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公开(公告)号：CN111690644A
公开(公告)日：2020-09-22
申请号：CN202010541603.8
申请日：2020-06-15
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本申请属于双孢蘑菇基因工程技术领域，具体涉及一个双孢蘑菇血红素双加氧酶及其应用专利申请事宜。利用已知的真菌血红素双加氧酶的氨基酸序列，通过与双孢蘑菇基因组序列比对，本申请获得了一个双孢蘑菇的血红素双加氧酶，该酶具有CYP域，与构巢曲霉的PpoC的氨基酸序列同源性为33%，相似性为51%，但该酶的CYP域和PpoC一样，不含有完整的P450特征的共有序列血红素保守结合区，推测该酶的CYP域也可能没有功能，将其命名为AbDOX-(CYP)。进一步对该基因的克隆及大肠杆菌转化表达表明，该酶能够催化亚油酸合成1-辛烯-3-醇。基于此证据，可为1-辛烯-3-醇的进一步产业化生产改进奠定良好的技术基础。
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公开(公告)号：CN101556282B
公开(公告)日：2012-12-26
申请号：CN200810049514.0
申请日：2008-04-09
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/532 , G01N33/558
Abstract: 本发明公开了一种烟草复合病毒田间快速检测试纸条，该试纸条是将胶体金层析检测试纸固定在PVC板适当的位置上，将引水材料连接在的胶体金层析检测试纸下端即成吸水纸层，吸水材料连接在胶体金层析检测试纸的上端，胶体金抗体结合物玻璃纤维素膜置于引水材料下与胶体金层析检测试纸衔接，用切割机将组装后的PVC板纵向切成5-7mm宽的测试条，将其装入板壳即样品垫即可，本发明还公开了这种试纸条的制备方法，本发明检测适温15～35℃，检样量0.1～0.3g的样品，相当于叶面积大约3～5cm2；将烟叶在装有缓冲液的塑料袋中研磨后，将试纸条浸入，30min出结果；假阳性率低于1％。可见本发明使用方便，特别适用于田间快速检测，并且可靠性很高。
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公开(公告)号：CN101199260A
公开(公告)日：2008-06-18
申请号：CN200610128381.7
申请日：2006-12-14
Applicant: 河南农业大学
Inventor： 申进文 , 程雁 , 郭恒 , 张玉亭 , 邱立友 , 高玉千 , 戚元成 , 刘亮伟 , 王明道 , 刘新宇 , 张世敏 , 宋安东 , 王斌 , 王振河 , 冯雅岚 , 李燕 , 周素静
IPC: A01G1/04
Abstract: 本发明公开了一种白灵菇菌袋环割单排菌墙出菇方法，其方法如下，将菌袋中间塑料膜环割6～8厘米，然后垒菌墙，泥隔的稍厚，然后将菌袋两头料袋拉开，用薄膜搭上，保持温度10－20℃和湿度85－90％，进行出菇管理。菌袋出菇后一头留1～5个菇蕾，都能长成较好的菇。本发明由于采用上述方法，使菌袋环剥单排菌墙出菇法可以防止菌墙高温，有效补充了袋内水分和营养，具有出菇快、菇质好、产量高的特点，根据实验数据显示，可比常规立体出菇产量提高32％，比双排袋菌墙式出菇法产量提高11％，具有显著的增产效益。
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公开(公告)号：CN111690644B
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202010541603.8
申请日：2020-06-15
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本申请属于双孢蘑菇基因工程技术领域，具体涉及一个双孢蘑菇血红素双加氧酶及其应用专利申请事宜。利用已知的真菌血红素双加氧酶的氨基酸序列，通过与双孢蘑菇基因组序列比对，本申请获得了一个双孢蘑菇的血红素双加氧酶，该酶具有CYP域，与构巢曲霉的PpoC的氨基酸序列同源性为33%，相似性为51%，但该酶的CYP域和PpoC一样，不含有完整的P450特征的共有序列血红素保守结合区，推测该酶的CYP域也可能没有功能，将其命名为AbDOX‑(CYP)。进一步对该基因的克隆及大肠杆菌转化表达表明，该酶能够催化亚油酸合成1‑辛烯‑3‑醇。基于此证据，可为1‑辛烯‑3‑醇的进一步产业化生产改进奠定良好的技术基础。
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公开(公告)号：CN113249448A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110543145.6
申请日：2021-05-17
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/06
Abstract: 本发明公开了一种精确定量袋栽平菇菌丝生物量的方法及其应用。所述方法包括以下步骤：(1)平菇特异性phos基因扩增和测序；(2)phos基因荧光定量PCR引物设计和扩增条件优化；(3)平菇菌丝制备；(4)平菇菌丝‑培养料混合样品制备及基因组DNA提取；(5)平菇菌丝DNA拷贝数‑生物量标准曲线构建。所述方法不仅为袋栽平菇菌丝的精确定量提供了很好的解决办法，而且将为后续探究平菇菌丝生物量与子实体产量之间的关系、揭示平菇不同生长发育时期菌丝生物量的动态变化提供方法借鉴。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102978233B
