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公开(公告)号：CN116063366B
公开(公告)日：2025-01-10
申请号：CN202211551900.6
申请日：2022-12-05
Applicant: 湖北共同甾体药物研究院有限公司
IPC: C07J1/00
Abstract: 本发明提出了一种雌二醇的制备方法，所述方法包括：采用由ADD酶转还原制备的宝丹酮为原料，仅通过一步反应即可制备雌二醇；现有雌二醇的制备工艺，采用由ADD经缩酮保护、芳构化及脱保护三步的雌酚酮作为原料，经还原制备得到雌二醇；与之相比，本发明缩短了整体工艺路线步骤，减少物料的使用，降低能耗与污染，并有效降低雌二醇产品中异构体杂质17α‑雌二醇的含量，提高了产品收率和产品质量。
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公开(公告)号：CN118910113A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202411139079.6
申请日：2024-08-20
Applicant: 湖北共同甾体药物研究院有限公司
Abstract: 本发明涉及微生物制药及医药化工技术领域，提出了一种重组菌的构建及其制备醋酸泼尼松的方法，所述重组菌的构建方法，包括以下步骤：S1，扩增SUMO蛋白基因和KsdD5蛋白酶基因，然后将pET28a质粒酶切后与SUMO基因和KsdD5基因无缝连接，获得重组质粒pET28a‑SUMO‑KsdD5；S2，将重组质粒pET28a‑SUMO‑KsdD5转化至大肠杆菌BL21感受态细胞，培养后得到重组菌。本发明将SUMO基因与KsdD5连接于pET28a(+)质粒上，得到重组脱氢酶质粒，随后进行融合表达，可利用细胞本身的FAD辅酶再生体系，无需添加外源性的辅酶FAD；此外SUMO蛋白提高了脱氢酶KsdD5在大肠杆菌BL21(DE3)中的溶解性，以及蛋白表达量，同时也提高了脱氢酶KsdD5转化醋酸泼尼松的效率。
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公开(公告)号：CN118852318A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202411016505.7
申请日：2024-07-28
Applicant: 湖北共同甾体药物研究院有限公司
IPC: C07J71/00
Abstract: 本发明提出了一种制备式(I)氟泼尼定中间体的方法，以3TR(式Ⅱ，醋酸四烯物)为起始物料，经环氧化、加成消除、环氧化、开环、水解共六步反应制备，3TR(醋酸四烯物)作为原料容易取得，经6步反应即可制备氟泼尼定中间体16‑亚甲基物，相比现有技术公开的技术路线步骤简便，利于生产应用。
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公开(公告)号：CN117820407A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202311845289.2
申请日：2023-12-28
Applicant: 湖北共同甾体药物研究院有限公司
Abstract: 本发明提出了一种19‑去甲去氢表雄酮的制备方法及其中间体，本发明涉及医药中间体制备技术领域，包括以下步骤：由式(Ⅱ)化合物与酸进行水解反应，经纯化处理，制备得到19‑去甲去氢表雄酮，其中式(Ⅱ)化合物由19‑去甲‑4‑雄甾烯‑3,17‑二酮经酯化反应、缩酮反应以及还原反应制备得到。本发明为19‑去甲去氢表雄酮的制备提供了新的合成路线，相比现有技术，大大缩短了反应步骤；同时，本发明提供的合成路线可提高目标产物收率，总收率高达70％以上，产物纯度在99％以上，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN117106806A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202311053565.1
申请日：2023-08-21
Applicant: 湖北共同甾体药物研究院有限公司
Abstract: 本发明提出了一种雄甾‑1,4,9(11)‑三烯‑3,17‑二酮的制备方法，包括如下步骤：步骤1，构建S1‑pBAD‑hisC‑TOP10脱氢酶：构建含有S1基因的重组质粒pBAD‑hisC‑S1，S1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；将阳性克隆的重组质粒pBAD‑hisC‑S1转入大肠杆菌TOP10中，获得菌种；将菌液转接于培养基中，诱导表达S1‑pBAD‑hisC‑TOP10脱氢酶；步骤2，转化雄甾‑4,19(11)‑二烯‑3,17‑二酮：将雄甾‑4,19(11)‑二烯‑3,17‑二酮溶于tris‑HCl缓冲液和异丙醇中，加入5‑甲基吩嗪硫酸甲酯和步骤1得到的含有S1‑pBAD‑hisC‑TOP10脱氢酶的菌泥，在20‑30℃，200rpm条件下转化60‑90h，得到雄甾‑1,4,9(11)‑三烯‑3,17‑二酮。本发明构建的S1‑pBAD‑hisC‑TOP10脱氢酶可高效转化雄甾‑4,19(11)‑二烯‑3,17‑二酮生成雄甾‑1,4,9(11)‑三烯‑3,17‑二酮转化率可达98.1％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118256587A
