一种能阻断亚硝化反应的黄酮组分的制备方法

    公开(公告)号:CN101735191A

    公开(公告)日:2010-06-16

    申请号:CN200810231013.4

    申请日:2008-11-24

    Abstract: 本发明公开了一种能阻断亚硝化反应的黄酮组分的制备方法,是将山楂粉碎,以60-100%的乙醇在20~30℃下浸泡提取,回收乙醇后以乙酸乙酯/水分配,将得到的浸膏经硅胶柱层析分离,以氯仿-甲醇梯度洗脱,收集氯仿-甲醇9∶1-8∶2洗脱部分。采用上述技术方案后,从每1千克山楂中可提取出山楂总黄酮组分30克左右,由于山楂在我国的分布十分广泛,因此获取原料十分容易,并可有效降低生产成本。这既为保健烟的开发提供了充足的原料,也为果农的产品深加工找到了一条新的出路。

    一种精确定量袋栽平菇菌丝生物量的方法及其应用

    公开(公告)号:CN113249448A

    公开(公告)日:2021-08-13

    申请号:CN202110543145.6

    申请日:2021-05-17

    Abstract: 本发明公开了一种精确定量袋栽平菇菌丝生物量的方法及其应用。所述方法包括以下步骤:(1)平菇特异性phos基因扩增和测序;(2)phos基因荧光定量PCR引物设计和扩增条件优化;(3)平菇菌丝制备;(4)平菇菌丝‑培养料混合样品制备及基因组DNA提取;(5)平菇菌丝DNA拷贝数‑生物量标准曲线构建。所述方法不仅为袋栽平菇菌丝的精确定量提供了很好的解决办法,而且将为后续探究平菇菌丝生物量与子实体产量之间的关系、揭示平菇不同生长发育时期菌丝生物量的动态变化提供方法借鉴。

    一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法

    公开(公告)号:CN102978233B

    公开(公告)日:2014-01-22

    申请号:CN201210462778.5

    申请日:2012-11-16

    Abstract: 本发明涉及一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法,其包括以下步骤:一)黑根霉菌丝脂质体转化:1)将幼嫩黑根霉湿菌丝与甘露醇水溶液混合后研磨,得菌悬液,备用;2)将脂质体2000与质粒pEGFP-C1混匀,于-5-5℃放置15-60min,然后转入到菌悬液中,混匀,于-5-5℃放置15-60min;3)将步骤2)所得混合液涂抹PDA平板,25-30℃培养1-5天;二)传代培养:4)挑取步骤3)经荧光显微镜检测带有荧光的转化子接种于PDA平板上25-30℃培养1-5天,共传代培养5-8次。该方法简便、快捷、转化率高、转化子遗传稳定,不需要制备原生质体,不需要复杂装置。

    一种脂质体介导转化双孢蘑菇菌褶的方法

    公开(公告)号:CN104651389B

    公开(公告)日:2017-06-06

    申请号:CN201410832003.1

    申请日:2014-12-29

    Abstract: 本发明涉及一种脂质体介导转化双孢蘑菇菌褶的方法,具体为:1)采摘菌褶未破的幼嫩蘑菇子实体,清洁表面后,收集菌褶组织并切成块;2)将脂质体和质粒混匀,于‑5-5℃放置15-60 min;3)将步骤2)产物用无菌超纯水稀释1000倍,与菌褶组织块混匀,室温放置80-120 min;4)将步骤3)所得产物加入到RCM固体培养基中,室温培养8-12d;5)将萌发的双孢蘑菇菌褶组织块转移到含潮霉素的PDA平板上,室温培养10-20d;6)切下新生长的菌丝块移植到PDA斜面培养,传代培养2-5次,再转接到含潮霉素的PDA平板上,能够正常生长的即为转化子。该方法具有操作简便、转化率高、转化子稳定等优点。

    一种利用大豆慢生根瘤菌促进平菇生长的方法

    公开(公告)号:CN102405770B

    公开(公告)日:2013-03-13

    申请号:CN201110277742.5

    申请日:2011-09-19

    Abstract: 本发明涉及一种利用大豆慢生根瘤菌促进平菇生长的方法,其包括以下步骤:①制备菌悬液:挑取适量大豆慢生根瘤菌斜面菌苔接种于YMA液体培养基中,20-30℃振荡培养12-18h,然后配制成密度3-8×107个/ml的菌悬液;②共培养:取平菇天达300斜面菌种块0.5cm×0.5cm接种于装有150-250g灭菌麦粒培养基的原种瓶中,同时在菌种块周围接入大豆慢生根瘤菌菌悬液1-5ml,20-30℃培养至菌丝发满全瓶,用作原种;③培养出菇:将原种培养成栽培种;然后把栽培种接种于栽培袋中培养至菌丝发满袋后,移入出菇房中培养出菇。采用该方法菌丝生长快,收获所得平菇子实体产量高,品质好。

