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公开(公告)号：CN114507696B
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202210250123.5
申请日：2022-03-15
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种高粱素的制备方法，特别涉及一种利用基因工程改造的酿酒酵母在制备高粱素中的应用。本发明提供的一种高粱素的制备方法，通过对酿酒酵母的代谢途径进行改造以提高合成乙酰辅酶A（Acetyl‑CoA）和丙二酰辅酶A（Malonyl‑CoA）的能力，同时将合成高粱素的相关基因导入酿酒酵母中，获得高产高粱素的重组工程菌，并将工程菌应用于制备高粱素的方法，实现高粱素高效的合成。
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公开(公告)号：CN117286038A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202311238328.2
申请日：2023-09-25
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种重组谷氨酸棒杆菌及其构建方法与应用。一种重组谷氨酸棒杆菌，所述重组谷氨酸棒杆菌以谷氨酸棒杆菌ATCC13020为宿主，插入DE3基因，敲除lysE基因，表达突变后的lysC基因，并插入含T7启动子的ectBAC基因；所述突变后的lysC基因经由lysC基因的301位定点突变得到。本发明设计得到的重组谷氨酸棒杆菌在生产四氢嘧啶的过程中不会分泌内毒素，可代替大肠杆菌进行应用，生物安全性高，大大简化了后提取工艺，具有较好的生产四氢嘧啶的应用前景。
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公开(公告)号：CN116083380A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202210863059.8
申请日：2022-07-21
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种来源于胡椒的2‑链烯还原酶及其编码基因，以及该2‑链烯还原酶在微生物催化制备四氢胡椒碱中的应用。所述胡椒2‑链烯还原酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供了一种可催化制备四氢胡椒的2‑链烯还原酶及其编码基因，利用该酶以胡椒碱为反应底物，可实现四氢胡椒碱的高效制备。
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公开(公告)号：CN116240190A
公开(公告)日：2023-06-09
申请号：CN202211559847.4
申请日：2022-12-06
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶突变体、编码基因及应用。所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的野生型蔗糖磷酸化酶第137位精氨酸经单点突变而得。本发明通过在来源于罗氏乳杆菌的野生型蔗糖磷酸化酶的第137位氨基酸残基位点引入点突变，显著提高了其在以蔗糖和甘油为原料生产2‑α‑葡萄糖基甘油的催化活性和糖基化位点的区域选择性，降低了副产物1‑α‑葡萄糖基甘油的合成。该酶突变体LreSP‑R137M在生产2‑α‑葡萄糖基甘油方面具有良好的应用价值。
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公开(公告)号：CN114507696A
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN202210250123.5
申请日：2022-03-15
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种高粱素的制备方法，特别涉及一种利用基因工程改造的酿酒酵母在制备高粱素中的应用。本发明提供的一种高粱素的制备方法，通过对酿酒酵母的代谢途径进行改造以提高合成乙酰辅酶A（Acetyl‑CoA）和丙二酰辅酶A（Malonyl‑CoA）的能力，同时将合成高粱素的相关基因导入酿酒酵母中，获得高产高粱素的重组工程菌，并将工程菌应用于制备高粱素的方法，实现高粱素高效的合成。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115466256B
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202211039282.7
申请日：2022-08-29
Applicant: 浙江工业大学 , 深圳杉海创新技术有限公司
IPC: C07D455/00 , C07D471/22
Abstract: 本发明提供了一种从苦豆子中提取分离纯化苦参碱和槐定碱的方法，属于化合物提取技术领域。所述方法为：(1)从苦豆子粉末中抽提油脂类化合物，得苦豆子油以及脱脂处理的苦豆子粉末；(2)用含有机溶剂的水溶液提取苦参型总生物碱；(3)加入还原剂，得到还原后的苦参总碱提取液；(4)采用大孔吸附树脂吸附饱和，采用醇溶液进行目标产物的洗脱；(5)脱色树脂处理；(6)苦参碱与金属离子络合，经离子交换树脂纯化后将金属离子去除；(7)最后通过结晶和重结晶获得苦参碱纯品和槐定碱纯品。本发明所采用的方法简化了工艺流程，同时大量降低生产成本，改变了现有生产工艺中毒性较大的问题，提高苦豆子生物碱的产量，更适合于工业化生产。
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公开(公告)号：CN117305386A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311239992.9
申请日：2023-09-25
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及微生物发酵技术领域，具体涉及一种重组谷氨酸棒杆菌发酵高产四氢嘧啶的方法。一种重组谷氨酸棒杆菌发酵高产四氢嘧啶的方法，包括以下步骤：培养获得一级种子液；培养获得二级种子液；发酵产四氢嘧啶：将二级种子液接种于发酵培养基中，当发酵液的OD600达到20左右时，加入异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷，补充氮源并通过补加葡萄糖维持残糖浓度在10～40g/L，当四氢嘧啶生产速率＜0.3g/L·h时，停止补加葡萄糖，培养至残糖浓度＜3g/L，结束发酵。本发明通过控制发酵培养过程中的葡萄糖浓度，大幅提高了四氢嘧啶的产量，产量可达96.6g/L，已满足工业需求。
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公开(公告)号：CN114672523B
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202210504282.3
申请日：2022-05-10
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12P7/66
Abstract: 本发明涉及生物农药合成技术领域，特别涉及一种酶法合成高粱素的方法。一种酶法合成高粱素的方法，包括如下步骤：a、强心酚三烯在甲基转移酶与甜菜碱的作用下，生成甲基强心酚三烯；b、甲基强心酚三烯在细胞色素P450酶作用下，生成二氢高粱素；c、二氢高粱素自身氧化为高粱素。本发明针对高粱素植物提取方法局限，开发了其酶法制备工艺。相对于传统路线，改工艺具有路线短、反应条件温和、环保等优点，这不仅显著的降低了高粱素生产成本，同时也提高了其工业生产中安全及绿色指数。
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公开(公告)号：CN114457124B
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202210176560.7
申请日：2022-02-25
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明属于酶催化技术领域，具体涉及一种酶催化甲基腰果酚的制备方法，包括以下步骤：首先合成出甲基转移酶的原始基因，对其进行优化、重组，将重组的表达载体转移到菌株中进行表达，对表达菌株进行培养，然后破碎，得到含重组甲基转移酶菌体破碎液。向反应器中加入腰果酚、甜菜碱、重组甲基转移酶菌体破碎液、磷酸盐缓冲液，调节pH值、温度，反应后得到甲基腰果酚；本发明提供的酶催化甲基腰果酚的制备方法，制备出了一定转化率的甲基腰果酚，不使用易燃易爆物质硫酸二甲酯和碘甲烷，环境友好，对于安全生产具有十分重要的意义。
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公开(公告)号：CN115058406B
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202210580959.1
申请日：2022-05-25
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种对硝基苄基酯酶突变体、编码基因，及其在酶催化dl‑薄荷酯手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。本发明的有益效果主要体现在：①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂，酶催化活性维持较高水平；②在无助溶剂体系下，突变体酶催化的立体选择性较野生型和F314E突变型显著提高，将该突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应，并以10～200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物，进行水解拆分制备l‑薄荷醇，结果表明l‑乙酸薄荷酯底物转化率>93％，产物l‑薄荷醇的eep值>98％，表现出良好的工业应用性能。
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