-
公开(公告)号:CN108611371A
公开(公告)日:2018-10-02
申请号:CN201810457000.2
申请日:2018-05-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/90 , C12N15/873 , C12N15/62 , A01K67/027 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61P31/14
CPC classification number: C12N15/85 , A01K67/0278 , A01K2217/072 , A01K2227/102 , A01K2267/01 , A61K39/12 , A61K2039/552 , A61P31/14 , C07K14/005 , C07K2319/00 , C07K2319/21 , C12N9/22 , C12N15/62 , C12N15/65 , C12N15/873 , C12N15/907 , C12N2770/10022 , C12N2770/10034 , C12N2800/107 , C12N2800/30 , C12N2830/50
Abstract: 本发明公开了乳汁中表达GP5-M融合蛋白的羊乳腺生物反应器的制备方法,制备GP5-M融合表达的基因打靶载体,敲入奶山羊β-乳球蛋白第一外显子上,筛选中靶细胞,利用体细胞核移植技术制备转基因奶山羊,通过乳腺生物反应器生产含有GP5-M融合蛋白的乳汁,从乳汁中分离纯化GP5-M融合蛋白,添加佐剂制备基因工程亚单位疫苗,达到防控PRRS的目的。
-
公开(公告)号:CN107619837A
公开(公告)日:2018-01-23
申请号:CN201710855259.8
申请日:2017-09-20
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/867 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种利用Cas9切割核酸酶介导Ipr1定点插入获取转基因牛胎儿成纤维细胞的方法,本发明通过电穿孔的方法将供体载体和针对打靶位点的CRISPR/Cas9表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞,供体载体中MSR1启动子可以使Ipr1实现在专职吞噬性细胞中的特异性表达,嘌呤霉素药物筛选后,经过PCR鉴定获得打靶的阳性克隆细胞。以该转基因阳性克隆细胞为核供体,获得转基因克隆胚胎,进一步将转基因克隆胚胎移植到发情的受体牛子宫内,最终获得成活的Ipr1定点插入转基因克隆牛。
-
公开(公告)号:CN107145767A
公开(公告)日:2017-09-08
申请号:CN201710250569.7
申请日:2017-04-17
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G06F19/22
CPC classification number: G06F19/22
Abstract: 本发明公开了一种通用RGEN基因编辑靶位点快速筛选系统。本发明通过“流水‑管道”设计思想,设计了碱基模式匹配模块、GC含量分析模块、连续n个相同碱基识别模块,形成了一个兼容性强、方便快捷并且适用于大规模数据分析的系统。支持任意模式序列在全基因组范围的匹配与查找,有效应对RNA介导核酸内切酶的快速发展。极大改善目前现有核酸内切酶工具仅能以有限模式和低通量筛选靶位点的现状。另外,本系统的模块构架及相关算法也适用于解决从任意长度字符串中抓取特定要求的子字符串这一类问题。
-
公开(公告)号:CN106923929A
公开(公告)日:2017-07-07
申请号:CN201710103948.3
申请日:2017-02-24
Applicant: 西北农林科技大学
CPC classification number: A61D7/00 , A61M5/3286 , A61M2207/00 , A61M2210/1007 , A61M2250/00
Abstract: 本发明公开了一种小鼠乳腺注射针及其应用:乳腺注射针采用对移液器吸头头部热拉伸变形以及对拉伸部分形成的细管状结构进行截断处理而制成,本发明制备的乳腺注射针材料易得、注射效果理想,可为乳腺病理等研究提供研究材料,本发明与传统注射方法易造成乳腺机械损伤或需借助昂贵的微型注射器相比,具有更为广阔的应用价值。
-
公开(公告)号:CN105646707A
公开(公告)日:2016-06-08
申请号:CN201610107323.X
申请日:2016-02-26
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种用于牛、羊X/Y精子快速分离的UTY抗体纳米颗粒的制备方法及应用:利用Y精子UTY抗原重组蛋白制备抗Y精子UTY抗原的单克隆抗体;将所述单克隆抗体用胃蛋白酶进行酶切,并分离得到抗UTY抗原的Fab’片段;制备包含Fab’片段的磷酸钙纳米颗粒。本发明制备得到的UTY抗体纳米颗粒,具有在Y精子表面和进入其内部进行抗原抗体反应的能力,从而导致Y精子凝集,对X、Y精子的分离效率达到80~95%,具有X、Y精子分离简单、快速、廉价及效率高等特点,且损害极小。
-
公开(公告)号:CN105524940A
公开(公告)日:2016-04-27
