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公开(公告)号：CN109164261A
公开(公告)日：2019-01-08
申请号：CN201810970970.2
申请日：2018-08-24
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种检测马铃薯卷叶病毒的方法及其专用抗体。本发明首先制备了氨基酸序列如序列表中序列4或序列6所示的PLRV-MP蛋白，然后将PLRV-MP蛋白作为免疫原对动物加强免疫，获得的多克隆抗体。采用Western blot，以该多克隆抗体为一抗检测马铃薯卷叶病毒，不仅准确率高、灵敏度高，而且特异性好。本发明可检测待测样品是否含有马铃薯卷叶病毒，具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN103740670B
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201410014620.0
申请日：2014-01-13
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N9/10 , C07K16/40 , G01N33/573
Abstract: 本发明公开了筛选草甘膦N-乙酰转移酶抗血清的试剂盒。本发明提供了草甘膦N-乙酰转移酶在制备筛选抗草甘膦N-乙酰转移酶血清试剂盒中的应用；所述草甘膦N-乙酰转移酶的氨基酸序列为如下1）或2）：1）序列表中的序列2自N端第114-260位氨基酸残基；2）序列表中的序列2。本发明的实验证明，本发明首次利用原核表达蛋白制备草甘膦N-乙酰转移酶抗血清的方法，成功地获得了GAT的抗血清，并且可以用于转基因植物目标蛋白的特异性检测。
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公开(公告)号：CN102329872B
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN201110301170.X
申请日：2011-09-28
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明公开了鉴定甜菜褐斑病致病菌对多菌灵抗性的方法及其专用引物。本发明提供了一种用于鉴定或辅助鉴定甜菜褐斑病致病菌对多菌灵抗性的引物对，由序列表中序列1所示的引物和序列表中序列2所示的引物组成。本发明所提供的辅助鉴定甜菜褐斑病致病菌对多菌灵抗性的方法及其专用引物能有效地检测出对多菌灵表现为敏感或高抗的甜菜褐斑病菌，检测方法具有很高的特异性，且整个检测过程快速，检测成本较低，可操作性较强。因此，本发明所设计的引物和检测方法可用来快速、准确的检测甜菜褐斑病菌对多菌灵的抗性水平。
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公开(公告)号：CN114058508A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111501818.8
申请日：2021-12-09
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N1/02 , C12Q1/6895 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了快速分离纯化尾孢菌以及抗药性检测的方法。分离纯化尾孢菌菌株采用振荡洗脱病斑上分生孢子的方法，简便易行，不需要在显微镜下进行操作，同时省略了对植物样品进行清洗和表面消毒的步骤，缩短了真菌分离的时间，避免了因表面消毒过度可能造成病原菌杀灭的风险；同时能有效的排除其他病原菌的干扰，提高了尾孢菌分离的准确率。筛选抗药性尾孢菌的方法显著提高了抗药性检测的效率，直接在带药平板上进行筛选，节省了传统抗药性检测必须先进行病原菌分离纯化的过程，节约了时间和试验材料，更加简便快捷。本发明提供的方法适用于尾孢菌属真菌对大田常用杀菌剂的快速、简便的抗性检测，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN110526960B
公开(公告)日：2021-04-16
申请号：CN201810508832.2
申请日：2018-05-24
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一类抗病毒多肽及其制备方法与应用，所述抗病毒多肽含有如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.8所示的任意一种氨基酸序列，将所述抗病毒多肽基因转化至植物中具有显著的抗病毒效果，且对黄瓜花叶病毒、大麦条纹花叶病毒等多种病毒都具有较强的抗病毒作用。采用酵母表达系统制备所述抗病毒多肽，将表达多肽喷施至植物表面，植物的病毒侵染量显著降低。本发明提供的抗病毒多肽可以用于防治植物的多种病毒侵染，利用生物制剂在生产中进行植物保护，实现有效的植物免疫防御，从而减少农药使用，有效提高植物质量和产量，提高农作物的经济和社会效应。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110885363A
