一种基于志贺毒素的融合蛋白、交联五聚体蛋白支架及其制备与应用

    公开(公告)号:CN118047880A

    公开(公告)日:2024-05-17

    申请号:CN202410282747.4

    申请日:2024-03-13

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 施杰 朱雅婷

    Abstract: 本发明公开一种基于志贺毒素的融合蛋白、交联五聚体蛋白支架的及其制备与应用,将已报道的可中和病毒的类ACE2肽LCB1与STx1B融合表达,利用STx1B在天然状态下形成五聚体的优势,合成具有多价效应的中和肽,以增强中和新冠病毒的能力;进一步的,由于志贺毒素B亚基五聚体的稳定性受到温度、酸碱性、蛋白浓度等影响,本研究将运用化学交联剂戊二醛固定五聚体结构,显著改善了其稳定性,以此获得具有更强的中和病毒能力的自组装五聚体中和药物。此方法制备简单,成本低且中和病毒效果好。此外,也为改善多聚体蛋白质支架稳定性的研究提供了重要的实验基础。

    一种志贺毒素B亚基与抗原偶联物及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN115724992A

    公开(公告)日:2023-03-03

    申请号:CN202210881315.6

    申请日:2022-07-25

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明属于肿瘤靶向治疗药物领域,具体涉及一种志贺毒素B亚基与抗原偶联物及其制备方法与应用,具体为在肿瘤靶向免疫治疗中的应用。本发明包括步骤:a、志贺毒素B亚基重组蛋白的原核表达和纯化;b、抗体结合分子模块的合成;c、志贺毒素B亚基重组蛋白与抗体结合分子模块的酶法偶联。本发明所述的志贺毒素B亚基与抗体结合分子模块如鼠李糖的偶联物,是一种同源五聚体结构,具有高效的体内抗体结合能力,能够显著抑制体内实体瘤的生长,治疗效果显著。所述志贺毒素B亚基与抗体结合分子模块偶联物合成简单、成本低、稳定性高、靶向性强、抗肿瘤活性高,对肿瘤的精准靶向治疗具有重要意义。

    一种β-葡萄糖醛酸酶响应的糖类衍生物及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN114957356A

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN202210721691.9

    申请日:2022-06-17

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种β‑葡萄糖醛酸酶响应的糖类衍生物及其制备方法与应用,该糖类衍生物以糖前体底物为原料,在糖前体底物上修饰有化学报告基团和β‑葡萄糖醛酸酶响应的化学结构,其中,糖前体底物包括单糖及单糖衍生物、二糖及二糖衍生物中任意一种,化学报告基团用于标记或治疗,β‑葡萄糖醛酸酶响应的化学结构是以β‑糖苷键等作为自断裂连接臂,连接有葡萄糖醛酸/葡萄糖醛酸衍生物。在β‑葡萄糖醛酸酶的催化下,β‑葡萄糖醛酸响应的化学结构可以从该糖类衍生物上断裂,裸露出单糖或二糖或其衍生物上的羟基。本发明糖类衍生物能够被肿瘤细胞大量摄取,并通过糖代谢途经,将非天然的糖代谢在肿瘤细胞表面,从而用于肿瘤的标记和治疗。

    用于检测肿瘤标志物PD-L1的高灵敏度量子点探针、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN113777295A

    公开(公告)日:2021-12-10

    申请号:CN202111083304.5

    申请日:2021-09-15

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测细胞表面肿瘤标志物PD‑L1的量子点荧光探针、制备方法及应用,该探针荧光强度高,提高了相关检测的灵敏度。包括步骤:1)识别PD‑L1的纳米抗体重组蛋白的设计、识别PD‑L1的纳米抗体重组蛋白的原核表达和纯化;2)含有生物素基团多肽的制备;3)识别PD‑L1的纳米抗体重组蛋白与生物素化多肽的体外酶法融合;生物素化的识别PD‑L1的纳米抗体重组蛋白的纯化;4)生物素化的识别PD‑L1的纳米抗体重组蛋白与链酶亲和素标记量子点的偶联探针制备。本发明的探针荧光强度高,结合流式细胞术、免疫荧光、酶联免疫吸附技术能有效检测细胞表面肿瘤标志物PD‑L1的表达,方法简便,检测灵敏度高。

