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公开(公告)号:CN117802056A
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202311770042.9
申请日:2023-12-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌及应用,属于酶工程和代谢工程领域。本发明选取来源于植物矮牵牛的类胡萝卜素裂解双加氧酶基因PhCCD1,通过易错PCR对PhCCD1进行随机突变,以热带假丝酵母β‑胡萝卜素生产菌株ANT‑06为底盘细胞,分别在其过氧化物酶体、细胞质中表达了PhCCD1酶突变体,筛选并获得三株能够高效合成β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌株,产量达到173.6±7.0mg/L、136±3.9m/L、177.9±4.3mg/L,并从工程菌中克隆测序获得PhCCD1酶突变体。
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公开(公告)号:CN117487680A
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202311417949.7
申请日:2023-10-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种合成ω‑氨基脂肪酸的酵母工程菌株构建及应用,属于生物工程技术领域。本发明提供了一种重组热带假丝酵母,所述重组热带假丝酵母为,敲除了基因组上的肉毒碱乙酰基转移酶基因、脂肪醛脱氢酶基因CtALD1、CtALD2,同时,在基因组上分别整合NADPH‑P450还原酶基因CtNCP、细胞色素氧化酶基因CYP52A17、长链脂肪酸转运蛋白基因CtFAT1、脂肪醇氧化酶基因FAO1基因和/或ω‑转氨酶基因CvTA基因,得到菌株在摇瓶发酵中产量从最初的30mg/L提高到了3075mg/L,在5L发酵罐中最终产量达到了20.3g/L,提高产量的同时为ω‑氨基脂肪酸生产菌株的研究提供思路。
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公开(公告)号:CN117487675A
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202311745114.4
申请日:2023-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株稳定表达人乳铁蛋白的里氏木霉菌株及其应用,属于微生物及发酵工程技术领域。本发明通过在里氏木霉不同的宿主菌中表达人乳铁蛋白基因,筛选表达产物稳定的重组菌。进一步通过诱变育种获得生长速度快同时产物稳定的菌株,其中编号为CJ2095的菌株的生长速度正常而表达产物的稳定性明显高于其它菌株。该菌株命名为Trichoderma sp.CJ2095,中文名为里氏木霉CJ2095,该菌株已保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO:M 20231481。该菌株发酵获得的重组人乳铁蛋白在发酵液中能较长时间的保持稳定,在大规模发酵制备重组人乳铁蛋白时能减轻企业后提取工作压力、降低后提取成本,有效减少了后提取工段的设备投资。
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公开(公告)号:CN116694589A
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202310663759.7
申请日:2023-06-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种7β‑羟基类固醇脱氢酶的突变体及其应用。所述的7β‑HSDH突变体在SEQ ID NO.1所示的野生型上进行单点突变、两两复合突变和三点复合突变,经筛选获得复合突变体T189V/V207M,在此基础上进一步筛选出25个氨基酸残基位点,通过定点饱和突变,提高7β‑HSDH的催化效率以及热稳定性的突变体T189V/V207M/V91P、T189V/V207M/M144H、T189V/V207M/G146A、T189V/V207M/A158S、T189V/V207M/V183I。本发明构建的突变后的7β‑HSDH突变体相较于出发7β‑HSDH酶活力提高了3.8倍,突变后的7β‑HSDH突变体在催化100g·L‑1的7‑酮基‑石胆酸转化率可达到91%,具有工业化生产前景。
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公开(公告)号:CN114736918B
公开(公告)日:2023-08-25
申请号:CN202210356043.8
申请日:2022-03-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种整合表达生产红景天苷的重组大肠杆菌及其应用,属于生物技术领域。本发明采用E.coli YMGR5A作为宿主菌株,整合表达了来源于拟南芥的糖基转移酶基因UGT85A1,即在宿主菌株中,在不同位点整合表达的UGT85A1基因,获得多拷贝数的产红景天苷重组大肠杆菌菌株;E.coli 5A8S菌株在装有50mL M9Y培养基的250mL摇瓶发酵后,红景天苷的产量为2.42g/L。在装有2.5L M9Y培养基的5L发酵罐发酵后,红景天苷最高产量为9.34g/L,单位菌体浓度的产量为0.27g/(L·OD600),而且该整合表达菌株相比质粒表达菌株而言,具有良好的遗传稳定性和生长状况。
