重组人生长激素及其真核系统表达方法

    公开(公告)号:CN111041033B

    公开(公告)日:2022-04-05

    申请号:CN201811186317.3

    申请日:2018-10-12

    Inventor: 马永 范宇 王安良

    Abstract: 本发明涉及一种重组人生长激素及其真核系统表达方法,尤其涉及一种针对毕赤酵母表达系统进行了基因优化的重组人生长激素编码基因序列,该序列更利于hGH在毕赤酵母中表达;同时,在所述基因序列前依次有专为hGH在毕赤酵母中表达所设计的间隔短肽序列及信号肽序列。本发明通过对hGH基因、信号肽和间隔短肽的优化使得在毕赤酵母中表达的hGH比优化前表达量有明显提高,所述信号肽和短肽在设计和使用时可以加在载体上也可以加在目的蛋白的核苷酸序列上;同时制备得到的hGH原蛋白活性与市售商品相比具有一致的生物学活性,从而使本发明的hGH具有了产业化的应用前景。

    一种重组黄花蒿1类变应原蛋白及其应用

    公开(公告)号:CN108265065B

    公开(公告)日:2021-04-27

    申请号:CN201711379683.6

    申请日:2017-12-20

    Inventor: 马永 王安良 王俊

    Abstract: 本发明涉及一种哺乳动物细胞表达的黄花蒿主要致敏蛋白Art a1,编码基因、表达方式、纯化工艺,以及重组蛋白检测方法和应用。黄花蒿致敏蛋白本身属于植物蛋白,在现有常用的原核或真核表达系统中表达都有一定困难,也并见相关文献公开;而传统的提取方式常存在着成分复杂、质量难以控制、易受到外源性有毒物质、病原体微生物的污染等问题。为此,本发明提供了如SEQ ID NO:1所示的重组Art a1的编码基因,以及专为此设计的表达、纯化、重组蛋白检测方法及应用,与现有技术相比,本发明的重组Art a1具有较高的表达量及活性,同时也为该药品开发过程中细胞株开发、工艺优化、临床前和临床研究以及工业化生产建立了基础。

    毕赤酵母表达重组蛋白的载体、基因、方法及应用

    公开(公告)号:CN105802989B

    公开(公告)日:2020-05-19

    申请号:CN201410854294.4

    申请日:2014-12-31

    Abstract: 本发明公开了一种在毕赤酵母中表达重组蛋白的载体、基因及表达方法,尤其适用于对人组织激肽释放酶的重组表达。本发明的载体上含有编码间隔短肽的核苷酸序列,所述的间隔短肽的氨基酸序列为1‑10个EA或EEAEAEAEPK,同时,上述所述载体在间隔短肽核苷酸序列5,端连接有信号肽核苷酸序列。这使得在毕赤酵母中表达的目的基因比原来不加入间隔短肽时表达量提高,所述信号肽和间隔短肽在设计和使用时可以加在载体上,也可以加在目的蛋白的核苷酸序列上;同时在间隔短肽后再增加前肽使得所表达的hK1的N端结构与天然hK1一致,且目的蛋白经毕赤酵母系统表达后具有较高的生物学活性。

    一种药用级重组人激肽原酶产业化生产方法

    公开(公告)号:CN106929496B

    公开(公告)日:2020-05-12

    申请号:CN201611128101.2

    申请日:2016-12-09

    Inventor: 马永 王安良 范宇

    Abstract: 本发明涉及一种表达重组人激肽原酶‑1的重组菌株及其发酵和纯化工艺,以及一种针对上述重组菌株优化的BSM发酵培养基。本发明的发酵工艺诱导剂甲醇的添加量较低,发酵液中目的蛋白产量高且易于纯化,获得的激肽原酶主要是低糖基化产物,免疫原性低并便于药物质量控制;与已有激肽原酶发酵技术相比,克服了发酵体系中甲醇加入量过大,制备的激肽原酶活性较低,糖基化修饰较高等缺陷。除此之外,与现有激肽原酶发酵技术相比,发酵时间明显缩短,有效降低了生产成本,活性、产量均有50%以上的提高。

    一种重组胱抑素C蛋白及其在检测试剂盒中的应用

    公开(公告)号:CN109975552A

    公开(公告)日:2019-07-05

    申请号:CN201711454926.8

    申请日:2017-12-28

    Abstract: 本发明涉及一种重组胱抑素C蛋白(rhCysC)及其在检测血清中胱抑素C(CysC)检测试剂盒中的应用,属于医学免疫体外诊断领域。本发明提供了专为大肠杆菌表达系统进行密码子优化得到的编码rhCysC的基因序列,序列如SEQ ID NO:2所示。通过转入该序列能够显著提高异源基因在宿主菌中的表达效率。本发明rhCysC的重组表达方法具有周期短、表达量大、成本低的特点,且通过该方法制备出的rhCysC可以作为一种有效的免疫原,用于兔多抗的制备,并将该种多抗用于胶乳增强免疫比浊检测试剂盒的制备中,能够准确检测出血清中CysC含量,与市售产品相比,具有更好的重复性和更高的准确度,显现出较好的临床应用前景。

    抗人β2-微球蛋白抗体及其应用

    公开(公告)号:CN109666072A

    公开(公告)日:2019-04-23

    申请号:CN201811616641.4

    申请日:2018-12-28

    Abstract: 本发明涉及新型的抗人β2-微球蛋白抗体及其应用,属于免疫化学领域。本发明制备了多种抗体,并进行配对筛选,获得灵敏度及特异性均能满足需求的抗体组合(BM12及BM17);同时其方便大量生产,可满足日后大规模临床应用的需求。对上述抗体组合进行检测体系的调试优化工作,获得操作简便,灵敏度,特异性及相关检测性能可满足人临床样本检测的人β2-微球蛋白的胶体金快速检测试纸卡的产业化应用。

    抗人C-反应蛋白抗体及其应用

    公开(公告)号:CN105949309B

    公开(公告)日:2019-03-29

    申请号:CN201610225905.8

    申请日:2016-04-12

    Abstract: 本发明涉及抗人C‑反应蛋白抗体及其应用。本发明制备了多种抗体,并进行配对筛选,获得灵敏度及特异性均能满足需求的抗体组合(P24及P03);同时其方便大量生产,可满足日后大规模临床应用的需求。对上述抗体组合进行检测体系的调试优化工作,获得操作简便,灵敏度,特异性及相关检测性能可满足人临床样本检测的人C‑反应蛋白的时间分辨免疫荧光层析定量检测卡。

    一种重组黄花蒿3类变应原蛋白及其应用

    公开(公告)号:CN108265064A

    公开(公告)日:2018-07-10

    申请号:CN201711379640.8

    申请日:2017-12-20

    Inventor: 马永 王安良 王俊

    Abstract: 本发明涉及一种哺乳动物细胞表达的黄花蒿主要致敏蛋白Art a3,编码基因、表达方式、纯化工艺,以及重组蛋白检测方法和应用。黄花蒿致敏蛋白本身属于植物蛋白,在现有常用的原核或真核表达系统中表达都有一定困难,也并未见相关文献公开;而传统的提取方式常存在着成分复杂、质量难以控制、易受到外源性有毒物质、病原体微生物的污染等问题。为此,本发明提供了如SEQ ID NO:1所示的重组Art a3的编码基因,以及专为此设计的表达、纯化、重组蛋白检测方法及应用,与现有技术相比,本发明的重组Art a3具有较高的表达量及活性,同时也为该药品开发过程中细胞株开发、工艺优化、临床前和临床研究以及工业化生产建立了基础。

Patent Agency Ranking