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公开(公告)号：CN113025731A
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN202110238110.1
申请日：2021-03-04
Applicant: 宁夏医科大学总医院
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6895 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q1/6869
Abstract: 本申请提供了一种基于靶向扩增子富集策略的高通量病原菌检测试剂盒，包括DNA提取溶液、文库构建溶液、引物池、MINI柱和96孔板封膜。所述DNA提取溶液包括6mlBufferA、1.25ml蛋白酶K、12mlBufferB、19mlBufferC、17mlBufferD和20mlBufferE；所述文库构建溶液包括5ml5XHiFiMix、3mlAgencournaAMPure、68pmE.coliDH10B标准文库、2mlSwitch溶液、2ml2XTaqManMasterMix和2ml20XTaqManAssay。本申请通过结合环状扩增和二代测序技术，可将病原菌检出率从传统方法的15‑20％提高到30‑35％。提高病原菌检测的准确度以及缩短鉴定所需时间。
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公开(公告)号：CN111705118A
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN202010579351.8
申请日：2020-06-23
Applicant: 宁夏医科大学总医院
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/689 , C12Q1/6895 , C12Q1/06 , C12Q1/14 , C12Q1/10 , C12N15/11 , C12R1/385 , C12R1/46 , C12R1/445 , C12R1/425 , C12R1/42 , C12R1/22 , C12R1/19 , C12R1/01 , C12R1/37 , C12R1/725 , C12R1/74 , C12R1/72 , C12R1/68
Abstract: 本申请涉及一种基于靶基因高通量测序的血流感染检测试剂盒，包括以下试剂：PCR扩增缓冲液，dNTP，DNA聚合酶、BSA、特定扩增基因引物和一对U引物，所述特定扩增基因引物包括22种细菌、8种真菌、13种耐药基因和4种毒力基因的正向引物和反向引物，所述U引物包括正向引物5’-TTCTTAGCGTATTGGAGCTC-3’和反向引物5’-AAGTATCAGTATTGCGTTGTT-3’；本申请还涉及使用该试剂盒检测血流感染中病原微生物的方法。本申请提供的试剂盒采用靶基因高通量测序方法，可同时检测22种细菌、8种真菌、13种耐药基因和4种毒力基因，是一种测序和分析速度更快、测序成本更低的微生物检测试剂盒，检测结果的特异性和敏感性显著提高，为临床血流感染患者制定治疗方案提供了一种全新的快速简便的基因诊断技术。
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公开(公告)号：CN106544353A
公开(公告)日：2017-03-29
申请号：CN201610978586.8
申请日：2016-11-08
Applicant: 宁夏医科大学总医院
CPC classification number: C12N15/74 , C07K14/212 , C12N2810/10
Abstract: 本发明公开一种利用CRISPR-Cas9清除鲍曼不动杆菌耐药性基因的方法，该方法是先从临床收集鲍曼不动杆菌，采用药敏纸片法对鲍曼不动杆菌进行耐药测定处理后，进行耐药分析及统计；将多重耐药的鲍曼不动杆菌，用裂解煮沸法将其进行DNA的提取，然后利用其设计好的耐药基因引物进行扩增分析；根据上一步耐药基因的检测，挑选出含有OXA-23基因的鲍曼不动杆菌，构建CRISPR/Cas9和sgRNA的质粒，将其导入到含有OXA-23基因的鲍曼不动杆菌中，构建OXA-23基因缺失鲍曼不动杆菌突变菌株，对其进行耐药性分析。该方法操作简单、敲除效率高，为阻止耐药基因的传播和治疗耐药细菌提供新的方法和思路。