    一种寡糖衍生物与外泌体的偶联物及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN116966320A

    公开(公告)日:2023-10-31

    申请号:CN202310894045.7

    申请日:2023-07-20

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明属于抗肠道感染药物领域,涉及一种寡糖衍生物与外泌体的偶联物及其制备方法及其应用,具体为在产志贺毒素的病原菌感染预防及治疗中的应用。包括步骤:a、带有膜插入功能脂链的能结合志贺毒素的寡糖衍生物的化学酶法合成;b、外泌体的提取以及其与寡糖衍生物的偶联。本发明所述的寡糖衍生物与外泌体偶联物是以外泌体为基础,与寡糖衍生物分子中所带具有膜插入功能的脂链通过疏水作用组合而成,该偶联物具有较高的寡糖衍生物偶联量,能够高效结合志贺毒素使其丧失细胞结合能力,能够显著抑制志贺毒素对于人肠道培养细胞的结合,发挥保护人体肠道细胞免受志贺毒素毒性的作用,具有产志贺毒素病原菌感染预防和治疗应用潜力。

    一种半抗原多价修饰的天然多糖偶联物及其在免疫治疗的应用

    公开(公告)号:CN113304258B

    公开(公告)日:2023-10-13

    申请号:CN202110161043.8

    申请日:2021-02-05

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种半抗原多价修饰的天然多糖及其在免疫治疗的应用,其中所述半抗原结构包括α‑Gal、Rha和DNP,所述天然多糖为对包括肿瘤、细菌、病毒在内的细胞具有靶向性的天然多糖,包括透明质酸。所述天然多糖如透明质酸上至少化学偶联修饰两个半抗原结构如DNP,所得的DNP多价修饰的透明质酸偶联物能够靶向高表达CD44的癌细胞,同时募集体内天然存在的抗DNP抗体,然后通过存在于免疫效应细胞或蛋白质上的Fc受体识别抗体的Fc结构域,激活先天免疫反应消除靶细胞,例如补体依赖性细胞毒性(CDC),抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和抗体依赖性吞噬作用(ADCP)。

    用于检测糖类抗原的基于志贺毒素B亚基重组蛋白的探针、制备方法

    公开(公告)号:CN113087807B

    公开(公告)日:2022-06-17

    申请号:CN202110338813.1

    申请日:2021-03-30

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明属于生物医学及抗原检测技术领域,具体涉及一种检测糖类抗原的基于志贺毒素B亚基重组蛋白的探针、制备方法。本发明包括步骤:a、志贺毒素B亚基重组蛋白的原核表达和纯化;b、含有生物素基团短肽的制备;c、上述重组蛋白与生物素化短肽的体外酶法融合修饰;d、生物素化志贺毒素B亚基重组蛋白与链酶亲和素标记量子点的偶联探针制备。本发明所述的探针,结合流式细胞术能够有效检测多种肿瘤细胞表面糖类抗原尤其如Gb3、Gb4的表达,可以应用于以Gb3、Gb4等糖类抗原为肿瘤标志物的检测和诊断。所述糖类抗原检测方法,制备成本低、检测专一性强、灵敏度高。

    一种快速检测新冠病毒IgG抗体的方法和检测装置

    公开(公告)号:CN114414815A

    公开(公告)日:2022-04-29

    申请号:CN202210064352.8

    申请日:2022-01-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种链霉亲和素磁珠快速检测新冠病毒IgG抗体的方法和检测装置,是基于链霉亲和素磁珠对血清样本中Anti‑RBD IgG的显色检测,包括:S1.新冠病毒重组蛋白RBD‑MSH与生物素化多肽GK‑Biotin偶联,得到生物素化新冠病毒重组蛋白RBD‑MS‑Bio,新冠病毒重组蛋白RBD‑MSH的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示;S2.链霉亲和素磁珠吸附作为探针的生物素化新冠病毒重组蛋白RBD‑MS‑Bio,得到磁珠吸附探针,再加入血清液样本进行孵育,最后加入HRP‑山羊抗人IgG孵育,得待检体系,加入TMB显色液,得到显色结果。本发明大大缩短了检测时间,避免检测人群因采样大规模聚集而造成感染的问题,保证了对新冠病毒抗体检测的准确性和稳定性。

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