尖刺拟菱形藻的检测探针
    11.
    发明公开

    公开(公告)号:CN1661099A

    公开(公告)日:2005-08-31

    申请号:CN200410093091.4

    申请日:2004-12-16

    Abstract: 一种尖刺拟菱形藻的检测探针,属于核酸检测领域。用于对该藻进行S1酶保护分析和夹心杂交检测,具体包括三条相互关联的寡核苷酸探针:S1酶保护分析探针,在进行生物信息学比对分析时,仅与尖刺拟菱形藻核糖体小亚基360~430区域核苷酸互补,而与其它藻核糖体RNA无同源性,长度为59bp,在一定的条件下可特异性结合于尖刺拟菱形藻的rRNA上,序列为:5’-CCACAAGTGGCCAGGGAAATATGAACAAACAAACACTGGTTTCCTTCGCTTCCGTTTCA。本发明探针适用性好,大大方便了特异探针的寻找和实现。本发明的稳定性远远高于夹心杂交技术。

    定量检测赤潮异弯藻的间接酶联免疫吸附试验方法

    公开(公告)号:CN1588073A

    公开(公告)日:2005-03-02

    申请号:CN200410052856.X

    申请日:2004-07-15

    Abstract: 一种定量检测赤潮异弯藻的间接酶联免疫吸附试验方法,用于海洋生物技术领域。本发明以识别赤潮异弯藻的抗体为基础,首先以赤潮异弯藻标准样品和待检样品包被酶标板,37℃孵育后用脱脂奶粉溶液封闭,洗板后加入特异性抗赤潮异弯藻抗血清稀释溶液,37℃孵育后洗板,加入酶标二抗溶液,37℃孵育,洗板后加入酶反应底物,孵育后加入终止反应液终止反应;然后用酶标仪测定板上各孔的吸光值,经过数据转换后,得出赤潮异弯藻检测的标准曲线,其线形范围经过计算得出线性方程,对待测样品中的赤潮异弯藻进行定量。本发明可快速、简便的定量检测赤潮异弯藻,克服了赤潮异弯藻常规检测中的缺点。

    利用亲和柱分析全蛋白的方法

    公开(公告)号:CN101694485B

    公开(公告)日:2013-01-16

    申请号:CN200910307795.X

    申请日:2009-09-27

    Inventor: 李荣秀 谭青乔

    Abstract: 一种蛋白质组技术领域的利用亲和柱分析全蛋白的方法,包括如下步骤:合成亲和分离材料,得到亲和分离材料库;提取生物样品全蛋白,从步骤一所得的亲和分离材料库中筛选出吸附蛋白种类占全蛋白20~80%的亲和材料组合;从步骤二所得亲和材料组合中选择一种或多种分别填充亲和柱,之后利用所得亲和柱,采用级联组合分析方法、串联组合分析方法、或者级联与串联混合的组合分析方法分析生物样品全蛋白,得到多组蛋白复杂度简化的样品;对步骤三所得样品分别进行胰蛋白酶消化和LC-MS/MS分析,进而完成生物样品全蛋白的全蛋白分析。本发明的方法可克服高丰度蛋白淹没低丰度蛋白信号的技术不足,提高极端性质蛋白检出率。

    吩嗪-1-羧酸系列衍生物及其制备方法

    公开(公告)号:CN101973946B

    公开(公告)日:2012-12-12

    申请号:CN201010509746.7

    申请日:2010-10-15

    Abstract: 一种生物技术领域的吩嗪-1-羧酸系列衍生物及其制备方法。衍生物:通过在吩嗪-1-羧酸1位羧基上引入包括亲水基团、疏水基团、线性结构基团和环状结构基团、芳香结构基团的化学基团。制备方法:将从假单胞菌中分离出的吩嗪-1-羧酸在氯化亚砜溶液中回流和蒸馏,得到活化中间体;把活化中间体溶于二氯甲烷,冰浴下加入氨基化合物和三乙胺;然后,室温反应过夜,使用薄层层析法跟踪反应;用旋蒸、萃取、干燥和纯化,得到目标化合物。用途:用做抗瓜果蔬菜和农作物病虫害农药制剂的活性成份;用做抗水稻纹枯病的农药制剂的活性成份。本发明利用平板法进行抗真菌活性测试,获得了具有更好活性的化合物。

