公开(公告)号：CN101367857A

公开(公告)日：2009-02-18

申请号：CN200810201245.5

申请日：2008-10-16

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 董德贤 ,  何静 ,  高倩 ,  卢奕 ,  李荣秀

IPC: C07H21/02 ,  C12N15/10

Abstract: 本发明涉及的是一种简单有效快速的利用硅膜柱吸附RNA的RNA提取方法，步骤为：收集细胞，加入变性液和氯仿，混匀，离心，菌液在管中分为三层；吸取上层液体转移至硅膜柱中，离心；加入乙醇至硅膜柱中，离心；重复上一步；再离心，保证硅膜柱内无液体；加入双蒸水、洗脱液至硅膜柱内；离心，用一干净离心管收集洗脱液，所述变性液包括裂解剂、RNA抽提剂、水，裂解剂为异硫氰酸胍、十二烷基肌氨酸钠或苯酚中一种，RNA抽提剂为柠檬酸钠、醋酸钠、乳酸钠、抗坏血酸、苹果酸钾、草酸钠或酒石酸钾中一种。本发明提取的时间在6min之内，没有DNA污染，提取过程易于自动化，提取出的RNA纯度很高。

公开(公告)号：CN101302508B

公开(公告)日：2010-09-15

申请号：CN200810038830.8

申请日：2008-06-12

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 董德贤 ,  何静 ,  高倩 ,  卢奕 ,  李荣秀

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明涉及的是一种生物工程技术领域的假单胞菌M18的RNA快速提取方法。包括如下步骤：收集106～107个细胞假单胞菌M18，加入变性液和氯仿，混匀，离心，菌液在管中分为三层；吸取500μl上层液体转移至硅膜柱中，并加入异丙醇，离心；加入乙醇至硅膜柱中，离心；重复上一步；再离心，保证硅膜柱内无液体；加入双蒸水、洗脱液至硅膜柱内；离心，用一干净离心管收集洗脱液。本发明提取时间大大缩短，从提取RNA的方法中可以看出：提取的时间在6min之内；没有DNA污染；提取过程易于自动化。对过柱条件优化后，提取出的RNA纯度很高；通过分光光度计测定提取出的RNA其吸光值A260/A280＝1.93。

公开(公告)号：CN101302508A

公开(公告)日：2008-11-12

申请号：CN200810038830.8

申请日：2008-06-12

Applicant: 上海交通大学

Inventor： 董德贤 ,  何静 ,  高倩 ,  卢奕 ,  李荣秀

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明涉及的是一种生物工程技术领域的假单胞菌M18的RNA快速提取方法。包括如下步骤：收集106～107个细胞假单胞菌M18，加入变性液和氯仿，混匀，离心，菌液在管中分为三层；吸取500μl上层液体转移至硅膜柱中，并加入异丙醇，离心；加入乙醇至硅膜柱中，离心；重复上一步；再离心，保证硅膜柱内无液体；加入双蒸水、洗脱液至硅膜柱内；离心，用一干净离心管收集洗脱液。本发明提取时间大大缩短，从提取RNA的方法中可以看出：提取的时间在6min之内；没有DNA污染；提取过程易于自动化。对过柱条件优化后，提取出的RNA纯度很高；通过分光光度计测定提取出的RNA其吸光值A260/A280＝1.93。