用于核移植盲吸法去核体积的度量方法

    公开(公告)号:CN111763692A

    公开(公告)日:2020-10-13

    申请号:CN202010647703.9

    申请日:2020-07-07

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种体细胞核移植受体细胞染色体和胞质精确去除量的计量方法。用于核移植盲吸法去核体积的度量方法,主要包括以下步骤:卵母细胞采集与成熟;准备去核工具;首先将成熟的卵母细胞进行染色,然后用去核针度量去核染色体和第一极体以及周围细胞质的量,进行盲吸法去核;只进行一次紫外观察,观察染色体与第一极体是否去除或者卵母细胞是否还含有染色体,观察到未去核干净的卵母细胞直接丢弃。本发明在核移植盲吸法去核操作中,使操作员能够进行量化去核体积,可对去核进行精确度量,而且减少对卵母细胞染色紫外示核的次数,降低对卵母细胞损伤,提高重构胚后期发育质量,经济实用、操作方便。

    一种人工DNA分子及表达目标基因的方法

    公开(公告)号:CN103834657B

    公开(公告)日:2016-04-13

    申请号:CN201310625428.0

    申请日:2013-11-29

    Abstract: 本发明公开了一种人工DNA分子及表达目标基因的方法。该人工DNA分子的碱基序列为SEQ ID NO.2,能够编码TALE-TF1,所述TALE-TF1能够识别SEQ ID NO.1中的28-48位;或所述人工DNA分子的碱基序列为SEQ ID NO.3,能够编码TALE-TF2,所述TALE-TF2能够识别SEQ ID NO.1中的42-62位;或所述人工DNA分子的碱基序列为SEQ ID NO.4,能够编码TALE-TF3,所述TALE-TF3能够识别SEQ ID NO.1中的56-76位。本发明的人工DNA分子能够激活绵羊成纤维细胞中β-酪蛋白基因启动子,为绵羊乳腺生物反应器的构建提供直接方便的检测技术。

    获取miRNA候选靶基因的方法及其专用反转录引物

    公开(公告)号:CN103194441B

    公开(公告)日:2014-08-27

    申请号:CN201310134586.6

    申请日:2013-04-17

    Abstract: 本发明公开了获取miRNA的候选靶基因的方法及其专用反转录引物。该方法包括:1)以带茎环结构和目的miRNA种子序列的DNA为反转录引物,获取与目的miRNA种子序列互补的mRNA对应的cDNA第一条链,得到A库;2)以带特异接头和14-20个脱氧胸腺嘧啶核苷酸的DNA为反转录引物,获取真核生物目的组织的mRNA对应的cDNA第一条链,得到B库;所述反转录引物B的结构是特异接头-T14-20;3)将所述A库和所述B库合成双链cDNA后进行杂交得到杂交DNA分子,扩增所述杂交DNA分子上所述目的miRNA种子序列和所述特异接头之间的DNA片段,根据所述扩增产物得到目的miRNA的候选靶基因。

    一种HRM检测牛无角基因的方法
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN119932199A

    公开(公告)日:2025-05-06

    申请号:CN202510034900.6

    申请日:2025-01-08

    Abstract: 本发明涉及基因检测技术领域,具体公开了一种HRM检测牛无角基因的方法,设计并合成了一种HRM检测引物,包括一条上游引物和一条下游引物,上游引物核苷酸序列为5’‑TCAAGAAGGCGGCACTATCT‑3’,下游引物核苷酸序列为5’‑TGATAAACTGACCCTCTGCCTATA‑3’,利用该引物配制了一种HRM反应体系并以此进行检测,本发明提出的HRM检测技术与其他传统检测方法相比,操作简便,适合大规模样本的检测,能够有效满足现代养殖业对快速、准确基因检测的需求。

    用于核移植盲吸法去核体积的度量方法

    公开(公告)号:CN111763692B

    公开(公告)日:2023-05-12

    申请号:CN202010647703.9

    申请日:2020-07-07

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种体细胞核移植受体细胞染色体和胞质精确去除量的计量方法。用于核移植盲吸法去核体积的度量方法,主要包括以下步骤:卵母细胞采集与成熟;准备去核工具;首先将成熟的卵母细胞进行染色,然后用去核针度量去核染色体和第一极体以及周围细胞质的量,进行盲吸法去核;只进行一次紫外观察,观察染色体与第一极体是否去除或者卵母细胞是否还含有染色体,观察到未去核干净的卵母细胞直接丢弃。本发明在核移植盲吸法去核操作中,使操作员能够进行量化去核体积,可对去核进行精确度量,而且减少对卵母细胞染色紫外示核的次数,降低对卵母细胞损伤,提高重构胚后期发育质量,经济实用、操作方便。

    一种单细胞克隆培养方法
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN103923876A

    公开(公告)日:2014-07-16

    申请号:CN201410166605.8

    申请日:2014-04-23

    Abstract: 本发明公开了一种单细胞克隆培养方法,包括:步骤1,制备培养液微滴;步骤2,准备显微操作系统;步骤3,筛选单克隆细胞;步骤4,利用步骤2所述的显微操作系统将操作针内的目标细胞以每个液滴放一枚细胞逐一放入步骤1的培养液微滴内,然后进行细胞培养;步骤5,将步骤4培养的细胞在培养2天后进行半量换液;步骤6,扩大培养,获得单细胞克隆。利用本发明的方法,培养液微滴之间的石蜡油隔绝了微滴之间的接触,保证了细胞克隆的单一性;同时由于培养液微滴的体积为5μl以下,所培养细胞分泌的生物因子不被过度稀释,为细胞的生长提供了一个很好的微环境。

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