公开(公告)号：CN102978233B

公开(公告)日：2014-01-22

申请号：CN201210462778.5

申请日：2012-11-16

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 邱立友 ,  孙强 ,  崔继红 ,  柴冉 ,  高玉千 ,  戚元成 ,  申进文

IPC: C12N15/80 ,  C12R1/845

Abstract: 本发明涉及一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法，其包括以下步骤：一）黑根霉菌丝脂质体转化：1）将幼嫩黑根霉湿菌丝与甘露醇水溶液混合后研磨，得菌悬液，备用；2）将脂质体2000与质粒pEGFP-C1混匀，于-5－5℃放置15－60min，然后转入到菌悬液中，混匀，于-5－5℃放置15－60min；3）将步骤2）所得混合液涂抹PDA平板，25－30℃培养1－5天；二）传代培养：4）挑取步骤3）经荧光显微镜检测带有荧光的转化子接种于PDA平板上25－30℃培养1－5天，共传代培养5－8次。该方法简便、快捷、转化率高、转化子遗传稳定，不需要制备原生质体，不需要复杂装置。

公开(公告)号：CN102978233A

公开(公告)日：2013-03-20

申请号：CN201210462778.5

申请日：2012-11-16

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 邱立友 ,  孙强 ,  崔继红 ,  柴冉 ,  高玉千 ,  戚元成 ,  申进文

IPC: C12N15/80 ,  C12R1/845

Abstract: 本发明涉及一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法，其包括以下步骤：一）黑根霉菌丝脂质体转化：1）将幼嫩黑根霉湿菌丝与甘露醇水溶液混合后研磨，得菌悬液，备用；2）将脂质体2000与质粒pEGFP-C1混匀，于-5－5℃放置15－60min，然后转入到菌悬液中，混匀，于-5－5℃放置15－60min；3）将步骤2）所得混合液涂抹PDA平板，25－30℃培养1－5天；二）传代培养：4）挑取步骤3）经荧光显微镜检测带有荧光的转化子接种于PDA平板上25－30℃培养1－5天，共传代培养5－8次。该方法简便、快捷、转化率高、转化子遗传稳定，不需要制备原生质体，不需要复杂装置。