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公开(公告)号：CN114774343A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210571832.3
申请日：2022-05-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产2’‑岩藻糖基乳糖的大肠杆菌工程菌株及应用，属于合成生物学、微生物代谢工程技术和发酵工程技术等领域。本发明提供的2’‑岩藻糖基乳糖从头合成途径关键酶表达水平的调控策略，通过CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除大肠杆菌中与底物降解以及中间产物分流相关的一系列基因，同时将不同的酶分别进行基因组过表达或者质粒过表达的调控，能够大幅提高代谢通路的效率，利用相关策略构建的基因工程菌株使得到的大肠杆菌工程菌株在3‑L发酵罐条件下以甘油为碳源，乳糖为底物发酵95h可生产57.7g/L的2′‑FL，对于工业化生产2′‑FL具有重要意义。
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公开(公告)号：CN117487728A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202311327641.3
申请日：2023-10-13
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/56 , C12N15/60 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12P19/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种高效生产2'‑岩藻糖基乳糖的大肠杆菌工程菌株的应用，属于合成生物学、微生物代谢工程技术和发酵工程技术等领域。本发明提供了2'‑岩藻糖基乳糖从头合成途径关键酶表达水平的调控策略，敲除大肠杆菌中与底物降解以及中间产物分流相关的一系列基因，同时将不同的酶分别进行基因组过表达或者质粒过表达的调控，优化RBS，大幅提高代谢通路的效率，利用相关策略构建的重组菌株株使得到的大肠杆菌工程菌株在3‑L发酵罐条件下，以甘油为碳源生产125g/L的2'‑FL，以葡萄糖为碳源生产115g/L的2'‑FL，对于工业化生产2'‑FL具有重要意义。
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公开(公告)号：CN114774343B
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202210571832.3
申请日：2022-05-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产2’‑岩藻糖基乳糖的大肠杆菌工程菌株及应用，属于合成生物学、微生物代谢工程技术和发酵工程技术等领域。本发明提供的2’‑岩藻糖基乳糖从头合成途径关键酶表达水平的调控策略，通过CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除大肠杆菌中与底物降解以及中间产物分流相关的一系列基因，同时将不同的酶分别进行基因组过表达或者质粒过表达的调控，能够大幅提高代谢通路的效率，利用相关策略构建的基因工程菌株使得到的大肠杆菌工程菌株在3‑L发酵罐条件下以甘油为碳源，乳糖为底物发酵95h可生产57.7g/L的2′‑FL，对于工业化生产2′‑FL具有重要意义。
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公开(公告)号：CN119899788A
公开(公告)日：2025-04-29
申请号：CN202510074360.4
申请日：2025-01-17
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/54 , C12N15/61 , C12P19/26 , C12N9/10 , C12N9/90 , C12N9/12 , C12N9/92 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种无外源添加乳糖生产乳酰‑N‑新四糖的基因工程菌株及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过逐步优化LNnT生物合成途径，获得了一个具有高LNnT产量和无需外源添加乳糖的工程菌株。本发明应用模块化途径工程将LNnT合成途径分为四个模块，并通过简单地改变每个模块的质粒拷贝数，系统地优化这四个途径之间的代谢平衡。此外，通过优化葡萄糖的转运途径，维持代谢通路平衡性，避免了细胞资源的浪费和中间体的过度积累，进一步平衡了LNnT生物合成途径的代谢通量。最终，该菌株产生了26.9g/L的LNnT。
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