一种具有Fc免疫活性的EGFR×HER2双特异性纳米抗体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN115819606A

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202210855672.5

    申请日:2022-07-19

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种具有Fc免疫活性的EGFR×HER2双特异性纳米抗体及其制备方法与应用,为修饰有鼠李糖衍生物的EGFR×HER2双特异性纳米抗体。制备步骤如下:1)化学合成含Rha基团的衍生物;2)构建EGFR×HER2双特异性纳米抗体表达菌株,发酵纯化获得EGFR×HER2双特异性纳米抗体;3)采用酶连手段对双特异性纳米进行Rha衍生物修饰,获得具有Fc免疫活性的EGFR×HER2双特异性纳米抗体。Fc免疫活性包括Fc介导的ADCC、ADCP和CDC作用及Fc介导的半衰期延长作用。本发明具备更低的脱靶风险和显著提升的抗肿瘤活性,可应用于EGFR和HER2双阳的鳞状细胞癌、乳腺癌、结直肠癌、肺癌等恶性肿瘤的治疗。

    一类基于ZZ domain的广谱二抗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110078832A

    公开(公告)日:2019-08-02

    申请号:CN201910314766.X

    申请日:2019-04-18

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一类基于ZZ domain的广谱二抗及其制备方法和应用,属于抗体技术领域。该广谱二抗,具备两种功能域,分别行使结合IgG抗体的功能和报告基团功能;其中,行使结合IgG抗体功能的域,为衍生于金黄色葡萄球菌Protein A的ZZ domain,且可以结合多种来源的IgG;行使报告基团的域,是具备催化功能的酶或具备发光功能的蛋白。具备两种功能域,分别行驶结合IgG抗体(一抗)和报告基团功能。本发明的广谱二抗为融合蛋白,融合表达后其IgG抗体的结合能力和报告基团功能的发挥均不受影响。该广谱二抗可以结合多种物种的IgG一抗,例如可以结合小鼠源、大鼠源、人源、兔源等IgG。

    一种利用毕赤酵母高效分泌表达转肽酶SortaseA的方法

    公开(公告)号:CN105754885A

    公开(公告)日:2016-07-13

    申请号:CN201610308645.0

    申请日:2016-05-11

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12N1/19 C12N9/52 C12R1/84

    摘要: 本发明公开了一种利用毕赤酵母高效分泌表达转肽酶Sortase A的方法,属于基因工程领域。本发明成功实现了Sortase A在毕赤酵母中的高效分泌表达,解决了目前已有报道中该酶在大肠杆菌胞内表达中存在的产率较低、菌体需要破壁和菌株不稳定的问题。经过表达策略的筛选和发酵条件优化,胞外Sortase A的酶活和浓度分别可达131.9U/mL和97.8mg/L。本发明通过实现Sortase A的高效分泌表达,为该酶的工业化生产及其在蛋白质工程领域的应用打下了基础。

    一种寡糖衍生物与外泌体的偶联物及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN116966320A

    公开(公告)日:2023-10-31

    申请号:CN202310894045.7

    申请日:2023-07-20

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明属于抗肠道感染药物领域,涉及一种寡糖衍生物与外泌体的偶联物及其制备方法及其应用,具体为在产志贺毒素的病原菌感染预防及治疗中的应用。包括步骤:a、带有膜插入功能脂链的能结合志贺毒素的寡糖衍生物的化学酶法合成;b、外泌体的提取以及其与寡糖衍生物的偶联。本发明所述的寡糖衍生物与外泌体偶联物是以外泌体为基础,与寡糖衍生物分子中所带具有膜插入功能的脂链通过疏水作用组合而成,该偶联物具有较高的寡糖衍生物偶联量,能够高效结合志贺毒素使其丧失细胞结合能力,能够显著抑制志贺毒素对于人肠道培养细胞的结合,发挥保护人体肠道细胞免受志贺毒素毒性的作用,具有产志贺毒素病原菌感染预防和治疗应用潜力。