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公开(公告)号：CN105126093A
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：CN201510407694.5
申请日：2015-07-14
Applicant: 宁夏医科大学
CPC classification number: Y02A50/472
Abstract: 本发明提供一种可针对幽门螺旋杆菌四种关键黏附因子的多表位疫苗，其活性是一条多肽，主要由尿素酶A和B亚基、三种外膜蛋白(Lpp20、HpaA和CagL)的优势Th和B细胞抗原表位或区段以及霍乱毒素B亚基构成。本发明通过基因合成技术合成一个人工基因，其包含尿素酶A和B亚基、三种外膜蛋白(Lpp20、HpaA和CagL)的优势Th和B细胞抗原表位或区段，将该人工基因与霍乱毒素B亚基的基因序列相偶联，形成一个融合基因。利用大肠杆菌表达该融合基因，经蛋白纯化后，获得四价黏附因子多表位疫苗。该疫苗能够诱发机体产生针对尿素酶A和B亚基、三种外膜蛋白(Lpp20、HpaA和CagL)的T细胞免疫应答和特异性抗体体液免疫应答，可用于防治幽门螺旋杆菌感染相关性疾病。
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公开(公告)号：CN115466782A
公开(公告)日：2022-12-13
申请号：CN202211118780.0
申请日：2022-09-13
Applicant: 宁夏医科大学总医院
Abstract: 本发明涉及细菌评价技术领域，具体的说是平板筛查肠道定植耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的评价方法，包括原材料准备，包括菌株、试剂以及仪器的准备，PCR法检测耐药基因，通过煮沸法提取DNA，采用PCR法检测CRE相关耐药基因，改良麦康凯平板、CHROMagarKPC显色培养平板的制备及结果判读，肉汤增菌法，微量肉汤稀释法，敏感性与特异性检测，菌株经血平板复苏后，分别接种于3种不同抗菌药物的改良麦康凯平板，置于35℃培养16～18h，观察是否长出菌落，最低检测限的评估，临床样本的性能验证，统计学分析，用SPSS26.0软件进行，计数资料用例数表示，方法间筛查结果的一致性采用Kappa一致性检验，以P＜0.05为差异有统计学意义；本发明敏感性和特异性高、操作简便，适合推广使用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114931884A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210658809.8
申请日：2022-06-13
Applicant: 宁夏医科大学总医院
Abstract: 本发明公开了微生物检验前处理用均质器，包括固定台，固定台底端四角均连接设有固定脚垫，固定台顶端滑动连接设有均质框，均质框顶端两侧均设有固定竖板，两个固定竖板的相对面均滑动连接设有弧形固定框，均质框内设有均质罐，固定台顶端一侧连接设有电动伸缩杆，电动伸缩杆的顶端转动连接设有延展板，延展板远离电动伸缩杆一端的底部滑动连接设有顶盖，顶盖的底壁匹配均质罐设有防漏橡胶，延展板顶端连接设有转动电机。本发明与现有技术相比的优点在于：提供一种方便内部样品混动，方便上下层样品混合，减少搅拌均质使用时长的微生物检验前处理用均质器。
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公开(公告)号：CN112708655A
公开(公告)日：2021-04-27
申请号：CN202110176834.8
申请日：2021-02-07
Applicant: 宁夏医科大学总医院
IPC: C12Q1/24
Abstract: 本申请公开了一种RNA病毒保护剂及保护剂的制备方法，所述病毒保护剂包括：异硫氰酸胍、柠檬酸钠、蛋白酶K、RNase抑制剂、DNA降解酶和无菌水。所述病毒保护剂的制备方法包括以下步骤：常温状态下，用无菌水分别溶解异硫氰酸胍、柠檬酸钠、蛋白酶K、RNase抑制剂和DNA降解酶，得到异硫氰酸胍水溶液、柠檬酸钠水溶液、蛋白酶K水溶液、RNase抑制剂水溶液、DNA降解酶溶液；将这些水溶液混匀，并将PH调至7.5‑8.5，无菌水定容至10mL，用滤膜对定容后的RNA病毒保护剂进行过滤。本申请提供的RNA病毒保护剂，可以在室温下保藏RNA病毒，从而避免RNA病毒在储存和运输过程中反复冻融，有效的防止RNA降解。
