公开(公告)号：CN110897917B

公开(公告)日：2023-09-15

申请号：CN201911412675.6

申请日：2019-12-31

Applicant: 河南安进生物技术股份有限公司 ,  河南农业大学 ,  河南应用技术职业学院

Inventor： 岳治光 ,  赵聪 ,  宁晓冬 ,  黄斌斌 ,  许新春 ,  菅复春 ,  张素梅 ,  王荣军 ,  张龙现 ,  宁长申

IPC: A61K8/34 ,  A61K8/44 ,  A61K8/49 ,  A61K8/81 ,  A61K8/86 ,  A61Q17/02

Abstract: 本发明涉及一种驱蚊酯长效驱避剂，由以下重量百分比的原料组成：驱蚊酯5‑20%，聚乙烯吡咯烷酮5‑20%，无水乙醇15‑40%，聚乙二醇‑400 5‑20%，α‑吡咯烷酮10‑30%，其余为去离子水；其制备方法包括以下步骤：a、配方量的聚乙烯吡咯烷酮和无水乙醇加入搅拌器混合，得到混合液a；b、将熔融状态的α‑吡咯烷酮缓缓倒入混合液a中，得到混合液b；c、向混合液b中加入配方量的聚乙二醇‑400，得到混合液c；d、向混合液c加入配方量的驱蚊酯，并加入去离子水至全量，得到最终产品。本发明的目的在于解决目前蚊虫驱避剂直接涂抹与皮肤表面，施药时费时费力并且容易出现过敏现象的问题，提供一种驱蚊酯长效驱避剂及其制备方法。

公开(公告)号：CN109913566A

公开(公告)日：2019-06-21

申请号：CN201910312325.6

申请日：2019-04-18

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 宁长申 ,  彭永帅 ,  赵姗姗 ,  王坤轮 ,  宁晓冬 ,  闫亚群 ,  史柯 ,  菅复春 ,  张龙现 ,  王荣军 ,  张素梅

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种同时检测四种无浆体的多重PCR专用引物和四重PCR检测方法，牛无浆体专用引物扩增产物大小为529 bp，山羊无浆体专用引物扩增产物大小为874 bp，绵羊无浆体专用引物扩增产物大小为347 bp，嗜吞噬细胞无浆体专用引物扩增产物大小为172 bp。四重PCR反应体系为：LA Taq DNA Polymeras 0.25μL，10×LA Buffer 2.5μL，dNTP Mixture 4.0μL，四个引物对各0.4μL，DNA模板2.0μL，灭菌去离子水补足至25μL；四重PCR反应条件为：94℃预变性5 min，94℃变性30 s，63℃退火30s，72℃延伸1 min，运行40个循环，72℃延伸10 min；该方法有着检测速度快，敏感性高，特异性强、高效、低成本等优点，适于四种病原所引起疾病的流行病学调查和临床确诊。

公开(公告)号：CN105154557A

公开(公告)日：2015-12-16

申请号：CN201510605844.3

申请日：2015-09-22

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 宁长申 ,  崔艳艳 ,  张艳 ,  菅复春 ,  张龙现 ,  王荣军 ,  曹树轩 ,  王晓星 ,  闫亚群

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

CPC classification number: C12Q1/686 ,  C12Q1/6893 ,  C12Q2600/16 ,  C12Q2537/143 ,  C12Q2565/125

Abstract: 本发明涉及一种检测羊泰勒虫和无浆体的双重PCR方法，包括以下步骤： 根据羊泰勒虫18S rRNA基因序列，找到基因保守序列靶基因位点，设计了特异性引物序列I，根据羊无浆体16S rRNA基因序列，找到基因保守序列为靶基因位点，设计了特异性引物序列II；将特异性引物序列I的上、下游引物和特异性引物序列II的上、下游引物及PCR混合液加入PCR反应管中，混合后加入待测血液样品中提取出来的羊泰勒虫DNA及羊无浆体DNA；将PCR管置于PCR扩增仪中进行循环；取PCR产物于2%琼脂糖凝胶上电泳。该法以具有快速、特异、灵敏、高效、低成本等特点，便于临床应用。

