公开(公告)号：CN110938645A

公开(公告)日：2020-03-31

申请号：CN201911301623.1

申请日：2019-12-17

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩成贵 ,  张绍康 ,  刘玉姿 ,  王颖 ,  张宗英 ,  李大伟 ,  于嘉林 ,  王献兵 ,  张永亮

IPC: C12N15/70 ,  C07K14/08 ,  C07K16/10 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明涉及一种甘蔗黄叶病毒运动蛋白(ScYLV-MP)表达纯化方法以及ScYLV-MP多克隆抗血清的制备和检测试剂盒的构建，其中ScYLV-MP表达纯化步骤为：(1)ScYLV-MP基因的调取及扩增：(2)ScYLV-MP基因原核表达载体构建；(3)His-tag-(ScYLV-MP)融合蛋白的原核表达；(4)His-tag-(ScYLV-MP)融合蛋白的纯化；(5)ScYLV-MP蛋白的获得。采用本发明所述方法获得的ScYLV-MP蛋白多克隆抗血清不仅准确率高、灵敏度高，而且特异性好，可实现甘蔗黄叶病毒及其运动蛋白的准确检测，具有较大的应用价值和市场前景。

公开(公告)号：CN110596381A

公开(公告)日：2019-12-20

申请号：CN201910653356.8

申请日：2019-07-19

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩成贵 ,  时兴 ,  张绍康 ,  王颖 ,  张宗英 ,  李大伟 ,  于嘉林 ,  尚巧霞 ,  王献兵 ,  张永亮

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  G01N33/68 ,  C12N15/40 ,  C07K16/10 ,  C07K14/08 ,  C12R1/94

Abstract: 本发明公开了一种检测甜瓜蚜传黄化病毒的方法及其专用多克隆抗体。本发明首先制备了氨基酸序列如序列表中序列4或序列6所示的MABYV-MP蛋白，然后将MABYV-MP蛋白作为免疫原对新西兰大白兔加强免疫，获得多克隆抗体。采用Western blot，以该多克隆抗体为一抗检测甜瓜蚜传黄化病毒的运动蛋白，在瞬时表达的条件下，MABYV-MP抗血清效价可达1:256000，建议检测工作浓度1:10000至1：80000，该多克隆抗体不仅准确率高、灵敏度高，而且特异性好。本发明可检测待测样品是否含有甜瓜蚜传黄化病毒,具有重大的应用价值和经济意义；另外也为MABYV-MP蛋白功能的研究打下基础。

公开(公告)号：CN110343708A

公开(公告)日：2019-10-18

申请号：CN201910661457.X

申请日：2019-07-22

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩成贵 ,  张绍康 ,  王颖 ,  张宗英 ,  李大伟 ,  于嘉林 ,  尚巧霞 ,  王献兵 ,  张永亮

IPC: C12N15/40 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C07K14/08 ,  G01N33/569 ,  C07K16/10 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种南瓜蚜传黄化病毒(Cucurbit aphid-borne yellows virus，CABYV)运动蛋白(CABYV-MP)表达纯化方法以及CABYV-MP多克隆抗体的制备和检测试剂盒的构建，其中CABYV-MP表达纯化步骤为：(1)CABYV-MP基因的调取及扩增：(2)CABYV-MP基因原核表达载体构建；(3)His-tag-(CABYV-MP)融合蛋白的原核表达；(4)His-tag-(CABYV-MP)融合蛋白的纯化；(5)CABYV-MP蛋白的获得。采用本发明所述方法获得的CABYV-MP蛋白多克隆抗体不仅准确率高、灵敏度高，而且特异性好，可实现南瓜蚜传黄化病毒及其运动蛋白的准确检测，具有重大的应用价值和市场前景。

公开(公告)号：CN110885363A

公开(公告)日：2020-03-17

申请号：CN201911302490.X

申请日：2019-12-17

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 韩成贵 ,  张绍康 ,  王颖 ,  张宗英 ,  尚巧霞 ,  于嘉林 ,  李大伟 ,  王献兵 ,  张永亮

IPC: C07K14/08 ,  C07K1/22 ,  C07K16/10 ,  C07K16/06 ,  C12N15/40 ,  C12N15/70 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明涉及一种丝瓜蚜传黄化病毒运动蛋白(SABYV-MP)表达纯化方法以及SABYV-MP多克隆抗血清的制备和检测试剂盒的构建，其中SABYV-MP表达纯化步骤为：(1)SABYV-MP基因的调取及扩增；(2)SABYV-MP基因原核表达载体构建；(3)His-tag-(SABYV-MP)融合蛋白的原核表达；(4)His-tag-(SABYV-MP)融合蛋白的纯化；(5)SABYV-MP蛋白的获得。采用本发明所述方法获得的SABYV-MP蛋白多克隆抗血清不仅准确率高、灵敏度高，而且特异性较好，可实现丝瓜蚜传黄化病毒及其运动蛋白的准确检测，具有较大的应用价值和市场前景。