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公开(公告)号：CN110669749A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201911147726.7
申请日：2019-11-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种提高普鲁兰酶终浓度的发酵液处理方法，属于酶工程和发酵工程技术领域。本发明将处理溶液C与普鲁兰酶发酵上清液混合后保温，超滤浓缩，即得高酶活的普鲁兰酶发酵液。采用本发明方法，在以重组菌解淀粉芽孢杆菌BF7658/pUC980-BdP发酵制备普鲁兰酶的后提取阶段，可以改善普鲁兰酶发酵液的超滤性能。经本发明处理的发酵液上清液经超滤浓缩后得到的浓缩液的酶活是未经溶液C处理的发酵液经同样超滤浓缩后得到的浓缩液的酶活的1.75倍以上。
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公开(公告)号：CN110452845A
公开(公告)日：2019-11-15
申请号：CN201910754470.X
申请日：2019-08-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌，属于微生物技术领域。本发明将SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，以pET-28a为载体构建重组质粒pET-28a-SPase，转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，构建得到重组大肠杆菌，发酵产重组蔗糖磷酸化酶，并通过紫外诱变法对构建好的重组菌进行诱变，筛选出高产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌菌株，其发酵胞内破壁上清酶活为819.16U/mL，比酶活为206.91U/mg，其稳定的产酶性可以为进一步的理论研究和实际生产应用打下基础，实践应用意义重大。
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公开(公告)号：CN106754607B
公开(公告)日：2019-11-08
申请号：CN201710091999.9
申请日：2017-02-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产酪醇的重组菌株及其构建方法，属于微生物领域。本发明利用基因工程技术构建重组载体pRSFDuet‑ARO10‑ARO8，将其转化经过基因工程改造的敲除基因pheA和基因feaB的大肠杆菌BL21(DE3)，获得菌株BE0，通过全细胞催化反应，以10mM酪氨酸为底物，发酵20h可产酪醇达6.73mM，酪氨酸转化率可达67.3％，在此重组菌的基础上，经过化学诱变，从而得到了一株性能优化高产酪醇的重组菌株BE2，通过全细胞催化反应，以10mM酪氨酸为底物，发酵20h可产酪醇达8.71mM，酪氨酸转化率可达87.1％。
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公开(公告)号：CN105925553B
公开(公告)日：2019-07-02
申请号：CN201610552087.2
申请日：2016-07-14
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/44
Abstract: 一种提高直链淀粉产量的重组普鲁兰酶前处理方法，属于酶工程和淀粉加工技术领域。本发明采用一种10×普鲁兰酶前处理溶液处理来源于重组菌解淀粉芽孢杆菌BF7658/pUC980‑BdP的普鲁兰酶，经过处理的重组酶与土豆淀粉反应获得的反应液中直链淀粉含量比未经处理的重组酶处理同样土豆淀粉后得到的反应液中直链淀粉含量明显提高。本发明获得的方法在以土豆淀粉为原料的直链淀粉制备中有应用潜力。
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公开(公告)号：CN109234297A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201811172964.9
申请日：2018-10-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，属于基因工程与发酵工程领域。本发明通过敲除D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacA和dacB基因(单敲除和双敲除)，获得重组蛋白胞外分泌水平显著提高的重组大肠杆菌突变株。采用绿色荧光蛋白(GFP)和淀粉酶为模式重组蛋白，证明了本发明方法可显著提高胞外蛋白的含量。单敲除和复合敲除dacA和dacB后，GFP胞外荧光值分别提高2.1、2.1和2.7倍；单敲除和复合敲除dacA和dacB后，淀粉酶胞外酶活力占总酶活力的比例分别由对照菌的40.7％提高至44.7％、62.1％和64.2％。本发明方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108486026A
公开(公告)日：2018-09-04
申请号：CN201810298910.0
申请日：2018-04-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种新型木聚糖酶及其制备方法，属于生物技术领域。本发明将来自C.clariflavum Clocl-2441中的木聚糖酶的GH10结构域在大肠杆菌中进行了异源表达，得到了一株可成功表达木聚糖酶的重组菌，粗酶液的酶活性是表达全长木聚糖酶的6倍，该酶具有耐热性强，耐酸碱性强，对金属离子耐受能力强的优良性质。
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公开(公告)号：CN107475140A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710825655.6
申请日：2017-09-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株在酸性条件下发酵速度提高的高产普鲁兰酶的重组巴斯德毕赤酵母突变体，属于微生物、酶工程技术领域。本发明获得了一种密码子优化的普鲁兰酶编码基因，并构建了一株高表达上述基因的重组菌巴斯德毕赤酵母GS115/pPICK-BdP5 W133。通过对上述重组菌的诱变筛选到一株在pH4.0条件下发酵水平提高的突变株WB138。该突变株在pH4.0条件下，在5L发酵罐上发酵时间缩短24h，发酵酶活一般可以达到1100U/mL以上。该菌株在普鲁兰酶发酵生产中有减少发酵过程染菌损失的可能。
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公开(公告)号：CN105925553A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610552087.2
申请日：2016-07-14
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/44
CPC classification number: C12N9/2457 , C12Y302/01041
Abstract: 一种提高直链淀粉产量的重组普鲁兰酶前处理方法，属于酶工程和淀粉加工技术领域。本发明采用一种10×普鲁兰酶前处理溶液处理来源于重组菌解淀粉芽孢杆菌BF7658/pUC980‑BdP的普鲁兰酶，经过处理的重组酶与土豆淀粉反应获得的反应液中直链淀粉含量比未经处理的重组酶处理同样土豆淀粉后得到的反应液中直链淀粉含量明显提高。本发明获得的方法在以土豆淀粉为原料的直链淀粉制备中有应用潜力。
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公开(公告)号：CN105779485A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610219101.7
申请日：2016-04-08
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/70 , C12N9/2411 , C12N9/485 , C12N2800/101 , C12P21/005 , C12Y304/16004
Abstract: 本发明公开了一种基于dacB提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，涉及基因工程与发酵工程领域。本发明通过过量表达D?丙氨酰?D?丙氨酸羧肽酶基因，获得重组蛋白胞外分泌水平过了表达的重组大肠杆菌。本发明提供一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平方法。采用该方法可显著提高大肠杆菌菌株的重组蛋白分泌能力。采用淀粉酶为模式重组蛋白，通过该方法可将大肠杆菌胞外重组淀粉酶含量由对照组的8.54％提高至55.80％。该方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
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公开(公告)号：CN105483070A
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201510993097.5
申请日：2015-12-24
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1051 , C12Y204/01099
Abstract: 本发明公开了一株表达果糖基转移酶的重组酿酒酵母菌株及构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将黑曲霉(Aspergillus niger)来源的果糖基转移酶基因(fru)克隆连接到酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表达载体pYX212，并转化S.cerevisiae W303宿主。经筛选鉴定得到一株高产果糖基转移酶的重组菌株，命名为：S.cerevisiae W303-pYX212-N1。在250mL摇瓶中，重组S.cerevisiae菌株表达的果糖基转移酶酶活力可达(39.79U/mL)。这为果糖基转移酶的高效表达与其在工业中应用具有重要意义与巨大的应用价值。
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