一种基于CRISPR/Cas9系统敲除猪细胞Y染色体的方法

    公开(公告)号:CN116064541B

    公开(公告)日:2025-03-18

    申请号:CN202211294282.1

    申请日:2022-10-21

    Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR/Cas9系统敲除猪细胞Y染色体的方法,属于生物技术领域,该方法主要包括:(1)根据生物信息学找出位于Y染色体上的特异靶向重复序列并设计相应的gRNA;(2)进行CRISPR/Cas9载体的制备;(3)将构建好的载体电转入公猪胎儿成纤维细胞中,并通过q‑PCR验证其在细胞水平的靶基因表达水平下降情况;(4)选择效率较高的gRNA电转,进行流式分选稀释获取单克隆,并对单克隆进行PCR及核型分析验证。本发明在猪的特定染色体寻找能够被特异sgRNA识别的重复序列,为特定染色体及其携带基因功能的研究提供了一种新的工具,同时也为实现大型家畜性别控制提供一种新的技术方案。

    NDUFA4L2基因在调控猪肌纤维类型转化上的应用

    公开(公告)号:CN117683815A

    公开(公告)日:2024-03-12

    申请号:CN202311749855.X

    申请日:2023-12-19

    Abstract: 本发明公开了NDUFA4L2基因在调控猪肌纤维类型转化上的应用及调控调控猪肌纤维类型转化的方法,该方法包括在猪骨骼肌卫星细胞过表达或干扰NDUFA4L2基因表达。由此,发现在猪肌肉中受m6A甲基化修饰的靶基因NDUFA4L2,该基因在猪慢肌中发生m6A修饰水平比快肌高,基因的表达量也高,是影响慢肌纤维和快肌纤维肉质差异的原因;在猪骨骼肌卫星细胞中干扰该基因的表达,抑制细胞的分化,为改变肌肉横截面积提供新的方法;再者,过表达NDUFA4L2使肌纤维类型向慢速氧化性肌纤维转化,从而提高猪肉中红肉的比例,为提升猪肉的宰后品质提供了新的方法。通过在饲料中添加甜菜碱来调控m6A对基因的修饰水平,从而调控NDUFA4L2基因的表达,达到促进红肉的比例,为提升红肉比例提供新的思路。

    长链非编码RNA NEAT1在调控肌纤维类型转化上的应用

    公开(公告)号:CN116676339A

    公开(公告)日:2023-09-01

    申请号:CN202310870303.8

    申请日:2023-07-17

    Abstract: 本发明公开了一种长链非编码RNANEAT1在调控肌纤维类型转化上的应用,是长链非编码RNANEAT1的一种新用途。本发明通过在肌细胞中干扰NEAT1表达或过表达NEAT1,来研究NEAT1对肌细胞中与肌纤维类型相关的基因及其蛋白表达的影响,发现lncRNANEAT1对肌细胞肌纤维转化具有重要调控作用:lncRNANEAT1能够促进慢肌基因及其蛋白表达,抑制快肌基因及其蛋白表达。而肌细胞中快、慢肌基因及其蛋白的表达会直接影响肌纤维类型的比例,因此可以通过调控肌细胞中lncRNANEAT1的表达来进一步影响肌纤维类型的比例,实现肌纤维类型的转化。由此,可通过抑制或过表达lncRNANEAT1的方式来调控肌纤维类型的转化,进一步调控动物的肉质,为培育瘦肉型或育肥型动物提供基础和新思路。

    一种与猪体长相关的SNP分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN115851975A

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN202211326080.0

    申请日:2022-10-25

    Abstract: 本发明涉及一种与猪体长相关的SNP分子标记及其应用,属于分子生物学和分子标记技术领域,所述SNP分子标记与位于猪17号染色体上的BMP2基因高度连锁,单核苷酸多态性位点对应国际猪基因组11.1版本参考序列17号染色体上第15,643,342位T>C突变,该位点为GWAS最高点并与BMP2基因内的SNP位点高度连锁,且BMP2基因内SNP位点也是GWAS最显著位点之一,更重要的是,该位点的优势等位基因型比有害等位基因型的体长表型长4.01cm,可解释13.65%的表型方差。在此基础上,通过选择有利基因型个体留种,淘汰不利基因型个体,可显著提高种群体长性状,从而达到加快种猪体长性状遗传进展的目的。

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