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公开(公告)号:CN114935655B
公开(公告)日:2024-02-20
申请号:CN202210686864.8
申请日:2022-06-16
申请人: 安徽农业大学
IPC分类号: G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/545 , C07K19/00 , C07K14/54 , C12N15/70 , C07K16/24 , C07K16/06
摘要: 高特异性和敏感性。本发明提供了一种猪IL‑17胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒,包括试剂R1和试剂R2;试剂R1包括MOPS、KH2PO4、NaCl、山梨酸钾、EDTA;试剂R2包括MOPS、PEG8000、BSA、NaCl、偶联rpIL‑17A‑IgG的胶乳微球等。本发明还提供了上述猪IL‑17胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒的制备与使用方法。本发明首次利用胶乳增强免疫比浊法来测定猪IL‑17,在成本上可以做到0.7元/样本,大大降低了养殖户检测负担;并且,通过全自动生化(56)对比文件许春;洪建明;杜晶春;向波;徐霞.制备GP73多克隆抗体并建立GP73胶乳增强免疫比浊法.细胞与分子免疫学杂志.2015,(第02期),全文.邓定浩;肖永乐;唐健雪;杨鑫;高荣.真核表达猪白细胞介素17及其生物活性研究.中国生物工程杂志.2018,(第08期),全文.Mehdi Golchin;Saeedeh Shojaeepour;Mostafa Roosta;FatemehMirzabeigi.Sensitivity and specificity ofa latex agglutination test for detectionof calf enterotoxigenic Escherichia coliisolates in comparison withPCR.Comparative clinical pathology.2016,(第3期),全文.郭喜.胶乳增强免疫比浊法试剂盒测定胰岛素的性能评价.首都医药.2014,(第06期),全文.
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公开(公告)号:CN109580941A
公开(公告)日:2019-04-05
申请号:CN201811376701.X
申请日:2018-11-19
申请人: 安徽农业大学
IPC分类号: G01N33/569
摘要: 本发明公开了一种检测鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法,利用鸭坦布苏病毒全基因序列设计一对引物以扩增NS1基因,构建蛋白表达载体,通过IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)诱导表达获得重组表达蛋白包涵体,以包涵体经纯化、复性、浓缩后作为包被抗原,建立检测鸭血血清中鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法。本发明的抗体为非结构蛋白中的NS1蛋白,检验结果中假阳性少,IFA符合率高,且检验结果重复性好,敏感性强,检测时间快,5小时内基本可以检测出结果。动物试验结果显示抗体在感染鸭坦布苏病毒后出现阳性时间早,持续时间长。
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公开(公告)号:CN102757940A
公开(公告)日:2012-10-31
申请号:CN201210172184.0
申请日:2012-05-29
申请人: 安徽农业大学
摘要: 本发明为一种鸭黄病毒及以该毒株制备油乳灭活疫苗的制备方法,属于兽医传染病领域。所述鸭黄病毒为鸭黄病毒AH-F10株,保藏编号为:CCTCC V201213。本发明通过临床分离纯化病毒,将纯化后的病毒液经过甲醛灭活,与油乳佐剂乳化后制成鸭黄病毒灭活油乳剂疫苗。本发明所制备的鸭黄病毒灭活疫苗具有较好的免疫效果,对动物的不良反应较小,在暂无商品疫苗的情况下,适合小规模的养殖单位对鸭群免疫及科研实验使用。
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公开(公告)号:CN102757494A
公开(公告)日:2012-10-31
申请号:CN201210172344.1
申请日:2012-05-29
申请人: 安徽农业大学
摘要: 本发明为一种抗鸭黄病毒鸡卵黄抗体的制备方法,属于禽病免疫技术领域。本发明将保存的鸭黄病毒AH-F10株灭活油乳化制备灭活油乳苗,免疫产蛋鸡,提取抗鸭黄病毒卵黄抗体,所述抗鸭黄病毒鸡卵黄抗体的制备方法,操作简易,制备抗鸭黄病毒卵黄抗体效价较高,具有较好的免疫及治疗效果,反应温和,应激性较小,在当下暂无商品化抗体的情况下,为解决抗鸭黄病毒抗体的制备提供了新的思路。
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公开(公告)号:CN118755861A
公开(公告)日:2024-10-11
申请号:CN202411085003.X