申请号:CN201511025413.6
申请日:2015-12-31
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/873
CPC classification number: C12N15/8509 , C12N15/8771
Abstract: 本发明公开了一种基于组蛋白甲基化水平的修饰提高牛克隆效率的载体、细胞及方法。本发明提供的载体包括阻遏物表达载体和含有阻遏操纵子的表达载体,在转染时将两者共转染到供体细胞中;所述的含有阻遏操纵子的表达载体中插入有牛KDM4B或牛KDM4C基因。将阳性转染的细胞作为供体细胞,再将其注入到去核后的卵母细胞并进行电融合,挑选成功融合的牛体细胞克隆胚培养至36h时,诱导表达牛KDM4B和KDM4C。本发明可以有效减弱体细胞克隆胚在合子激活时期的组蛋白H3K9me3表观遗传修饰水平,从而显著提高后期牛体细胞克隆囊胚的发育率和质量,可高效体外生产牛体细胞克隆胚胎,胚胎移植后克隆牛的出生率也显著提高。
-
公开(公告)号:CN103305551B
公开(公告)日:2015-04-22
申请号:CN201310232306.5
申请日:2013-06-09
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/873 , C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种基于囊胚上基因表达水平筛选供体细胞系的方法,将来源不同个体的供体细胞系进行核移植后,在囊胚期检测TCF7、DGCR8、SENP7、DNMT3B、Vimentin、IFI6、EFNA2、F5、IRAK1、PRICKLE1、TNFRSF1A、ARG2、NEK6、OCT4、NANOG、SOX2、CDX2、XIST和IGF2R的表达水平,选择在克隆囊胚上这些基因的表达水平全部与正常发育的体外受精囊胚上的表达水平差异不显著的供体细胞系为核供体细胞,可显著提高牛体细胞克隆效率。
-
公开(公告)号:CN103215295B
公开(公告)日:2015-04-22
申请号:CN201310126017.7
申请日:2013-04-11
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/63 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种β-酪蛋白位点定点整合Lys基因的打靶载体及其构建的细胞,包括目的基因Lys,在的基因Lys的上游和下游分别设有5’同源臂和3’同源臂,以牛β-酪蛋白位点第二内含子锌指核酸酶识别位点的上下游各延伸700~850bp的同源序列作为5’同源臂和3’同源臂。本发明使用电穿孔的方法将打靶载体pCSN2-Lys-Neo-EGFP和锌指核酸酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞,经过G418药物筛选和PCR分析后获得了打靶的阳性克隆细胞,以打靶的阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞,获得转基因克隆胚胎,为研制抗乳房炎的转基因奶牛提供坚实的基础。
-
公开(公告)号:CN102807993B
公开(公告)日:2014-04-09
申请号:CN201210319587.3
申请日:2012-08-31
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种骨骼肌特异性的靶向Myostatin基因的miRNA表达载体及重组细胞,首先构建含有靶向Myostatin基因的pre-miRNA和MYL1基因启动子的骨骼肌特异性miRNA表达载体pmiR-MNM2,然后通过电转染法将外源性表达载体pmiR-MNM2导入红安格斯新生牛成纤维细胞并经G418筛选获得阳性细胞,进行PCR鉴定,证实目的基因整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组;将转染pmiR-MNM2的牛胎儿成纤维细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞,获得转基因克隆胚,将这些胚胎移入受体牛的子宫,为生产具有双肌性状的红安格斯克隆牛奠定了坚实的基础。
-
公开(公告)号:CN103305551A
公开(公告)日:2013-09-18
申请号:CN201310232306.5
申请日:2013-06-09
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/873 , C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种基于囊胚上基因表达水平筛选供体细胞系的方法,将来源不同个体的供体细胞系进行核移植后,在囊胚期检测TCF7、DGCR8、SENP7、DNMT3B、Vimentin、IFI6、EFNA2、F5、IRAK1、PRICKLE1、TNFRSF1A、ARG2、NEK6、OCT4、NANOG、SOX2、CDX2、XIST和IGF2R的表达水平,选择在克隆囊胚上这些基因的表达水平全部与正常发育的体外受精囊胚上的表达水平差异不显著的供体细胞系为核供体细胞,可显著提高牛体细胞克隆效率。
-
-
-
-
-
-
-
-
-