公开(公告)日：2020-03-17
申请号：CN201911302490.X
申请日：2019-12-17
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种丝瓜蚜传黄化病毒运动蛋白(SABYV-MP)表达纯化方法以及SABYV-MP多克隆抗血清的制备和检测试剂盒的构建，其中SABYV-MP表达纯化步骤为：(1)SABYV-MP基因的调取及扩增；(2)SABYV-MP基因原核表达载体构建；(3)His-tag-(SABYV-MP)融合蛋白的原核表达；(4)His-tag-(SABYV-MP)融合蛋白的纯化；(5)SABYV-MP蛋白的获得。采用本发明所述方法获得的SABYV-MP蛋白多克隆抗血清不仅准确率高、灵敏度高，而且特异性较好，可实现丝瓜蚜传黄化病毒及其运动蛋白的准确检测，具有较大的应用价值和市场前景。
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公开(公告)号：CN110396503A
公开(公告)日：2019-11-01
申请号：CN201910660873.8
申请日：2019-07-22
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用桃蚜(Myzus persicae)获取马铃薯卷叶病毒属芸薹黄化病毒(Brassica yellows virus，BrYV)的方法，具体步骤为：S1：获得携带芸薹黄化病毒的病毒转基因植株；S2：获得饲毒用无毒蚜虫；S3：用所述无毒桃蚜从含有病毒基因组的转基因植株和冷冻病叶中获得病毒；S4：检测获毒后所述桃蚜的传毒能力。采用本发明建立的芸薹黄化病毒等马铃薯卷叶属病毒获毒方法可以很好地克服采用患病植株饲毒桃蚜中存在的植株难以长期保存、占用空间、不便于运送和毒源易混杂等的技术瓶颈，拓宽了介体昆虫获毒及品种抗性鉴定等的简便性、快速性和可靠性。
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公开(公告)号：CN109609546A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201811547209.4
申请日：2018-12-18
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/83
Abstract: 本发明公开了一种植物多分体病毒载体的开发和应用。本发明提供了成套重组病毒载体，包括表达BN1的重组载体和表达BN2的重组载体；所述表达BN1的重组载体为将BNYVV基因组的RNA1全长CDNA序列替换双元表达载体的多克隆位点间的DNA片段得到的载体，表达BNYVV病毒的RNA1；所述表达BN2的重组载体为将BNYVV基因组的RNA2全长CDNA序列替换所述双元表达载体的多克隆位点间的DNA片段得到的载体，表达BNYVV病毒的RNA2。本发明采用的多分体病毒表达载体能在植物同一个细胞内同时表达多个蛋白；在植物体内表达量比较高，周期短，并且可以系统侵染。
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公开(公告)号：CN101748135A
公开(公告)日：2010-06-23
申请号：CN201010033727.1
申请日：2010-01-05
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了利用烟草坏死病毒A(Tobacco necrosis virus A，TNV-A)作为外源基因的表达载体，通过基因替换或融合的方式将外源基因整合入TNV-A基因组中，外源蛋白可以伴随TNV-A在植物中的高效侵染和复制而得到高效表达。以替换β-葡糖醛酸酶基因(gus)为例，表明TNV-A可以作为外源蛋白高效表达载体；选择口蹄疫(foot-and-mouth disease virus，FMDV)结构蛋白VP1上的不同肽段融合入TNV-A外壳蛋白(coat protein，CP)中，表明TNV-A可以作为高效的外源表位肽展示载体，并且重组病毒(chimaeric virus)可以通过肌肉免疫和滴鼻免疫途径刺激动物产生特异性体液免疫反应和黏膜免疫反应。
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公开(公告)号：CN1231587C
公开(公告)日：2005-12-14
申请号：CN02155378.5
申请日：2002-12-11
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明描述了甜菜黑色焦枯病毒(Beet blackscorch virus，BBSV)的全部核苷酸序列。BBSV全基因组的cDNA克隆在真核和原核启动子控制下能够得到转录，产生的病毒RNA对寄主植物具有感染能力。并以插入水母绿色荧光蛋白(GFP)基因为例，表明所获得的重组BBSV可作为载体，携带病毒以外来源的基因并在植物中表达。
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