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公开(公告)号：CN117343948A
公开(公告)日：2024-01-05
申请号：CN202311417492.X
申请日：2023-10-30
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开一种硝基还原酶EcNTR的重组表达质粒及其应用，通过PCR扩增等基因工程手段从Enterobacter cloacae菌株获得硝基还原酶EcNTR基因，将之构建为pET28a(+)‑EcNTR重组质粒，进一步构建E.coli BL21(DE3)‑pET28a(+)‑EcNTR重组工程菌，并用于还原硝基类化合物制备芳香胺，特别用于转化间硝基苯乙酮制备苯肾上腺素药物、抗肿瘤药物及镇静催眠药合成中的重要中间体间氨基苯乙酮。该硝基还原酶EcNTR具有广泛的底物谱，可催化多种硝基化合物的还原反应。
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公开(公告)号：CN118546918A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202410621319.X
申请日：2024-05-20
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N11/02 , C12N11/18 , C12N9/04 , C12N15/70 , C12P7/6409
Abstract: 本发明公开一种以EutM为蛋白支架的双酶自组装体及其构建方法与应用，以来源于CnaB2结构域的SpyCatcher/SpyTag体系，其在多种条件下均能自发形成稳定的异肽键，将羰基还原酶与葡萄糖脱氢酶共固定在蛋白支架EutM上，形成双酶自组装复合物EutM‑SC‑ST‑CR2(GDH)，并发现了EutM与SpyCatcher中融合的Linker2对双酶自组装复合物EutM‑SC‑ST‑CR2(GDH)组装，酶活和催化效率产生有利影响。本发明在优化后得到最佳组装体EutM‑SC‑ST‑CR2(GDH)后并应用于(R)‑6‑羟基‑8‑氯辛酸乙酯的生产。
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公开(公告)号：CN117757826A
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202311851386.2
申请日：2023-12-29
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开一种短链脱氢酶的重组表达质粒、重组基因工程菌及其应用，所述应用为以所述重组基因工程菌经诱导培养获得的湿菌体或所述湿菌体经超声破碎、分离纯化提取的短链脱氢酶纯酶为催化剂在不对称还原羰基类化合物制备醇类化合物中的应用，尤其是在不对称还原4‑氯乙酰乙酸乙酯制备(R)‑4‑氯‑3‑羟基丁酸乙酯中的应用。该催化剂具有广泛的底物谱，可高效高选择性催化多种前底物酮的不对称还原反应，并且对不同pH、温度均具有优异的适应能力。
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公开(公告)号：CN117904097A
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202410071694.1
申请日：2024-01-18
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种自组装蛋白支架共固定化酶及其应用，所述自组装蛋白支架共固定化酶采用EutM‑SpyCatcher/SpyTag体系固定R‑ω‑转氨酶和乙醇脱氢酶得到；在体外构建固定化多酶催化体系，实现ATTA、ADH双酶共固定化形成级联反应，产生高效的辅酶再生系统，提高了NADPH的再生效率，为生物催化反应提供了充足的NADPH，从而加强酶的级联作用和催化效率；同时蛋白支架也为胺化反应提供了良好的环境，提高了酶的热稳定性。
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公开(公告)号：CN117757690A
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202311851393.2
申请日：2023-12-29
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开一种洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)WZ‑5及其应用，本发明通过底物富集培养策略从土壤中筛选获得一种具有高效催化COBE还原反应的Burkholderia cepacia菌属菌株，所述洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)WZ‑5保藏于中国普通微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO:28566，其含有的醇脱氢酶BcSDR4具有广泛的底物谱，可高效高选择性催化多种前底物酮的不对称还原反应，并且对不同pH、温度均具有优异的适应能力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116463329A
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202310290445.7
申请日：2023-03-23
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供一种以氨基化纳米二氧化硅为载体的固定化双酶催化剂以及其在(S)‑1‑苯基‑1,2‑乙二醇制备中的应用，以氨基化二氧化硅纳米为载体，采用酰胺缩合的方式结合酶分子，酶分子不易脱落，增加了固定化酶的重复使用次数，具有传输阻力小、制备效率高、分离效果好等的优点。所述的固定化酶能够催化2‑羟基苯乙醇选择性还原制备高光学纯度的(S)‑1‑苯基‑1,2‑乙二醇，同时增加了融合酶的稳定性，通过简单的离心就可以分离酶和产物，实现酶的回收和重复利用。
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公开(公告)号：CN116144617A
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202211632852.3
申请日：2022-12-19
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N9/04 , C12N15/53 , C07K1/14 , C07K1/22 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N1/16 , C12P7/22 , C12P41/00 , C12R1/72 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种NADH依赖型醇脱氢酶CpSADH、编码基因、菌株及应用，本发明筛选获得一种具有强大苯乙酮类化合物还原反应能力的近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)Zjut0512菌株。在此基础之上获得醇脱氢酶CpSADH，具有广泛的底物谱，可高效高选择性催化多种前底物酮的不对称还原反应，并且对不同pH、温度均具有优异的适应能力。本发明在水相介质中引入异丙醇构建异丙醇‑水相体系来增加底物的溶解性进而提高生物催化效率，产率提升至97.5％，产率提升3.1倍。
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公开(公告)号：CN115976007A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202211632494.6
申请日：2022-12-19
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N11/087 , C12N9/04 , C12P7/22 , C12R1/72
Abstract: 本发明公开了一种纳米双酶偶联物及在合成(S)‑1‑(3‑三氟甲基苯基)乙醇中的应用，所述纳米双酶偶联物以聚丙烯酸为载体，通过交联法固定偶联葡萄糖脱氢酶GDH和醇脱氢酶CpSADH获得的。本发明纳米双酶偶联物，相较于游离酶CpSADH，偶联体催化底物载量提高1.7倍，最适温度提高10℃，辅酶循环数(TTN)提高了2.6倍，有效地提高了酶的活力、稳定性、重复利用次数并实现辅酶原位再生，解决有机底物、产物对酶的抑制作用，以及天然游离酶稳定性较差、难以重复利用的问题，拓宽了酶与高分子的应用场景和思路。
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公开(公告)号：CN117417867A
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202311417495.3
申请日：2023-10-30
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N1/20 , C12N9/04 , C12N15/53 , C12N15/70 , C12N15/66 , C12N1/21 , C12P13/00 , C12R1/01 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开一种阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)ZJUT16及其应用，通过底物富集培养策略从土壤中筛选获得一种具有硝基类化合物(特别是间硝基苯乙酮)还原反应能力的阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)菌属菌株ZJUT16。其所含的硝基还原酶EcNTR可用于还原硝基类化合物制备芳香胺，特别用于转化间硝基苯乙酮制备苯肾上腺素药物、抗肿瘤药物及镇静催眠药合成中的重要中间体间氨基苯乙酮。
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公开(公告)号：CN116121216A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211427627.6
申请日：2022-11-15
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶的融合酶、编码基因、工程菌及应用，本发明实现了羰基还原酶(SRED)和葡萄糖脱氢酶(GDH)的融合表达，节约了发酵成本，降低了发酵废液的产生量，对环境友好。融合表达不影响羰基还原酶的光学选择性，大幅降低了反应中所使用的辅酶因子，节约了反应成本。该羰基还原酶有广泛的底物谱和良好的立体选择性，用本发明方法制备所得的含羰基还原酶SRED和葡萄糖脱氢酶GDH的重组酶具有对环境友好、操作简单、反应条件温和等优点，具有良好的工业应用前景。
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