    假单胞菌M18的RNA快速提取方法

    公开(公告)号:CN101302508B

    公开(公告)日:2010-09-15

    申请号:CN200810038830.8

    申请日:2008-06-12

    Abstract: 本发明涉及的是一种生物工程技术领域的假单胞菌M18的RNA快速提取方法。包括如下步骤:收集106~107个细胞假单胞菌M18,加入变性液和氯仿,混匀,离心,菌液在管中分为三层;吸取500μl上层液体转移至硅膜柱中,并加入异丙醇,离心;加入乙醇至硅膜柱中,离心;重复上一步;再离心,保证硅膜柱内无液体;加入双蒸水、洗脱液至硅膜柱内;离心,用一干净离心管收集洗脱液。本发明提取时间大大缩短,从提取RNA的方法中可以看出:提取的时间在6min之内;没有DNA污染;提取过程易于自动化。对过柱条件优化后,提取出的RNA纯度很高;通过分光光度计测定提取出的RNA其吸光值A260/A280=1.93。

    脂肪酶的仿生亲和纯化方法

    公开(公告)号:CN1970745B

    公开(公告)日:2010-05-12

    申请号:CN200610119253.6

    申请日:2006-12-07

    Abstract: 本发明涉及一种脂肪酶的仿生亲和纯化方法,属于工业生物技术领域的。本发明包括下列步骤:(1)制备仿生亲和分离材料:首先用带氨基的基础层析介质与三氯三氮嗪进行反应,然后在50℃与烯丙胺反应,最后在95℃与环己胺反应,合成仿生亲和分离材料;(2)用仿生亲和分离材料纯化脂肪酶粗品:用上述制备的仿生亲和分离材料装入层析柱,得到亲和层析柱,随后将含脂肪酶的样品上至该亲和层析柱中,脂肪酶被柱中仿生亲和分离材料专一地吸附留在层析柱中,其它不能被吸附的蛋白随缓冲液流出,最后用洗脱缓冲液将脂肪酶从柱中专一洗脱下来,得到纯脂肪酶。本发明能够高效率、低成本的大规模生产高纯度的脂肪酶。

    利用亲和柱分析全蛋白的方法

    公开(公告)号:CN101694485A

    公开(公告)日:2010-04-14

    申请号:CN200910307795.X

    申请日:2009-09-27

    Inventor: 李荣秀 谭青乔

    Abstract: 一种蛋白质组技术领域的利用亲和柱分析全蛋白的方法,包括如下步骤:合成亲和分离材料,得到亲和分离材料库;提取生物样品全蛋白,从步骤一所得的亲和分离材料库中筛选出吸附蛋白种类占全蛋白20~80%的亲和材料组合;从步骤二所得亲和材料组合中选择一种或多种分别填充亲和柱,之后利用所得亲和柱,采用级联组合分析方法、串联组合分析方法、或者级联与串联混合的组合分析方法分析生物样品全蛋白,得到多组蛋白复杂度简化的样品;对步骤三所得样品分别进行胰蛋白酶消化和LC-MS/MS分析,进而完成生物样品全蛋白的全蛋白分析。本发明的方法可克服高丰度蛋白淹没低丰度蛋白信号的技术不足,提高极端性质蛋白检出率。

    内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法

    公开(公告)号:CN101250512B

    公开(公告)日:2010-04-14

    申请号:CN200810036158.9

    申请日:2008-04-17

    Abstract: 本发明涉及一种内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法,属于生物技术领域的。本发明包括如下步骤:(1)对氨基苯磺酸和L-色氨酸通过三氯三氮嗪活化连接到基础层析介质上制备亲和分离材料;(2)将纤维素酶粗品与所述亲和分离材料接触,内切木聚糖酶结合到亲和分离材料上,未结合物质被洗出后,内切木聚糖酶再用洗脱缓冲液从柱中专一洗脱下来,得到纯内切木聚糖酶。本发明能够高效率、低成本的大规模生产高纯度的内切木聚糖酶。

    用双链结合染料直接快速放大定量mRNA水平的方法

    公开(公告)号:CN101492734A

    公开(公告)日:2009-07-29

    申请号:CN200810201922.3

    申请日:2008-10-30

    Abstract: 本发明是一种生物工程技术领域的用双链结合染料直接快速放大定量mRNA水平的方法,包括以下步骤:首先,利用待检测的mRNA序列设计并合成互补探针;然后,将菌体或组织样品中细胞的总RNA抽提出来;第三,加入特异探针与目标RNA保护性杂交;第四,加入S1酶和RNase酶除去单链DNA、未保护的RNA、过量的探针、错配的杂交体;最后,加入双链结合染料进行信号检测。本发明简便快速,特异性强,灵敏度高,稳定性佳,重现性好,适用范围广,可应用于常规的实验室。

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