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公开(公告)号：CN118531031A
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202410753434.2
申请日：2024-06-12
IPC: C12N15/70 , C12N15/90 , C07K14/195 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/31 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及体外基因编辑的方法，特别是指单链DNA结合蛋白介导的体外CRISPR/Cas9基因编辑方法及其应用。本申请将靶向质粒中大肠杆菌lacZ基因的CRISPR‑Cas9核蛋白（Ribonucleoproteins，RNP）和大肠杆菌SSB与质粒一起孵育，添加或不添加同源重组片段，采用定量PCR检测发生同源重组和非同源重组基因编辑的质粒数量，检测大肠杆菌SSB能否在体外催化同源重组和非同源重组修复RNP介导的DSB，实现体外基因编辑。
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公开(公告)号：CN111690644B
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202010541603.8
申请日：2020-06-15
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本申请属于双孢蘑菇基因工程技术领域，具体涉及一个双孢蘑菇血红素双加氧酶及其应用专利申请事宜。利用已知的真菌血红素双加氧酶的氨基酸序列，通过与双孢蘑菇基因组序列比对，本申请获得了一个双孢蘑菇的血红素双加氧酶，该酶具有CYP域，与构巢曲霉的PpoC的氨基酸序列同源性为33%，相似性为51%，但该酶的CYP域和PpoC一样，不含有完整的P450特征的共有序列血红素保守结合区，推测该酶的CYP域也可能没有功能，将其命名为AbDOX‑(CYP)。进一步对该基因的克隆及大肠杆菌转化表达表明，该酶能够催化亚油酸合成1‑辛烯‑3‑醇。基于此证据，可为1‑辛烯‑3‑醇的进一步产业化生产改进奠定良好的技术基础。
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公开(公告)号：CN115976086A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202310057628.4
申请日：2023-01-19
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及基因编辑，特别是指一种细菌CRISPR‑Cas9基因编辑的方法和应用。采用同时表达大肠杆菌单链DNA结合蛋白（Single‑stranded DNA‑binding protein，SSB）同源重组修复或非同源重组修复DSB，提高CRISPR/Cas编辑PGPR菌株假单胞菌UW4的基因编辑的效率，转化率为3.3×106 CFU/μg质粒DNA，基因编辑效率为100%。
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公开(公告)号：CN110669118B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN201911054068.7
申请日：2019-10-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K14/375 , C12N15/10 , C12N15/80
Abstract: 本申请属于植物基因组技术领域，具体涉及一个双孢蘑菇基因组中的乙烯蛋白受体。本申请属于植物基因组技术领域，具体涉及一个双孢蘑菇基因组中的乙烯蛋白受体。基于结构对比结果，发明人推测Ab201390为双孢蘑菇中的乙烯受体蛋白（AbEBD1），可以结合乙烯。进一步实际验证后发现，该蛋白具有乙烯结合作用，但其结合能力明显弱于拟南芥乙烯受体ETR1。但基于这一研究结果，通过基因工程技术手段，仍然可为双孢蘑菇新品种培育、或者双孢蘑菇保鲜等技术改进奠定一定技术基础。
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公开(公告)号：CN110627884B
公开(公告)日：2022-06-14
申请号：CN201911052826.1
申请日：2019-10-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K14/375 , C12N15/31 , C12N15/10 , A01H15/00
Abstract: 本申请属于植物基因组技术领域，具体涉及一个双孢蘑菇基因组中的乙烯蛋白受体Ab143539。其结构中共有5个跨膜区，在第3跨膜区含有一个半胱氨酸残基，具体碱基序列如SEQ ID NO.1所示。基于结构对比结果，发明人推测Ab143539为双孢蘑菇中的乙烯受体蛋白（AbEBD2），可以结合乙烯。进一步实际验证后发现，该蛋白具有乙烯结合作用，但其结合能力明显弱于拟南芥乙烯受体ETR1。但基于这一研究结果，通过基因工程技术手段，仍然可为双孢蘑菇新品种培育、或者双孢蘑菇保鲜等技术改进奠定一定技术基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105103961A