公开(公告)号：CN118845729A

公开(公告)日：2024-10-29

申请号：CN202410739293.9

申请日：2024-06-07

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 李俊强 ,  张营营 ,  张素梅 ,  侯文燕 ,  许会艳 ,  张龙现 ,  孙嵩英 ,  赵文超 ,  吴龙飞 ,  陈心怡

IPC: A61K31/12 ,  A61P33/02 ,  A61P29/00 ,  A61P39/06 ,  A61K36/484

Abstract: 本发明公开了一种抗贾第虫病的药物及其应用，属于抗寄生虫感染药物领域。一种抗贾第虫病的药物，所述药物的有效成分为甘草查尔酮A；本发明通过体内外试验发现，甘草查尔酮A在体外影响细胞结构，损伤细胞骨架，导致滋养体功能异常，从而造成贾第虫死亡。甘草查尔酮A在体内能够缓解贾第虫感染造成的体重减轻程度、降低肠道荷虫量、提高脏器指数、保护肠道完整性、减轻肠道病理损伤、提高机体抗炎能力和提高肝脏抗氧化能力。相比于化学药物，甘草查尔酮A安全无毒，可以安全有效地治疗贾第虫病。

公开(公告)号：CN118389723A

公开(公告)日：2024-07-26

申请号：CN202311054110.1

申请日：2023-08-21

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 张龙现 ,  秦子扬 ,  李俊强 ,  王荣军 ,  王艺林 ,  许会艳 ,  张素梅 ,  李晓迎 ,  赵金凤

IPC: C12Q1/6893 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/113 ,  C12N15/11 ,  C12R1/90

Abstract: 本发明基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测环孢子虫的试剂盒及检测方法属于寄生虫检测技术领域，本发明提供了基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测环孢子虫的靶标位点为线粒体基因组中的Cox3基因位点，所述靶标序列为环孢子虫DNA基因（KP658101的反向互补链）的第1540bp～第1563bp位点的核苷酸序列；所述第1540bp～第1563bp位点的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。同时本发明还提供了基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测环孢子虫的试剂盒，包括权利要求2所述上下游引物对及RPA扩增体系的TwistAmpTM Basic Kit试剂盒及试剂、权利要求3所述的crRNA及CRISPR/Cas12a荧光检测反应体系的试剂及CRISPR/Cas12a试纸条检测反应体系的试剂。

公开(公告)号：CN118360237A

公开(公告)日：2024-07-19

申请号：CN202410411251.2

申请日：2024-04-07

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 菅复春 ,  李静 ,  李森阳 ,  菅忆晨 ,  张素梅 ,  张龙现 ,  孟庆大

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种鸡小肠类器官的培养基及培养方法，涉及类器官培养技术领域，该培养基主要包括：L‑WNR条件培养基、基础培养基、Wnt通路激活剂R‑Spondin‑1、BMP受体抑制剂Noggin、ROCK抑制剂Y‑27632、p38MAPK抑制剂SB 202190、TGF‑β受体I型(TGF‑βRI)激酶抑制剂LY2157299、Laduviglusib(具有口服活性的GSK‑3α/β抑制剂和Wnt/β‑catenin信号通路激活剂)和Notch信号激活剂Jagged‑1，以及其他特异性添加因子，该方法采用多种抗生素对小肠组织进行清洗，使用EDTA进行消化和涡旋振荡仪来分离小肠中的绒毛和隐窝，获得大量干净且密度高的肠隐窝细胞，大大提高了鸡小肠类器官样本的培养成功率，并减少污染。结合类器官的传代、冻存技术可以在有限时间内获得充足的类器官开展科学研究。

公开(公告)号：CN107881221B

公开(公告)日：2021-03-02

申请号：CN201711487999.7

申请日：2017-12-29

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 菅复春 ,  刘珍珍 ,  胡苏辉 ,  宁晓东 ,  王荣军 ,  张龙现 ,  宁长申

