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公开(公告)号：CN117511901A
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202311503074.2
申请日：2023-11-13
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明提供了新型环糊精糖基转移酶突变体及其在柑橘黄酮糖基化修饰中的应用。所述应用以糊精为糖基供体，以柑橘黄酮为糖基受体，在环糊精糖基转移酶的催化作用下实现黄酮糖苷的合成。所述柑橘黄酮选自橙皮苷、柚皮苷、芦丁中的至少一种。该新型环糊精糖基转移酶突变体由来源于嗜碱芽孢杆菌(Bacillus sp.)的野生型环糊精糖基转移酶通过第123、205、217和283四个位点的组合突变得到。在全细胞催化体系中，于10％的黄酮投料量和20％的糊精投料量下，所得的突变体CGTase‑Y217F/F205H/G283V/W123H在6h催化时间下对底物橙皮苷、柚皮苷以及芦丁的转化率分别为96.9％、72.1％和80.4％。
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公开(公告)号：CN117305386A
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311239992.9
申请日：2023-09-25
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及微生物发酵技术领域，具体涉及一种重组谷氨酸棒杆菌发酵高产四氢嘧啶的方法。一种重组谷氨酸棒杆菌发酵高产四氢嘧啶的方法，包括以下步骤：培养获得一级种子液；培养获得二级种子液；发酵产四氢嘧啶：将二级种子液接种于发酵培养基中，当发酵液的OD600达到20左右时，加入异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷，补充氮源并通过补加葡萄糖维持残糖浓度在10～40g/L，当四氢嘧啶生产速率＜0.3g/L·h时，停止补加葡萄糖，培养至残糖浓度＜3g/L，结束发酵。本发明通过控制发酵培养过程中的葡萄糖浓度，大幅提高了四氢嘧啶的产量，产量可达96.6g/L，已满足工业需求。
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公开(公告)号：CN114457055B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202210203075.4
申请日：2022-03-03
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及一种羧酯酶及其编码基因，以及由该编码基因构建的基因工程，以及其在微生物催化制备S‑萘普生中的应用。所述羧酯酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因核苷酸核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。利用该基因构建工程菌进行酶法立体选择性催化生产S‑萘普生，具有时空产率高，效果稳定的特点，在较短时间内可以获得转化效率可达到48%以上，光学纯度可达到99%以上，对实现高产量高纯度的S‑萘普生生产具有重要意义。
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公开(公告)号：CN113831354A
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN202111160986.5
申请日：2021-09-30
申请人： 浙江工业大学
IPC分类号： C07D495/14 , A01N43/90 , A01P3/00
摘要： 本发明公开了二噻烯‑四甲酰亚胺类衍生物及其制备和应用。所述的二噻烯‑四甲酰亚胺类化合物的结构如式XIII、XVII或XVIII所示。本发明提供了所述的二噻烯‑四甲酰亚胺类化合物在制备抑菌剂中的应用。本发明提供的二噻烯‑四甲酰亚胺类化合物对于S.sclerotiorum、B.cinerea和R.solani具有优良的抑制活性。
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公开(公告)号：CN113073061A
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN202110364697.0
申请日：2021-04-06
申请人： 浙江美迪生物科技有限公司 , 浙江工业大学
IPC分类号： C12N1/20 , C12N11/10 , C12N11/084 , C12P19/44 , C12R1/09
摘要： 本发明提供一种固定化细胞高效生产α‑熊果苷的方法，步骤如下：将大肠杆菌Escherichia coli IFE‑amy 637在含有卡那霉素的种子培养基中，于30℃～37℃、100rpm～200rpm培养至对数生长中期，获得种子液，将新鲜培养的种子液以体积浓度5％的接种量接种到5m3的发酵罐，经高密度发酵获得生产α‑熊果苷所用的酶催化剂(菌体)；利用湿菌体制备固定化细胞；利用固定化细胞进行催化反应获得成品。本发明方法利用固定化细胞生产α‑熊果苷，提高了α‑熊果苷的生产效率，缩短了工艺流程，降低了生产成本，减少了“三废排放”。
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公开(公告)号：CN109762794B
公开(公告)日：2020-12-25
申请号：CN201811653240.6
申请日：2018-12-29
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种葡萄糖基转移酶在生产乙基香兰素‑α‑D‑葡萄糖苷中的应用，所述葡萄糖基转移酶氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示。所述的应用以含葡萄糖基转移酶编码基因的工程菌经发酵培养获得的发酵液为菌剂，以麦芽糖和乙基香兰素为底物，在pH值6.0‑8.5、20‑40℃条件下进行转化反应，反应完全后，将反应液分离纯化，获得乙基香兰素‑α‑D‑葡萄糖苷。本发明的菌剂生物催化生产乙基香兰素‑α‑D‑葡萄糖苷，底物转化率大于80％，乙基香兰素‑α‑D‑葡萄糖苷的产物浓度高，转化率高，有利于生物法制备乙基香兰素‑α‑D‑葡萄糖苷回收纯化。
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公开(公告)号：CN111172128A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN202010071051.9
申请日：2020-01-21
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶在制备2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸中的应用，以含蔗糖磷酸化酶基因的工程菌经发酵获得的发酵液或发酵液离心后的湿菌体用缓冲液重悬的破碎液为催化剂，以L-抗坏血酸为底物，以蔗糖为辅助底物，以pH为4.8-6.0的缓冲液为反应介质构成反应体系，在30-55℃的条件下进行反应，获得AA-2G。本发明采用蔗糖磷酸化酶高效生产AA-2G，其产率为3.47g·L-1·h-1，较现有报道的B.longum来源的蔗糖磷酸化酶提高了34.5％，AA-2G的最高浓度可达178g/L；本发明重组枯草芽孢杆菌能够高效分泌表达蔗糖磷酸化酶，将发酵液直接用于食品级AA-2G的制备。
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公开(公告)号：CN117946189A
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410142907.5
申请日：2024-02-01
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种从发酵液中分离纯化纳他霉素的方法，包括以下步骤S1、对含有纳他霉素的发酵液进行均质处理；S2、对均质处理后的发酵液进行固液分离，将固体干燥、粉碎、过筛；S3、把经过步骤S2过筛处理得到的固体放入索氏提取器的提取管中，用溶剂提取纳他霉素，在索氏提取器的底部收集瓶中得到富集的纳他霉素结晶体；S4、将步骤S3中富集的纳他霉素结晶体分离，收集、洗涤、干燥，得到纳他霉素。本发明方法工艺简单，并且因为是循环萃取，溶剂损耗小、易回收，节省成本，适用于产业化生产。
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公开(公告)号：CN114350730B
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202111619319.9
申请日：2021-12-28
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种利用米曲霉糖化酶制备α‑单葡萄糖基橙皮苷的方法，所述方法为：以寡聚葡萄糖基橙皮苷混合物为反应底物，以米曲霉来源的糖化酶为催化剂，在pH3.0~8.0、40~65℃条件下进行酶解反应2~16 h，于反应液中获得以α‑单葡萄糖基橙皮苷为主的橙皮苷糖苷产物。本发明创新性地将米曲霉所产的糖化酶用于酶切多种寡聚葡萄糖基橙皮苷上的多个糖基，产生单一糖基化产物α‑单葡萄糖基橙皮苷产物，不会发生过量切割葡萄糖基而造成橙皮苷个糖苷产物的损失。
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