5)将MNP‑DNA复合物加入到开孔预处理液中,轻柔混匀,置于低温预冷的磁板上进行转染;(6)转染结束后,将花粉悬液用冰盒带至田间,直接对玉米雌穗进行授粉。本发明方法直接利用大田种植的玉米进行转化,仅需常规制冷设备,操作简便,成本低廉,适用于所有玉米品种。
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公开(公告)号:CN114621973B
公开(公告)日:2022-07-19
申请号:CN202210532986.1
申请日:2022-05-17
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一种制备转基因玉米花粉的方法及其使用的试剂盒。该方法包括如下步骤:向玉米花粉中加入8℃预冷的玉米花粉培养液,混匀,之后8℃处理10min,得到开孔预处理液;之后加入携带目的基因的质粒和PEG转化液,混匀,之后8℃处理20min;收集沉淀并干燥,获得转基因玉米花粉;转基因玉米花粉中含有目的基因。玉米花粉培养液由蔗糖、H3BO3、KNO3、Ca(NO3)2·4H2O、MnSO4·H2O、MgSO4·7H2O、GA3和水组成。本发明提供的方法价格低廉,既能通过低温环境保持大部分的玉米花粉活力,又能提高外源DNA的导入效率,且不受玉米基因型限制。本发明具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN114621973A
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN202210532986.1
申请日:2022-05-17
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一种制备转基因玉米花粉的方法及其使用的试剂盒。该方法包括如下步骤:向玉米花粉中加入8℃预冷的玉米花粉培养液,混匀,之后8℃处理10min,得到开孔预处理液;之后加入携带目的基因的质粒和PEG转化液,混匀,之后8℃处理20min;收集沉淀并干燥,获得转基因玉米花粉;转基因玉米花粉中含有目的基因。玉米花粉培养液由蔗糖、H3BO3、KNO3、Ca(NO3)2·4H2O、MnSO4·H2O、MgSO4·7H2O、GA3和水组成。本发明提供的方法价格低廉,既能通过低温环境保持大部分的玉米花粉活力,又能提高外源DNA的导入效率,且不受玉米基因型限制。本发明具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN114085866A
公开(公告)日:2022-02-25
申请号:CN202111418727.8
申请日:2021-11-26
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一种改良的玉米花粉磁转染方法,包括如下步骤:(1)制备转染用质粒DNA;(2)纳米磁珠MNP与质粒DNA在室温条件下结合,形成MNP‑DNA复合物;(3)收集玉米盛花期的新鲜花粉,隔水在冰盒保存条件下,迅速带回室内;(4)将玉米花粉转化液与过筛的玉米花粉混匀,低温条件下进行开孔预处理;(5)将MNP‑DNA复合物加入到开孔预处理液中,轻柔混匀,置于低温预冷的磁板上进行转染;(6)转染结束后,将花粉悬液用冰盒带至田间,直接对玉米雌穗进行授粉。本发明方法直接利用大田种植的玉米进行转化,仅需常规制冷设备,操作简便,成本低廉,适用于所有玉米品种。
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