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    一种基于细胞外囊泡的药物传递系统及其制备方法
    1.
    发明公开
    一种基于细胞外囊泡的药物传递系统及其制备方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN117815183A

    公开(公告)日：2024-04-05

    申请号：CN202410021282.7

    申请日：2024-01-08

    申请人： 河南省华隆生物技术有限公司

    发明人： 赵礼军 ,  熊建民

    IPC分类号： A61K9/127 ,  A61K47/46 ,  A61K47/24 ,  A61K47/28 ,  A61K47/14

    摘要： 本发明公开一种基于细胞外囊泡的药物传递系统，包括细胞外囊泡、装载于细胞外囊泡内部的药物体以及包裹于细胞外囊泡外部的脂质包膜层；本发明还公开了药物传递系统的制备方法，包括如下步骤：S1、从样品中细胞中提取细胞外囊泡后进行细胞传代并制成细胞外囊泡储备液；S2、将药物体加入细胞外囊储备液内，混匀后孵育，得到装载药物的载药囊泡悬液；S3、采用复乳法将装载药物的载药囊泡悬液包封于脂质包膜层内形成多囊脂质体混悬液；本发明提供的基于细胞外囊泡的药物传递系统及其制备方法，通过多囊泡体的质膜与细胞膜融合后，使细胞外囊泡直接与细胞内的膜性细胞器进融合，调节细胞的生理功能，从而实现对细胞器的直接给药方式。

    一种检测嵌合抗原受体或基因修饰的T细胞受体表达的方法和应用
    2.
    发明授权
    一种检测嵌合抗原受体或基因修饰的T细胞受体表达的方法和应用 有权

    公开(公告)号：CN107254489B

    公开(公告)日：2021-06-18

    申请号：CN201710464896.2

    申请日：2017-06-19

    申请人： 河南省华隆生物技术有限公司

    发明人： 韦丹 ,  付苏雷 ,  连杰 ,  赵礼军 ,  李德志

    IPC分类号： C12N15/867 ,  C07K14/705 ,  A61K35/17 ,  A61P35/00

    摘要： 本发明涉及免疫学和分子生物学领域，具体涉及一种检测嵌合抗原受体或基因修饰的T细胞受体表达的方法和应用，所述方法主要包括以下步骤：(1)将包装好的CAR或TCR慢病毒侵染贴壁细胞或悬浮细胞，获得表达CAR或TCR的稳定转染贴壁细胞或悬浮细胞；(2)将贴壁细胞铺板，待贴壁细胞的融合度达到70‑90％时，加入相应的悬浮细胞；(3)继续培养并收集上清，对悬浮在上清中的细胞进行计数并观察悬浮细胞与贴壁细胞结合现象。本发明的检测嵌合抗原受体或基因修饰的T细胞受体表达的方法不但能判定CAR或TCR是否正确表达，还能证明已表达的CAR或TCR能否与相应的肿瘤抗原特异性结合，进一步提高了CAR或TCR表达检测的准确率，为肿瘤免疫治疗提供进一步的保障。

    基于四次跨膜蛋白免疫吸附的细胞外囊泡分离方法
    4.
    发明公开
    基于四次跨膜蛋白免疫吸附的细胞外囊泡分离方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN117821372A

    公开(公告)日：2024-04-05

    申请号：CN202410006144.1

    申请日：2024-01-03

    申请人： 河南省华隆生物技术有限公司

    发明人： 赵礼军 ,  熊建民 ,  李静静

    IPC分类号： C12N5/071

    摘要： 本发明公开基于四次跨膜蛋白免疫吸附的细胞外囊泡分离方法，包括如下步骤：S1、制备预处理样品溶液；S2、制备免疫吸附柱，向活化后的吸附柱内加入配制的偶联剂工作液；S3、将预处理样品溶液添加至免疫吸附柱内，自然流过免疫吸附柱；S4、向S3中的免疫吸附柱内加入平衡缓冲液洗去非特异性结合；S5、向S4中免疫吸附柱内加入洗脱工作液进行洗脱，得到纯化的细胞外囊泡；本发明提供的分离方法，采用多跨膜蛋白抗体免疫吸附式分离方式，针对细胞外囊泡质膜嵌合的四聚体为靶点，能特异性富集生物样品中表达某种或某几种特异性嵌合蛋白的细胞外囊泡。

    一种NK滋养层细胞及其应用
    5.
    发明公开
    一种NK滋养层细胞及其应用 审中-实审

    公开(公告)号：CN112725284A

    公开(公告)日：2021-04-30

    申请号：CN202110113588.1

    申请日：2021-01-27

    申请人： 河南省华隆生物技术有限公司

    发明人： 赵礼军 ,  熊建民

    IPC分类号： C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N15/12 ,  C12N15/24 ,  C12N15/62 ,  C12N5/0783

    摘要： 本发明提供了一种NK滋养层细胞及其应用，所述NK滋养层细胞表达细胞因子组合物，所述细胞因子组合物包括CD86、CD19、IL‑21、CD137L和CD64；所述CD86包括SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明还提供了一种重组载体、一种重组慢病毒、所述NK滋养层细胞的制备方法和一种NK细胞培养基。通过构建重组载体，包装得到重组慢病毒后，再导入宿主细胞的基因组内，制备得到的NK滋养层细胞可以持续分泌刺激NK细胞增殖与分化的相关蛋白，实现了NK细胞的高效率、低成本扩增，制备方法简单高效，具有广阔的应用前景。

    一种人工干细胞壁龛及其制备方法与应用
    8.
    发明公开
    一种人工干细胞壁龛及其制备方法与应用 审中-实审

    公开(公告)号：CN117535228A

    公开(公告)日：2024-02-09

    申请号：CN202311538562.7

    申请日：2023-11-17

    申请人： 河南省华隆生物技术有限公司

    发明人： 赵礼军 ,  熊建民 ,  李静静

    IPC分类号： C12N5/071 ,  A61L27/38 ,  A61L27/18 ,  A61L27/22

    摘要： 本发明提供一种人工干细胞壁龛的制备方法，属于细胞组织工程技术领域，包括以下步骤:（1）水凝性基质胶上的窦道制作；（2）壁龛支持细胞在水凝性基质胶上的附着培养；（3）细胞外基质对窦道细胞表面的包被处理；（4）干细胞或克隆的干细胞在水凝性基质胶和窦道口的接种。本发明提供一种人工干细胞壁龛及其制备方法与应用，达到降低干细胞壁龛构建的高随机性的目的。

    一种液体混合机及其应用
    9.
    发明公开
    一种液体混合机及其应用 有权

    公开(公告)号：CN108067147A

    公开(公告)日：2018-05-25

    申请号：CN201711489851.7

    申请日：2017-12-29

    申请人： 河南省华隆生物技术有限公司

    发明人： 韦丹 ,  赵礼军 ,  连杰 ,  李德志 ,  付苏雷 ,  吴雷振

    IPC分类号： B01F13/02 ,  B01F15/02 ,  C12N15/867 ,  C12N7/00 ,  C12R1/93

    摘要： 本发明提供了一种液体混合机及其应用，所述液体混合机包括依次相连的如下部件：推进装置、液体混合容器(5)和供气装置；其中，各部件中通过管道相连，所述供气装置中包括无菌空气过滤器(7)，用于向液体混合容器(5)中通入无菌空气。本发明的液体混合机设置有送液通路和供气通路，是一种安全、方便、高效的自动化装置；利用所述液体混合机进行慢病毒包装，过程自动化，与人工慢病毒包装技术相比，提高了包装速度、减少了误差、避免了污染问题，可用于大规模慢病毒包装。