一种检测人胎盘胎儿侧间充质干细胞抗氧化能力的方法

    公开(公告)号:CN106636305A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201611008608.4

    申请日:2016-11-16

    Abstract: 本发明属于间充质干细胞技术领域,具体涉及一种检测人胎盘胎儿侧间充质干细胞抗氧化能力的方法,其是从胎盘中提取人胎盘胎儿侧间充质干细胞得原代人胎盘胎儿侧间充质干细胞;将原代人胎盘胎儿侧间充质干细胞进行培养得第一代间充质干细胞,并进行冻存;收集不同个体的第一代间充质干细胞,复苏后进行体外培养至第六代,收集第二代到第六代无血清培养上清,检测其总抗氧化能力、清除自由基能力以及抗氧化酶类物质活性。本发明通过测定人胎盘间充质干细胞培养上清的抗氧化能力,进而推断间充质干细胞的总体抗氧化能力,不仅拓展了间充质干细胞在临床治疗方面的应用,且为临床上间充质干细胞的无细胞治疗提供了依据。

    一种利用CRISPR-Cas9清除鲍曼不动杆菌耐药性基因的方法

    公开(公告)号:CN106544353A

    公开(公告)日:2017-03-29

    申请号:CN201610978586.8

    申请日:2016-11-08

    CPC classification number: C12N15/74 C07K14/212 C12N2810/10

    Abstract: 本发明公开一种利用CRISPR-Cas9清除鲍曼不动杆菌耐药性基因的方法,该方法是先从临床收集鲍曼不动杆菌,采用药敏纸片法对鲍曼不动杆菌进行耐药测定处理后,进行耐药分析及统计;将多重耐药的鲍曼不动杆菌,用裂解煮沸法将其进行DNA的提取,然后利用其设计好的耐药基因引物进行扩增分析;根据上一步耐药基因的检测,挑选出含有OXA-23基因的鲍曼不动杆菌,构建CRISPR/Cas9和sgRNA的质粒,将其导入到含有OXA-23基因的鲍曼不动杆菌中,构建OXA-23基因缺失鲍曼不动杆菌突变菌株,对其进行耐药性分析。该方法操作简单、敲除效率高,为阻止耐药基因的传播和治疗耐药细菌提供新的方法和思路。

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