    一种制备化合物猴头菌素P的方法

    公开(公告)号:CN101736069B

    公开(公告)日:2012-07-18

    申请号:CN200810231014.9

    申请日:2008-11-24

    Abstract: 本发明公开了一种制备化合物猴头菌素P的方法,由下述步骤组成:先制备培养基;然后在温度20-30℃、转速为150-200r/min的条件下于暗室中培养发酵15-30天,得到发酵液和菌丝体两个部分;将菌丝体过滤后烘干,以乙酸乙酯为溶剂室温浸泡提取两次;将得到的浸膏上柱层析分离,以体积比为40:1—40:10的氯仿-甲醇系统梯度洗脱,每20ml为一个流份,流份50—60经反复柱层析,即得到化合物猴头菌素P的纯品。本发明通过优化液体发酵培养基的氮源、碳源、金属离子、PH值、接种量等因子,使猴头菌素P发酵产量由文献中的发酵量的0.5-0.8%提高到约2-3%,整体产量有了较大的提高,具有发酵时间短、原料分离程序简单易行等优点。

    一种利用大豆慢生根瘤菌促进平菇生长的方法

    公开(公告)号:CN102405770A

    公开(公告)日:2012-04-11

    申请号:CN201110277742.5

    申请日:2011-09-19

    Abstract: 本发明涉及一种利用大豆慢生根瘤菌促进平菇生长的方法,其包括以下步骤:①制备菌悬液:挑取适量大豆慢生根瘤菌斜面菌苔接种于YMA液体培养基中,20-30℃振荡培养12-18h,然后配制成密度3-8×107个/ml的菌悬液;②共培养:取平菇天达300斜面菌种块0.5cm×0.5cm接种于装有150-250g灭菌麦粒培养基的原种瓶中,同时在菌种块周围接入大豆慢生根瘤菌菌悬液1-5ml,20-30℃培养至菌丝发满全瓶,用作原种;③培养出菇:将原种培养成栽培种;然后把栽培种接种于栽培袋中培养至菌丝发满袋后,移入出菇房中培养出菇。采用该方法菌丝生长快,收获所得平菇子实体产量高,品质好。

    食用菌和植物双链RNA病毒检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN101086011B

    公开(公告)日:2010-12-08

    申请号:CN200610017921.4

    申请日:2006-06-08

    Abstract: 本发明涉及一种食用菌和植物双链RNA病毒检测试剂盒及其应用,它包含有以下药物:(1)提取缓冲液;(2)提取双链RNA的药物;(3)纯化的药物;(4)双链RNA的琼脂糖凝胶电泳检测药物。由于双链RNA对酶具有一定的抗性,因而较易操作。采用本发明的试剂盒不但能检测出病毒颗粒中的双链RNA,也可检测出裸露的双链RNA;本发明中可以利用琼脂糖凝胶电泳或者聚丙烯酰胺凝胶电泳检测的双链RNA做进一步的理论分析。采用本发明的试剂盒不需要特殊设备,研究周期短,简便、快速、灵敏,能在较少的样品中检测到病毒,不容易出现假阳性。本发明可以广泛的应用于食用菌和植物双链RNA病毒的检测,为脱毒菌种和脱毒苗的生产、制备,以及为防止病毒危害提供了有利手段。

    一种制备化合物猴头菌素P的方法

    公开(公告)号:CN101736069A

    公开(公告)日:2010-06-16

    申请号:CN200810231014.9

    申请日:2008-11-24

    Abstract: 本发明公开了一种制备化合物猴头菌素P的方法,由下述步骤组成:先制备培养基;然后在温度20-30℃、转速为150-200r/min的条件下于暗室中培养发酵15-30天,得到发酵液和菌丝体两个部分;将菌丝体过滤后烘干,以乙酸乙酯为溶剂室温浸泡提取两次;将得到的浸膏上柱层析分离,以体积比为40∶1-40∶10的氯仿-甲醇系统梯度洗脱,每20ml为一个流份,流份50-60经反复柱层析,即得到化合物猴头菌素P的纯品。本发明通过优化液体发酵培养基的氮源、碳源、金属离子、pH值、接种量等因子,使猴头菌素P发酵产量由文献中的发酵量的0.5-0.8%提高到约2-3%,整体产量有了较大的提高,具有发酵时间短、原料分离程序简单易行等优点。

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