公开(公告)日：2024-06-28
申请号：CN202410497818.2
申请日：2024-04-24
Applicant: 湖北共同甾体药物研究院有限公司
Abstract: 本发明提出了一种黄体酮高效发酵转化生产11α‑羟基黄体酮的方法，包括以下步骤：以曲霉Aspergillus nakazawae(CBS 640.78)为生产菌株，经过产孢，孢子悬液制备，种子培养，发酵培养，底物转化获得高转化率的11α‑羟基黄体酮。本发明通过在发酵过程中及时添加葡萄糖，维持发酵液中充足的营养物质；同时在发酵培养基中添加硫酸铵、钼酸钠，可以促进11α‑羟基黄体酮的合成；两者相结合，可以有效提高转化速率和底物转化，产生良好的经济效益。
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公开(公告)号：CN116987754A
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202311182924.3
申请日：2023-09-13
Applicant: 湖北共同甾体药物研究院有限公司
Abstract: 本发明提出了一种高效合成醋酸四烯物的工艺，包括如下步骤：S1，构建重组质粒pET‑28a(+)‑KstD，转化至BL21感受态细胞中，获得脱氢酶菌株TQ‑0007，所述脱氢酶TQ‑0007核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；S2，脱氢酶菌株TQ‑0007发酵：挑新划线的TQ‑0007单菌落，接菌到含有卡那霉素的培养基中培养得到发酵种子，然后接菌至添加有卡那霉素的发酵培养基中，于30‑37℃条件下培养，加入IPTG诱导培养后离心得到脱氢酶菌泥；S3，合成：将底物溶于缓冲液中，然后添加步骤S2的菌泥和PMS，于25‑30℃反应24‑48h，即得到醋酸四烯物。本发明使用脱氢酶TQ‑0007菌泥合成醋酸四烯物，相比于纯酶，具有用酶量少，成本低的优点；转化后无需后处理，具有制备工艺简单，对设备要求不高的优点。
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公开(公告)号：CN116790705A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310498832.X
申请日：2023-05-06
Applicant: 湖北共同甾体药物研究院有限公司
Abstract: 本发明提出了一种氢化可的松转化泼尼松龙的合成方法，包括以下步骤：S1，构建重组质粒pET‑21a(+)‑KstD；S2，取含有所述重组质粒pET‑21a(+)‑KstD的细胞，转接于培养基培养，诱导目的蛋白表达，再加入缓冲溶液重悬菌体，超声破碎细胞，离心、纯化；S3，将氢化可的松乳化处理，溶于缓冲溶液，加入PMS和pET‑21a(+)‑KstD催化酶，于25‑30℃反应12‑16h，即得到泼尼松龙；相比现有合成泼尼松龙的方法，本发明的方法收率高、所需试剂少、工艺简单、设备要求低、符合绿色环保的理念。
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公开(公告)号：CN119462806A
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202411468512.0
申请日：2024-10-21
Applicant: 湖北共同甾体药物研究院有限公司
IPC: C07J1/00
Abstract: 本发明属于提纯技术领域，具体涉及到一种纯化去氢表雄酮的方法。本发明先后用良溶剂及大机型溶剂提纯去氢表雄酮，解决了传统纯化方法操作过程复杂，对过度还原产物和4AD纯化效果较差等问题，本发明的纯化方法操作简单、条件温和、设备要求低、周期短、成本低、易于工业化生产，利用本发明的方法提纯出的产品的纯度高达99％，单杂均小于0.1％。
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公开(公告)号：CN118879652A
公开(公告)日：2024-11-01
申请号：CN202411059400.X
申请日：2024-08-03
Applicant: 湖北共同甾体药物研究院有限公司
Abstract: 本发明提出了一种3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶的突变体、重组表达载体、重组工程菌及其应用，涉及酶工程技术领域。所述突变体包括氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的突变体M1和氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示突变体M2。该重组表达载体包括上述的突变体M1的编码基因，或者上述的突变体M2的编码基因。3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶的突变体M1和突变体M2具有更高浓度的底物添加量、更低浓度的酶用量和更快的转化效率。
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