一种外泌体蛋白跨膜方向的检测方法

    公开(公告)号:CN116478297A

    公开(公告)日:2023-07-25

    申请号:CN202211721032.1

    申请日:2022-12-30

    摘要: 本发明涉及一种外泌体蛋白跨膜方向的检测方法,属于生物工程技术领域,通过基因工程的方法将Flag或HA融合到跨膜蛋白的N或C段,采用慢病毒转染的方式将融合蛋白基因整合到目的细胞的基因组中产生稳定过表达的细胞株,同时将融合蛋白整合到细胞囊泡上。通过梯度离心和超速离心方法,采用流式细胞术和Western blot鉴定Flag或HA的信号,来确定细胞外囊泡跨膜蛋白的嵌合方向。本发明方法绕开了免疫制备抗体的繁琐步骤,方法简单,耗时短,成本低廉,可靠性强。