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201510580535.5
申请日：2015-09-14
Applicant: 河南农业大学
IPC: A01G1/04
CPC classification number: A01G18/00
Abstract: 本发明涉及一种利用甲基化抑制剂提高食用菌产量的方法，其包括如下步骤：1）制备母种：将PDA培养基加热融化，然后冷却至45－50℃，加入5-氮杂胞苷（5-AC）溶液至其终浓度为10－100μmol/l，混匀后倒平板，平板凝固后接入平菇天达300菌种，25±3℃培养至菌丝发满平板，获得母种；2）制备栽培种：将母种接入装有麦粒培养基的培养瓶中，25±3℃培养至菌丝发满瓶；3）将栽培培养基装袋，每袋重750g，120－125℃灭菌1－2h，然后每袋接入栽培种22±5g，常规管理出菇和采收。该方法用5-AC处理丝状真菌，可激活沉默的生物合成基因，诱导真菌产生未知的代谢产物，提高菌丝的生物活性，从而显著提高了食用菌的产量。
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公开(公告)号：CN110669118A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201911054068.7
申请日：2019-10-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K14/375 , C12N15/10 , C12N15/80
Abstract: 本申请属于植物基因组技术领域，具体涉及一个双孢蘑菇基因组中的乙烯蛋白受体。本申请属于植物基因组技术领域，具体涉及一个双孢蘑菇基因组中的乙烯蛋白受体。基于结构对比结果，发明人推测Ab201390为双孢蘑菇中的乙烯受体蛋白（AbEBD1），可以结合乙烯。进一步实际验证后发现，该蛋白具有乙烯结合作用，但其结合能力明显弱于拟南芥乙烯受体ETR1。但基于这一研究结果，通过基因工程技术手段，仍然可为双孢蘑菇新品种培育、或者双孢蘑菇保鲜等技术改进奠定一定技术基础。
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公开(公告)号：CN107646675A
公开(公告)日：2018-02-02
申请号：CN201710811023.4
申请日：2017-09-11
Applicant: 河南农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种缓解作物连作障碍的方法，其在培养瓶中加入MS培养液，将培养好的幼苗移植至培养瓶中，于25－28℃、光照16 h/黑暗8 h，震荡培养5－10d；然后将幼苗用无菌水漂洗，移植于含抑制剂的MS培养液中培养2－5d即可；所述抑制剂的浓度为10－200 μM。所述抑制剂为格列本脲，硝苯地平或维拉帕米。本发明方法用三种抗性赋予蛋白活性抑制剂格列本脲、硝苯地平和维拉帕米处理黄瓜苗，经试验验证，可显著降低其根系分泌物对黄瓜种子萌发及之后幼苗下胚根伸长的抑制作用，具有明显的缓解黄瓜连作障碍的效果。
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公开(公告)号：CN105103961B
公开(公告)日：2017-10-13
申请号：CN201510580535.5
申请日：2015-09-14
Applicant: 河南农业大学
IPC: A01G1/04
Abstract: 本发明涉及一种利用甲基化抑制剂提高食用菌产量的方法，其包括如下步骤：1）制备母种：将PDA培养基加热融化，然后冷却至45－50℃，加入5‑氮杂胞苷（5‑AC）溶液至其终浓度为10－100μmol/l，混匀后倒平板，平板凝固后接入平菇天达300菌种，25±3℃培养至菌丝发满平板，获得母种；2）制备栽培种：将母种接入装有麦粒培养基的培养瓶中，25±3℃培养至菌丝发满瓶；3）将栽培培养基装袋，每袋重750g，120－125℃灭菌1－2h，然后每袋接入栽培种22±5g，常规管理出菇和采收。该方法用5‑AC处理丝状真菌，可激活沉默的生物合成基因，诱导真菌产生未知的代谢产物，提高菌丝的生物活性，从而显著提高了食用菌的产量。
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公开(公告)号：CN106258481A
公开(公告)日：2017-01-04
申请号：CN201610635809.0
申请日：2016-08-05
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种秸秆揉丝处理栽培食用菌的方法，其在制备栽培种、以及栽培时培养料中选用的秸秆为揉丝小麦秸秆或揉丝玉米秸秆；具体为：1）将食用菌菌丝块接入PDA培养基平板中，培养至菌丝发满平板，获得母种；2）将培养料装入试管中，每管装200g，120～125℃灭菌1～2h，然后接入步骤1）所得母种，培养至菌丝发满管，获得栽培种；3）将培养料装袋，每袋装500g，120～125℃灭菌1～2h，然后接入步骤2）所得栽培种，常规管理出菇和采收。该方法可以显著提高菌丝生长速度、以及前二潮菇产量。
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