-
公开(公告)号：CN104946581B
公开(公告)日：2017-10-13
申请号：CN201510210334.6
申请日：2015-04-28
申请人： 广东温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC分类号： C12N5/0735
摘要： 本发明公开了一种培养猪滋养层干细胞的专用培养基及方法，该专用培养基成分包括bFGF、activin A、Y27632、Knockout SR和β‑巯基乙醇。培养方法是将干细胞培养器皿预先用细胞外基质包被；然后将猪囊胚用蛋白酶消化去除透明带，转入干细胞培养器皿中，添加本发明的专用培养基；培养至形成总细胞数为1000~2000个的滋养层干细胞克隆团时，消化成单细胞，转入新的经细胞外基质包被的培养器皿进行细胞的传代培养。本发明的专用培养基成分确定，使用安全性高，避免异源细胞的污染。培养方法简单高效，对猪滋养层干细胞培养具有克隆形成率高、细胞凋亡率低、增殖传代能力强和安全稳定的优点。
-
公开(公告)号：CN108285906A
公开(公告)日：2018-07-17
申请号：CN201711477805.5
申请日：2017-12-29
申请人： 广东温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC分类号： C12N15/85 , C12N5/10 , A01K67/027
CPC分类号： C12N15/85 , A01K67/0275 , A01K2227/108 , A01K2267/02
摘要： 本发明公开了一种定点整合外源DNA转基因猪的构建方法，包括以下步骤：S1、安全靶点筛选及靶点绑定gRNA切割效率验证；S2、构建同源臂供体质粒，并获得定点整合转基因细胞系；S3、外源DNA定点整合转基因猪的构建。本发明在供体质粒中引入gRNA靶点序列，利用细胞内转录gRNA诱导Cas9核酸酶切割靶基因同时，线性化供体质粒，大大简化试验步骤，节约人力，且有利于提高共转染效率。本发明定点整合所用载体较少，同源臂大小适中，更有利于获得转基因细胞系，将高效定点整合技术，高活力定点转基因细胞培育技术与体细胞克隆技术结合，有利于定点整合转基因动物高效制备，加快转基因动物新品种培育速度。
-
公开(公告)号：CN104946581A
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201510210334.6
申请日：2015-04-28
申请人： 广东温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC分类号： C12N5/0735
摘要： 本发明公开了一种培养猪滋养层干细胞的专用培养基及方法，该专用培养基成分包括bFGF、activin A、Y27632、Knockout SR和β-巯基乙醇 。培养方法是将干细胞培养器皿预先用细胞外基质包被；然后将猪囊胚用蛋白酶消化去除透明带，转入干细胞培养器皿中，添加本发明的专用培养基；培养至形成总细胞数为1000~2000个的滋养层干细胞克隆团时，消化成单细胞，转入新的经细胞外基质包被的培养器皿进行细胞的传代培养。本发明的专用培养基成分确定，使用安全性高，避免异源细胞的污染。培养方法简单高效，对猪滋养层干细胞培养具有克隆形成率高、细胞凋亡率低、增殖传代能力强和安全稳定的优点。
-
公开(公告)号：CN106086068A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610397567.6
申请日：2016-06-06
申请人： 广东温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
摘要： 本发明公开了一种多顺反子、唾液腺特异性表达该多顺反子的载体及其构建方法，所述多基因共表达的多顺反子具有如SEQ ID No:1所示的碱基序列，所述唾液腺特异性表达多顺反子的载体具有如SEQ ID No:3所示的核苷酸序列，其是以多顺反子真核表达载体pCD‑PXAT和pPB‑mPSP‑neoGFP载体为原料构建得到的。本发明构建的多顺反子能共表达纤维素酶、木聚糖酶、葡聚糖酶、果胶酶与植酸酶，囊括了常规饲料中NSP酶的所有主要成员和植酸酶，这些酶都能较好的兼容动物胃肠消化道pH环境，具有较好的胃蛋白和胰蛋白酶耐受性，且始终保持较高的活性，克服了传统饲料用酶制剂在加工，生产使用中缺陷和问题，由于是动物自身分泌，几乎不存在成本问题。
-
公开(公告)号：CN103937746A
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201410097949.8
申请日：2014-03-18
申请人： 广东温氏食品集团股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种制备动物转基因阳性单细胞克隆的方法，步骤为：（1）构建包括目的基因、荧光标记基因和药物筛选标记基因的质粒；（2）质粒转染已培养至对数生长期的宿主动物细胞；（3）经转染的细胞生长恢复后，进行消化、离心和重悬稀释，再置于荧光显微镜下，用内径20~80μm的吸针吸取表达荧光标记基因的单个细胞，分别接种至不同份的细胞培养基中；（4）各单个细胞生长成克隆团后，消化其中稳定表达荧光标记基因的细胞克隆团进行传代扩增，即得到转基因阳性单细胞的克隆。该方法转基因阳性单个细胞分离和接种技术操作简单快速、克隆形成率高，大大简化了不同转基因动物个体的检测鉴定工作，降低检测成本，省时省力。