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公开(公告)号:CN114277040B
公开(公告)日:2023-08-25
申请号:CN202111597793.6
申请日:2021-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成β‑胡萝卜素菌株的构建方法及其应用,属于代谢工程领域。所述构建方法为将β‑胡萝卜素合成途径中从乙酰辅酶A到甲羟戊酸合成相关基因在酵母细胞质中表达,从IPP和DMAPP到β‑胡萝卜素合成相关基因在酵母过氧化物酶体中过表达,从甲羟戊酸到IPP和DMAPP合成相关基因在细胞质或过氧化物酶体中过表达。利用该方法构建的工程菌株β‑胡萝卜素产量显著提高。本发明构建的基因工程菌株经过9天发酵后发酵液中菌体干重可达213g/L,β‑胡萝卜素产量可达6.5g·L‑1。本发明构建的工程菌株可以高效合成β‑胡萝卜素,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN114410631B
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202210091687.9
申请日:2022-01-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P7/02 , C12R1/74
Abstract: 本发明公开了一种高效合成西柏三烯一醇菌株的构建方法及其应用,属于代谢工程领域。所述构建方法为将西柏三烯一醇合成途径中从乙酰辅酶A到甲羟戊酸合成相关基因在酵母细胞质中表达,从IPP和DMAPP到西柏三烯一醇合成相关基因在酵母过氧化物酶体中过表达,从甲羟戊酸到IPP和DMAPP合成相关基因在细胞质或过氧化物酶体中过表达。利用该方法构建的工程菌株西柏三烯一醇产量显著提高。本发明构建的基因工程菌株经过9天发酵后西柏三烯一醇产量可达1391.3mg·L‑1。本发明构建的工程菌株可以高效合成西柏三烯一醇,并且生产性能稳定,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN116478845A
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202310442613.X
申请日:2023-04-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种代谢工程改造热带假丝酵母生产鼠尾草酸的方法,属于生物技术领域。本发明通过模块区室化、融合基因表达、下调分支代谢途径、提高电子供体等代谢改造策略,采用热带假丝酵母1C2P‑PM04作为宿主菌株,在其基因组GRE3位点上整合下游鼠尾草酸模块。将该菌株接种于装有30ml YPD60发酵培养基的250mL摇瓶发酵4天后,鼠尾草酸产量为78.24mg/L。
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公开(公告)号:CN114196689B
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202111596810.4
申请日:2021-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产α‑蛇麻烯的酵母重组菌株的构建方法及其应用,属于代谢工程领域。本发明通过在热带假丝酵母的染色体DNA上整合表达植物来源的α‑蛇麻烯合酶基因构建了可以合成α‑蛇麻烯的工程菌株,在此基础上过表达内源性的涉及α‑蛇麻烯合成基因,构建高效生产α‑蛇麻烯的重组菌株,α‑蛇麻烯产量达到149.7mg·L‑1,较对照菌株提高了112倍。本发明还提供了利用上述工程菌株生产α‑蛇麻烯方法。本发明提供的α‑蛇麻烯生产菌株生产性能稳定,生产过程不需要添加抗生素,具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN116463273A
公开(公告)日:2023-07-21
申请号:CN202310240468.7
申请日:2023-03-14
Applicant: 江苏香地化学有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了增强5’‑胞苷酸积累的方法及应用,属于基因工程和微生物工程领域。本发明通过敲除ppnN、ushA、yrfG、yjjG、umpH、umpG基因,过量表达5’‑CTP二磷酸水解酶基因nudG,乳清酸磷酸核糖转移酶基因pyrE,整合表达尿苷酸激酶突变体基因PyrH(R92G/D93G),并进一步敲除胞苷脱氨酶基因cdd、核糖核苷三磷酸还原酶基因nrdD,整合表达尿苷‑胞苷激酶基因udk、磷酸核糖焦磷酸合成酶基因prs、葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶基因zwf和6‑磷酸葡糖酸脱氢酶基因,提高大肠杆菌的5’‑胞苷酸积累能力。在不添加任何抗生素和诱导剂的条件下,重组菌在60L发酵罐中5’‑胞苷酸产量达到39.6g/L。
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