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公开(公告)号：CN113278625A
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN202110270295.4
申请日：2021-03-12
申请人： 新疆农垦科学院
IPC分类号： C12N15/16 , C12Q1/6888 , C12N15/11
摘要： 本发明提供了一种用于培育特异IGF1转基因绵羊的基因序列及其鉴定引物和鉴定方法，通过将合成的特异IGF1基因序列转染到绵羊成纤维细胞，将筛选出的阳性转基因细胞系作为核供体细胞，利用常规体细胞核移植的方式获得特异IGF1转基因绵羊，利用特定引物结合PCR扩增和酶切鉴定的双重方式对该特异IGF1转基因绵羊及其皮肤表达IGF1基因情况进行鉴定，鉴定方法快速、简便，鉴定结果直观、准确。
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公开(公告)号：CN105671045A
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201610104796.4
申请日：2016-02-25
申请人： 新疆农垦科学院
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/87
CPC分类号： C12N15/1137 , C12N15/85 , C12N15/902 , C12N2310/141 , C12N2800/107
摘要： 本发明公开了一种提高基因编辑后绵羊胚胎成纤维细胞同源重组修复频率的方法。本发明提供了抑制含有基因编辑DNA片段的离体绵羊胚胎成纤维细胞中Lig4基因表达的物质在制备促进含有基因编辑DNA片段的离体绵羊胚胎成纤维细胞同源重组修复产品中的应用。本发明的实验证明，本发明筛选到抑制绵羊Lig4基因表达的siRNA，通过siRNA抑制绵羊Lig4基因表达,抑制绵羊胚胎成纤维细胞的NHEJ修复途径从而刺激细胞内HR修复途径，提高了细胞采用HR修复的频率，为提高绵羊胚胎成纤维细胞基因打靶效率和研究绵羊基因组精确编辑提供基础。
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公开(公告)号：CN103233004B
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201310156445.4
申请日：2013-04-28
申请人： 新疆农垦科学院
摘要： 本发明提供一种DNA分子，所述DNA分子的碱基序列为SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示，其能够编码一种TALE-TFs，所述TALE-TFs能够识别SEQ ID NO5中相应位点。本发明利用TALE-TFs技术使不表达β-酪蛋白基因的哺乳动物成纤维细胞能够表达β-酪蛋白基因，也就实现了用TALE-TFs在成纤维细胞中激活重组的β-酪蛋白基因——外源整合基因表达框，为体外检测重组的β-酪蛋白启动子驱动的表达框提供一种更加方便的检测途径，无需培养乳腺上皮细胞。
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公开(公告)号：CN103740580A
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201310060725.5
申请日：2013-02-26
申请人： 新疆农垦科学院
IPC分类号： C12M1/00
CPC分类号： C12M35/04
摘要： 本发明公开了一种砸碰锤。该砸碰锤是分子生物学实验中使用的一种震荡装置，由锤体和与所述锤体固定连接的手柄组成，所述锤体由一可开关的密闭盒体和与所述密闭盒体一端固定连接的弹性部件组成。所述密闭盒体可由相互配合的盖体和杯体组成。所述弹性部件可为橡胶块。使用本发明所提供的砸碰锤在距离桌面高30cm处向下敲击5—6次，细菌沉淀即可全部悬浮；在脂肪RNA提取实验的脂肪样品均质化和相分离两个步骤中使用本发明所提供的砸碰锤，最终提取的总RNA量为10.5ug/100mg样品。本发明的砸碰锤对目标物质的分散效果明显，且操作简便，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN103146686B
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201310075385.3
申请日：2013-03-07
申请人： 新疆农垦科学院
摘要： 本发明公开了一种批量获得基因组DNA中差异位点及其侧翼序列的方法。该方法包括如下步骤：将基因组DNA甲和基因组DNA乙混合后杂交，用CELⅠ核酸内切酶对未形成双链区的单链DNA区进行酶切，回收酶切产物中目的范围大小的DNA片段进行自杂交；再进行DNA末端补平、加接头DNA、PCR扩增和测序，最后获得基因组DNA甲和基因组DNA乙的基因组DNA中的差异位点。本发明所提供的方法具有如下优点：效率高，通量大，成本低，一条阳性克隆可提供2处基因组DNA差异位点信息；操作简单方便，在测序前不需要使用复杂设备或昂贵的试剂；可广泛用于动物、植物和微生物品种间、品系间及癌症细胞与正常细胞间基因组DNA差异位点的检测分析。