-
公开(公告)号：CN204697705U
公开(公告)日：2015-10-14
申请号：CN201520420536.9
申请日：2015-06-18
申请人： 广东温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
摘要： 本实用新型公开了一种一体式猪用饲喂槽，槽体上设置有用于固定槽体的固定装置，包括设置有容纳空间的槽体，所述槽体内设置有隔板，该隔板将槽体分割成料槽和饮水槽，所述隔板上设置有便于猪只头在料槽和饮水槽之间往返移动的开口，本实用新型将饮水槽和料槽整合一体，将饮水装置安装到料槽内，中间设置挡板，挡板经适度切割，达到既可分割饲料槽和水槽，又可以让猪头在料槽和水槽无障碍穿梭，实现猪只在槽内，自由吃料和饮水，满足动物天性。
-
公开(公告)号：CN204762694U
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201520425894.9
申请日：2015-06-18
申请人： 广东温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
摘要： 本实用新型公开了一种实验用笼具。该实验用笼具包括主体框架、门栅、后侧活动挡栅、左侧护栏、右侧护栏、背部活动压板、底板、集尿盆、集粪盆和饲喂槽，底板由漏尿底网和漏粪底板组成，底板前1/3部分为漏尿底网，后2/3部分为漏粪底板，集尿盆前面口沿设有挡板，右侧护栏设置有光滑板，本实用新型能适用于不同阶段、不同大小猪的饲养；能够实现笼养猪粪尿分离和采食量的精确评估；可保证笼养猪的自由饮水；可避免底板严重粘粪，便于收集粪便和清洁，且更加坚固和能够保护猪蹄；有利于尿液的滴落和收集；能够胜任瘘管荷术猪的护理和试验，防止笼壁剐蹭瘘管，撕裂伤口；可提高笼子的舒适性和减少试验人员的劳动强度。
-
公开(公告)号：CN110846337B
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN201911170226.5
申请日：2019-11-26
申请人： 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC分类号： C12N15/62 , C12N15/873 , A01K67/027
摘要： 本发明公开了一种多功能融合酶XABT基因及构建方法和应用，该多功能融合酶XABT基因，可以同时表达表达木聚糖酶、植酸酶、葡聚糖酶和纤维素酶，并具有高效的酶活，该多功能融合酶强化了葡聚糖酶活性，对含葡聚糖较高的大麦、燕麦、黑麦、小麦及其麸皮类日粮具有更强的消化能力。亦可以用于制备节粮环保转基因经济动物，消除饲料中主要抗营养因子，达到提高饲料消化率，减少污染排放的目的。
-
公开(公告)号：CN110564774B
公开(公告)日：2021-10-15
申请号：CN201910782035.8
申请日：2019-08-23
申请人： 华南农业大学
摘要： 本发明公开了一种利用修饰的ssODN提高细胞基因组定点修饰效率的方法。该方法通过CRISPR/Cas9系统与经修饰后的ssODN共同作用于细胞来实现。具体地为，CRISPR/Cas9系统包含目的基因gRNA片段，可以定点识别目的基因，并使目的基因发生双链断裂，而在断裂处ssODN与目的基因碱基互补配对，高效的完成基因组定点修饰，而经修饰后的ssODN可以显著提高定点修饰的效率。
-
公开(公告)号：CN112852845A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110156059.X
申请日：2021-02-04
申请人： 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC分类号： C12N15/56 , C12N9/42 , C12N15/85 , A23K20/189 , A23K50/75 , A01K67/027
摘要： 本发明公开了一种新型多功能酶基因HG32及应用，该酶来源于中华竹鼠肠道微生物，能够兼容真核生物细胞表达系统，表达高生物活性的纤维素酶，其可在畜禽饲料酶制剂、转基因动物制备、食品和药品行业等领域应用，以解决植物纤维素难降解、饲料营养利用率低等问题，减轻动物排泄物中氮和、有机物等污染问题。本发明通过对竹鼠肠道微生物宏转录组测序，序列拼接，与NCBI上已有的糖苷水解酶家族进行同源性对比，筛选高表达的、同源性高于50％的疑似纤维素酶的基因，预测其信号肽，并用猪腮腺分泌蛋白信号肽替换原有的信号肽，按猪密码子偏好优化后克隆到真核表达载体上，通过脂质体转染到猪肾上皮细胞中表达，收集细胞培养上清液进行酶活分析比较后获得。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
搜索结果
40 条记录 (耗时 0.077 秒)