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公开(公告)号：CN105126093B
公开(公告)日：2018-07-10
申请号：CN201510407694.5
申请日：2015-07-14
Applicant: 宁夏医科大学
CPC classification number: Y02A50/472
Abstract: 本发明提供一种可针对幽门螺旋杆菌四种关键黏附因子的多表位疫苗，其活性是一条多肽，主要由尿素酶A和B亚基、三种外膜蛋白(Lpp20、HpaA和CagL)的优势Th和B细胞抗原表位或区段以及霍乱毒素B亚基构成。本发明通过基因合成技术合成一个人工基因，其包含尿素酶A和B亚基、三种外膜蛋白(Lpp20、HpaA和CagL)的优势Th和B细胞抗原表位或区段，将该人工基因与霍乱毒素B亚基的基因序列相偶联，形成一个融合基因。利用大肠杆菌表达该融合基因，经蛋白纯化后，获得四价黏附因子多表位疫苗。该疫苗能够诱发机体产生针对尿素酶A和B亚基、三种外膜蛋白(Lpp20、HpaA和CagL)的T细胞免疫应答和特异性抗体体液免疫应答，可用于防治幽门螺旋杆菌感染相关性疾病。
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公开(公告)号：CN110988341A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911281208.4
申请日：2019-12-13
Applicant: 宁夏医科大学总医院
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/532 , G01N33/533 , G01N21/64
Abstract: 本申请公开一种血流感染病原菌微量肉汤快速荧光药敏检测方法，包括生物素试剂标记第一抗体；将生物素-抗体加入血液标本中，37℃孵育，离心得到生物素-抗体-细菌混合物；将链霉亲和素磁珠加入生物素-抗体-细菌混合物，37℃孵育，离心得到链霉亲和素磁珠-生物素-抗体-细菌混合物；将链霉亲和素磁珠-生物素-抗体-细菌混合物进行免疫磁珠分选，富集细菌；将抗生素稀释；将稀释后的抗生素加入富集后的细菌，37℃孵育，加入荧光二抗，继续孵育，测定荧光强度值，确定抗菌药敏效果。本申请从采血到抗生素药敏结果的总周转时间大约在16小时内，从阳性血培养到抗生素药敏检出的总周转时间大约为30小时，缩短血流感染病原菌药敏检测时间。
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公开(公告)号：CN111705118B
公开(公告)日：2023-01-10
申请号：CN202010579351.8
申请日：2020-06-23
Applicant: 宁夏医科大学总医院
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/689 , C12Q1/6895 , C12Q1/06 , C12Q1/14 , C12Q1/10 , C12N15/11 , C12R1/385 , C12R1/46 , C12R1/445 , C12R1/425 , C12R1/42 , C12R1/22 , C12R1/19 , C12R1/01 , C12R1/37 , C12R1/725 , C12R1/74 , C12R1/72 , C12R1/68
Abstract: 本申请涉及一种基于靶基因高通量测序的血流感染检测试剂盒，包括以下试剂：PCR扩增缓冲液，dNTP，DNA聚合酶、BSA、特定扩增基因引物和一对U引物，所述特定扩增基因引物包括22种细菌、8种真菌、13种耐药基因和4种毒力基因的正向引物和反向引物，所述U引物包括正向引物5’‑TTCTTAGCGTATTGGAGCTC‑3’和反向引物5’‑AAGTATCAGTATTGCGTTGTT‑3’；本申请还涉及使用该试剂盒检测血流感染中病原微生物的方法。本申请提供的试剂盒采用靶基因高通量测序方法，可同时检测22种细菌、8种真菌、13种耐药基因和4种毒力基因，是一种测序和分析速度更快、测序成本更低的微生物检测试剂盒，检测结果的特异性和敏感性显著提高，为临床血流感染患者制定治疗方案提供了一种全新的快速简便的基因诊断技术。
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