    一种半抗原多价修饰的天然多糖偶联物及其在免疫治疗的应用

    公开(公告)号:CN113304258B

    公开(公告)日:2023-10-13

    申请号:CN202110161043.8

    申请日:2021-02-05

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种半抗原多价修饰的天然多糖及其在免疫治疗的应用,其中所述半抗原结构包括α‑Gal、Rha和DNP,所述天然多糖为对包括肿瘤、细菌、病毒在内的细胞具有靶向性的天然多糖,包括透明质酸。所述天然多糖如透明质酸上至少化学偶联修饰两个半抗原结构如DNP,所得的DNP多价修饰的透明质酸偶联物能够靶向高表达CD44的癌细胞,同时募集体内天然存在的抗DNP抗体,然后通过存在于免疫效应细胞或蛋白质上的Fc受体识别抗体的Fc结构域,激活先天免疫反应消除靶细胞,例如补体依赖性细胞毒性(CDC),抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和抗体依赖性吞噬作用(ADCP)。

    一种基于环糊精接枝壳聚糖的疫苗、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN113995834A

    公开(公告)日:2022-02-01

    申请号:CN202111316793.4

    申请日:2021-11-08

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种基于环糊精接枝壳聚糖(cyclodextrin grafted chitosan,CS‑g‑CD)的疫苗、制备方法及应用,属于生物医学工程领域,抗原分子、免疫刺激剂等通过“主客体”自组装方式与CS‑g‑CD结合形成超分子,并可进一步通过三聚磷酸钠等方法制备为纳米颗粒,作为疫苗药物。本发明提供的环糊精接枝壳聚糖,具有更好的溶解性能,其上修饰的环糊精提供了主客体结合位点,更容易用于与抗原分子的相互作用,形成高稳定性的自组装超分子疫苗制剂,利于更好的体内投递和抗原储存,从而利于提高免疫刺激能力。通过“主客体”自组装方式制备的疫苗制剂可以作为疫苗开发的一个平台,适用于更广泛的疫苗开发。

    一类基于ZZ domain的二抗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110078832B

    公开(公告)日:2021-12-14

    申请号:CN201910314766.X

    申请日:2019-04-18

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一类基于ZZ domain的二抗及其制备方法和应用,属于抗体技术领域。该二抗,具备两种功能域,分别行使结合IgG抗体的功能和报告基团功能;其中,行使结合IgG抗体功能的域,为衍生于金黄色葡萄球菌Protein A的ZZ domain,且可以结合多种来源的IgG;行使报告基团的域,是具备催化功能的酶或具备发光功能的蛋白。具备两种功能域,分别行驶结合IgG抗体(一抗)和报告基团功能。本发明的二抗为融合蛋白,融合表达后其IgG抗体的结合能力和报告基团功能的发挥均不受影响。该二抗可以结合多种物种的IgG一抗,例如可以结合小鼠源、大鼠源、人源、兔源等IgG。

    一种抗体缀合物、增强抗体分子免疫效应功能的方法

    公开(公告)号:CN112618726A

    公开(公告)日:2021-04-09

    申请号:CN202011516850.9

    申请日:2020-12-21

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种抗体缀合物、增强抗体分子免疫效应功能的方法。所述抗体缀合物由抗体分子经半抗原衍生物分子修饰所得,所述半抗原衍生物由半抗原、连接臂和耦合域组成。本发明通过温和简便的方法将半抗原衍生物修饰在抗体分子上,所获得的抗体缀合物不仅保留了原有抗体的优良亲和水平,还可以招募相应的特异性天然抗体至肿瘤细胞上,从而达到显著提高抗体ADCC和CDC等免疫效应功能的目的。最重要的是,本发明还通过对连接臂长度的优化,优化得到了SMCC‑PEG3‑Rha这一半抗原衍生物。相比于其它已报道的抗体分子,SMCC‑PEG3‑Rha修饰的抗体,具备更加突出的免疫效应功能。