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公开(公告)号：CN111763692A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010647703.9
申请日：2020-07-07
申请人： 新疆农垦科学院
IPC分类号： C12N15/873 , G01N15/10 , G01N15/02
摘要： 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种体细胞核移植受体细胞染色体和胞质精确去除量的计量方法。用于核移植盲吸法去核体积的度量方法，主要包括以下步骤:卵母细胞采集与成熟；准备去核工具；首先将成熟的卵母细胞进行染色，然后用去核针度量去核染色体和第一极体以及周围细胞质的量，进行盲吸法去核；只进行一次紫外观察，观察染色体与第一极体是否去除或者卵母细胞是否还含有染色体，观察到未去核干净的卵母细胞直接丢弃。本发明在核移植盲吸法去核操作中,使操作员能够进行量化去核体积,可对去核进行精确度量,而且减少对卵母细胞染色紫外示核的次数，降低对卵母细胞损伤，提高重构胚后期发育质量，经济实用、操作方便。
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公开(公告)号：CN103834657B
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201310625428.0
申请日：2013-11-29
申请人： 新疆农垦科学院
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/63 , C12N5/10
摘要： 本发明公开了一种人工DNA分子及表达目标基因的方法。该人工DNA分子的碱基序列为SEQ ID NO.2，能够编码TALE-TF1，所述TALE-TF1能够识别SEQ ID NO.1中的28-48位；或所述人工DNA分子的碱基序列为SEQ ID NO.3，能够编码TALE-TF2，所述TALE-TF2能够识别SEQ ID NO.1中的42-62位；或所述人工DNA分子的碱基序列为SEQ ID NO.4，能够编码TALE-TF3，所述TALE-TF3能够识别SEQ ID NO.1中的56-76位。本发明的人工DNA分子能够激活绵羊成纤维细胞中β-酪蛋白基因启动子，为绵羊乳腺生物反应器的构建提供直接方便的检测技术。
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公开(公告)号：CN103194441B
公开(公告)日：2014-08-27
申请号：CN201310134586.6
申请日：2013-04-17
申请人： 新疆农垦科学院
摘要： 本发明公开了获取miRNA的候选靶基因的方法及其专用反转录引物。该方法包括：1）以带茎环结构和目的miRNA种子序列的DNA为反转录引物，获取与目的miRNA种子序列互补的mRNA对应的cDNA第一条链，得到A库；2）以带特异接头和14-20个脱氧胸腺嘧啶核苷酸的DNA为反转录引物，获取真核生物目的组织的mRNA对应的cDNA第一条链，得到B库；所述反转录引物B的结构是特异接头-T14-20；3）将所述A库和所述B库合成双链cDNA后进行杂交得到杂交DNA分子，扩增所述杂交DNA分子上所述目的miRNA种子序列和所述特异接头之间的DNA片段，根据所述扩增产物得到目的miRNA的候选靶基因。
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公开(公告)号：CN103243167B
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201310180402.X
申请日：2013-05-15
申请人： 新疆农垦科学院
摘要： 本发明公开了与绵羊羊毛纤维直径相关的分子标记及其应用。本发明的绵羊羊毛纤维直径相关的分子标记是SEQ ID No.1的第211-246位所示的36bp的DNA片段。本发明的与绵羊羊毛纤维直径相关的分子标记及鉴别羊毛超细型绵羊的方法和相关产品不受待鉴别绵羊的年龄、性别等的限制，可用于绵羊特别是中国美利奴羊的早期选育，甚至在绵羊刚出生时就可以筛选，提高羊毛超细型绵羊育种的选择效率，加快育种进程。
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公开(公告)号：CN103233004A
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201310156445.4
申请日：2013-04-28
申请人： 新疆农垦科学院
摘要： 本发明提供一种DNA分子，所述DNA分子的碱基序列为SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示，其能够编码一种TALE-TFs，所述TALE-TFs能够识别SEQ ID NO5中相应位点。本发明利用TALE-TFs技术使不表达β-酪蛋白基因的哺乳动物成纤维细胞能够表达β-酪蛋白基因，也就实现了用TALE-TFs在成纤维细胞中激活重组的β-酪蛋白基因——外源整合基因表达框，为体外检测重组的β-酪蛋白启动子驱动的表达框提供一种更加方便的检测途径，无需培养乳腺上皮细胞。
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