IPC: C12Q1/6848 ,  C12Q1/6893

Abstract: 本发明公开了一种基于Lectin基因对部分隐孢子虫种类的分子鉴定方法，具体步骤如下：（1）基于SSU rRNA基因对待测样品进行巢式PCR扩增，测序比对，确定待测样品是否为隐孢子虫阳性，以及属于哪一种隐孢子虫种；（2）若待测样品属于C.parvum、C.hominis、C.cuniculus、horse genotype或驴源C.hominis中的一种，则基于Lectin基因对同种隐孢子虫不同分离株的待测样品进行巢式PCR扩增，测序比对，通过待测样品的Lectin基因位点上的连续的CAA三联密码子的个数确定待测样品是否为同种隐孢子虫不同分离株。本发明经序列比对及进化树结果表明，Lectin基因作隐孢子虫鉴定工具用于SSU rRNA序列相近隐孢子虫种的鉴定有更好的区分度，可望为隐孢子虫的分子流行病学、群体遗传分析增添新的分子工具。

公开(公告)号：CN105907751A

公开(公告)日：2016-08-31

申请号：CN201610509281.2

申请日：2016-06-27

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 王荣军 ,  张振杰 ,  张龙现 ,  张素梅 ,  王海燕 ,  菅复春 ,  宁长申 ,  胡苏辉

IPC: C12N15/10

CPC classification number: C12N15/1006 ,  C12Q2523/308

Abstract: 本发明属于分子生物学领域，涉及一种基于FTA卡提取DNA的方法，具体涉及一种基于FTA卡从粪便中提取隐孢子虫卵囊DNA的方法。提取步骤如下：收集经隐孢子虫卵囊感染成功后的犊牛粪便，获得隐孢子虫卵囊，定量污染粪便；将奶牛粪便涂抹于FTA卡上，常温晾干FTA卡，打孔获得FTA圆片；将获得的FTA圆片分别放入离心管内，去污并清洗，加入FTA卡清洗液，室温孵育后加入1×TE溶液，室温孵育，将清洗后的FTA圆片完全干燥，完成粪便中隐孢子虫卵囊DNA的提取。本发明只需携带FTA卡到养殖场采集粪便样本，经FTA洗脱液和其他有机溶液清洗后，可将FTA卡片用作DNA模板进行PCR扩增，成本低廉，方便快捷。

公开(公告)号：CN103695538B

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201310656319.5

申请日：2013-12-05

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 宁长申 ,  王金鸿 ,  菅复春 ,  吕亚莉 ,  张龙现 ,  王荣军 ,  张艳 ,  韩琼琼 ,  张文静

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 采用LAMP技术检测嗜吞噬细胞无浆体方法，该检测方法包括LAMP引物设计、LAMP反应体系建立以及采用LAMP检测方法，所述的LAMP检测方法是采用特异性检测、敏感性检测和荧光可视化检测。该法以嗜吞噬细胞无浆体16 S rRNA为靶基因位点，具有快速、灵敏、高效、低成本等特点。

公开(公告)号：CN104152550A

公开(公告)日：2014-11-19

申请号：CN201410332786.7

申请日：2014-07-14

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 宁长申 ,  王金鸿 ,  吕亚莉 ,  菅复春 ,  张龙现 ,  王荣军 ,  张艳 ,  张文静 ,  曹树轩

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2563/107

Abstract: 采用LAMP技术检测牛无浆体方法，该检测方法包括LAMP引物设计、LAMP反应体系建立以及采用LAMP检测方法，所述的LAMP检测方法是采用特异性检测、敏感性检测和荧光可视化检测，所述的LAMP引物设计利用PrimerExplorerV4软件针对牛无浆体16SrRNA基因的6个位点设计4条LAMP引物，引物包括两条外引物F3和B3、两条内引物FIP和BIP，其中：F3：GGGCATGTAGGTGGTTTGG；B3：GCGTGGACTACCAGGGTAT；FIP：TCTCCCGGACTCCAGTCTGGTAAAGGTGAAATGCCAGGGC；BIP：ATTAGGAGGAACACCAGTGGCGCACGCTTTCGCACCTCAG。该法以牛无浆体16SrRNA为靶基因位点，具有快速、灵敏、高效、低成本等特点，为牛无浆体病的病原检测提供新的技术方法。