公开(公告)日：2014-01-22
申请号：CN201210462778.5
申请日：2012-11-16
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法，其包括以下步骤：一）黑根霉菌丝脂质体转化：1）将幼嫩黑根霉湿菌丝与甘露醇水溶液混合后研磨，得菌悬液，备用；2）将脂质体2000与质粒pEGFP-C1混匀，于-5－5℃放置15－60min，然后转入到菌悬液中，混匀，于-5－5℃放置15－60min；3）将步骤2）所得混合液涂抹PDA平板，25－30℃培养1－5天；二）传代培养：4）挑取步骤3）经荧光显微镜检测带有荧光的转化子接种于PDA平板上25－30℃培养1－5天，共传代培养5－8次。该方法简便、快捷、转化率高、转化子遗传稳定，不需要制备原生质体，不需要复杂装置。
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公开(公告)号：CN101209055A
公开(公告)日：2008-07-02
申请号：CN200610160002.2
申请日：2006-12-29
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种防治烟草花叶病毒病的方法，包括以下步骤：提取录烟草花叶病毒的RNA基因组；利用烟草花叶病毒的RNA基因组，反转录得到烟草花叶病毒运动蛋白的cDNA；利用PCR技术分离烟草花叶病毒运动蛋白cDNA上150－800bp内21－23bp长的片断；将上述片段克隆入可表达RNA的质粒载体；使克隆的片段在缺失RNA酶的大肠杆菌内表达成RNA；粉碎细胞，并将其制成浓度为2－20ng/ml悬浮溶液；将悬浮液稀释1000倍后喷施于烟草的叶面上。本方法生产简便、成本低廉、对人畜和高等动物无害，适于在烟草上大量施用。制成的悬浮剂克服了可湿性粉剂和乳油剂的缺陷，助剂易于分散，田间施用更方便，没有残留和环境污染。
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公开(公告)号：CN110218736A
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201910562494.5
申请日：2019-06-26
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本申请属于基因工程技术领域，具体涉及一种改善PGPR产AcdS能力的改造方法。该方法通过同源重组替换启动子来提高PGPR菌的AcdS基因的表达量、AcdS酶活力和ACC代谢速率，进而提高PGPR菌对ACC的趋化强度。ACC是产AcdS的PGPR在根系定殖的关键趋化物之一，基于这一基础发明人以现有典型的恶臭假单胞菌UW4为例，对其进行了改造以提升其AcdS酶活，进一步对改造后菌株对ACC趋化强度进行实验后发现，相较于原始出发菌株，改造后菌株对ACC趋化强度得到了明显增强，而这可为PGPR在植物根际趋化定殖以及推进PGPR菌肥在农业生产中的应用奠定一定技术基础。
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公开(公告)号：CN104541969B
公开(公告)日：2018-05-01
申请号：CN201410845464.2
申请日：2014-12-31
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明属于食用菌栽培技术领域，具体涉及一种双孢蘑菇生长菌剂及利用该菌剂的双胞蘑菇的栽培方法。该菌剂中有效成分为能够产生ACC脱氨酶的微生物。双孢蘑菇栽培方法，包括制种、培养料制作、播种、发菌、覆土、出菇、采收等步骤。本发明通过对于双孢蘑菇覆土出菇机理的研究，研制了一种双孢蘑菇生长菌剂，并利用这种双孢蘑菇生长菌剂提出了一种新的双孢蘑菇栽培技术，在该技术中，通过对于覆土材料的选择替代，通过以添加有ACC脱氨酶的蛭石替代现有的土壤，既可提前出菇，同时具有无病虫害污染、产量高的优点，而且由于蛭石本身具有改良土壤结构的有益效果，因而本发明具有较好的推广应用价值。
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公开(公告)号：CN104651389B
公开(公告)日：2017-06-06
申请号：CN201410832003.1
申请日：2014-12-29
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/80
Abstract: 本发明涉及一种脂质体介导转化双孢蘑菇菌褶的方法，具体为：1）采摘菌褶未破的幼嫩蘑菇子实体，清洁表面后，收集菌褶组织并切成块；2）将脂质体和质粒混匀，于‑5－5℃放置15－60 min；3）将步骤2）产物用无菌超纯水稀释1000倍，与菌褶组织块混匀，室温放置80－120 min；4）将步骤3）所得产物加入到RCM固体培养基中，室温培养8－12d；5）将萌发的双孢蘑菇菌褶组织块转移到含潮霉素的PDA平板上，室温培养10－20d；6）切下新生长的菌丝块移植到PDA斜面培养，传代培养2－5次，再转接到含潮霉素的PDA平板上，能够正常生长的即为转化子。该方法具有操作简便、转化率高、转化子稳定等优点。
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