一种干细胞外泌体复合剂及其制备方法及应用

    公开(公告)号:CN118370774A

    公开(公告)日:2024-07-23

    申请号:CN202410516045.8

    申请日:2024-04-27

    发明人: 韩改会

    摘要: 本发明公开一种干细胞外泌体复合剂,包括凝胶载体、犬源胎盘蜕膜外泌体、熊胆混合液和人工泪液;一种干细胞外泌体复合剂的制备方法,包括如下步骤:S1、制备犬源胎盘蜕膜外泌体;S2、制备熊胆混合液;S3、制备人工泪液;S4、制备凝胶载体;S5、制备干细胞外泌体复合剂;一种干细胞外泌体复合剂在制备犬类干眼病药物中的应用,所述干细胞外泌体复合剂包括凝胶载体、犬源胎盘蜕膜外泌体、熊胆混合液和人工泪液;本发明提供的干细胞外泌体复合剂及其制备方法及应用,成本低,易吸收,具有治疗炎症、延长泪膜破裂时间、修复角膜上皮的作用,通过滋阴润燥生津而润养结角膜,使犬类眼睛炎症消失视力提高。

    基于四次跨膜蛋白免疫吸附的细胞外囊泡分离方法

    公开(公告)号:CN117821372A

    公开(公告)日:2024-04-05

    申请号:CN202410006144.1

    申请日:2024-01-03

    IPC分类号: C12N5/071

    摘要: 本发明公开基于四次跨膜蛋白免疫吸附的细胞外囊泡分离方法,包括如下步骤:S1、制备预处理样品溶液;S2、制备免疫吸附柱,向活化后的吸附柱内加入配制的偶联剂工作液;S3、将预处理样品溶液添加至免疫吸附柱内,自然流过免疫吸附柱;S4、向S3中的免疫吸附柱内加入平衡缓冲液洗去非特异性结合;S5、向S4中免疫吸附柱内加入洗脱工作液进行洗脱,得到纯化的细胞外囊泡;本发明提供的分离方法,采用多跨膜蛋白抗体免疫吸附式分离方式,针对细胞外囊泡质膜嵌合的四聚体为靶点,能特异性富集生物样品中表达某种或某几种特异性嵌合蛋白的细胞外囊泡。

    一种NK滋养层细胞及其应用
    3.
    发明公开

    公开(公告)号:CN112725284A

    公开(公告)日:2021-04-30

    申请号:CN202110113588.1

    申请日:2021-01-27

    发明人: 赵礼军 熊建民

    摘要: 本发明提供了一种NK滋养层细胞及其应用,所述NK滋养层细胞表达细胞因子组合物,所述细胞因子组合物包括CD86、CD19、IL‑21、CD137L和CD64;所述CD86包括SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明还提供了一种重组载体、一种重组慢病毒、所述NK滋养层细胞的制备方法和一种NK细胞培养基。通过构建重组载体,包装得到重组慢病毒后,再导入宿主细胞的基因组内,制备得到的NK滋养层细胞可以持续分泌刺激NK细胞增殖与分化的相关蛋白,实现了NK细胞的高效率、低成本扩增,制备方法简单高效,具有广阔的应用前景。

    一种重组载体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN108034677A

    公开(公告)日:2018-05-15

    申请号:CN201711461023.2

    申请日:2017-12-28

    IPC分类号: C12N15/85 C12N5/10 C12N15/62

    摘要: 本发明提供了一种重组载体及其制备方法和应用,所述重组载体包含膜固定白介素15的基因和膜固定白介素21的基因;本发明通过设计膜固定白介素15和膜固定白介素21,将分泌蛋白改为跨膜蛋白,与包括41BBL、CD64、CD86和CD19的共刺激信号传导结构域协同激活并长期保持NK细胞的增殖和功能发挥,提高扩增效率,在体外诱导NK细胞的分化成熟,膜固定白介素15和膜固定白介素21相互搭配,协助增强对NK细胞的激活功能,并辅以共刺激信号结构域,全面稳定保持对NK细胞的激活及诱导分化成熟功能;本发明提供的制备方法简洁高效,便于操作,应用于NK细胞扩增领域,能实现NK细胞的高效扩增,具有广阔的应用前景。

    GM-CSF和MART-1双基因共表达重组载体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN103602695B

    公开(公告)日:2015-06-03

    申请号:CN201310611566.3

    申请日:2013-11-25

    摘要: 本发明公开了一种GM-CSF和MART-1双基因共表达重组载体,其沿载体转录方向依次连接有GM-CSF基因、IRES序列和MART-1基因,或者沿载体转录方向依次连接有MART-1基因、IRES序列和GM-CSF基因;所述GM-CSF基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,所述MART-1基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示,所述IRES序列的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:3所示。本发明所述的双基因共表达重组载体,采用IRES序列来连接GM-CSF基因和MART-1基因,能够在同一载体中同时表达人黑色素瘤分化抗原和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子,该重组载体可用于黑色素瘤的基因免疫治疗,既能发挥细胞因子的免疫调节作用,又能靶向性地针对黑色素瘤产生特异性抗肿瘤效应。