申请日:2024-08-08
申请人: 安徽农业大学
IPC分类号: C12Q1/6893 , C12Q1/6883 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/90
摘要: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种用于检测禽毛滴虫的RAA引物组合物及其应用。本发明以Fe‑HYD基因作为检测禽毛滴虫的特异性基因片段,设计并筛选得到能够有效进行RAA扩增反应的引物对,并基于RAA‑LFD法实现了对禽毛滴虫快速、准确的可视化检测。
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公开(公告)号:CN102757940B
公开(公告)日:2013-10-16
申请号:CN201210172184.0
申请日:2012-05-29
申请人: 安徽农业大学
摘要: 本发明为一种鸭黄病毒及以该毒株制备油乳灭活疫苗的制备方法,属于兽医传染病领域。所述鸭黄病毒为鸭黄病毒AH-F10株,保藏编号为:CCTCC V201213。本发明通过临床分离纯化病毒,将纯化后的病毒液经过甲醛灭活,与油乳佐剂乳化后制成鸭黄病毒灭活油乳剂疫苗。本发明所制备的鸭黄病毒灭活疫苗具有较好的免疫效果,对动物的不良反应较小,在暂无商品疫苗的情况下,适合小规模的养殖单位对鸭群免疫及科研实验使用。
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公开(公告)号:CN102911922A
公开(公告)日:2013-02-06
申请号:CN201210171604.3
申请日:2012-05-29
申请人: 安徽农业大学
摘要: 本发明公开了一种梅山猪FUT1基因及其克隆和原核表达,该基因的核苷酸序列如SEQ IDNO 2所示;本发明通过RT-PCR方法克隆得到梅山猪FUT1基因ORF序列,构建了含FUT1基因重组表达质粒,并将重组原核表达质粒转化至BL21菌株体内进行诱导表达。梅山猪FUT1基因的表达成功,为研究FUT1作为ETEC F18受体蛋白对菌毛的粘附作用以及FUT1特异性抗体的制备奠定了基础。
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公开(公告)号:CN114935655A
公开(公告)日:2022-08-23
申请号:CN202210686864.8
申请日:2022-06-16
申请人: 安徽农业大学
IPC分类号: G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/545 , C07K19/00 , C07K14/54 , C12N15/70 , C07K16/24 , C07K16/06
摘要: 本发明提供了一种猪IL‑17胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒,包括试剂R1和试剂R2;试剂R1包括MOPS、KH2PO4、NaCl、山梨酸钾、EDTA;试剂R2包括MOPS、PEG8000、BSA、NaCl、偶联rpIL‑17A‑IgG的胶乳微球等。本发明还提供了上述猪IL‑17胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒的制备与使用方法。本发明首次利用胶乳增强免疫比浊法来测定猪IL‑17,在成本上可以做到0.7元/样本,大大降低了养殖户检测负担;并且,通过全自动生化分析仪进行检测,实现检测自动化,能满足临床大量样本检测的需求;同时,本发明试剂盒与ELISA法在准确度与灵敏度方面无差异性,具有高特异性和敏感性。
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公开(公告)号:CN109468281A
公开(公告)日:2019-03-15
申请号:CN201811376693.9
申请日:2018-11-19
申请人: 安徽农业大学
IPC分类号: C12N5/10 , C12N15/40 , C12N15/867 , A61K39/12 , A61P31/14
摘要: 本发明公开了一种能够稳定表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的BHK-21细胞系建立方法,该鸭坦布苏病毒株保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏名称为鸭黄病毒AH-F10株,保藏编号为:CCTCC V201213;构建方法如下:1)重组质粒pLOV-eGFP-NS1的构建;2)慢病毒样颗粒的制备;3)表达NS1细胞系的构建与筛选;4)NS1基因转录和核酸检测;5)NS1蛋白表达水平的检测。本发明可以获得在细胞外表达的具有生物活性构象的分泌表达的可溶性的鸭坦布苏病毒NS1蛋白。表达NS1细胞系筛选中我们以10μg/mL的嘌呤霉素培养液进行筛选,传代5次后即可检测到NS1基因的表达,第十代NS1细胞系就可以稳定表达,能够稳定表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的BHK-21细胞系方法比传统细胞系方法的时间缩短2/3。
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