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公开(公告)号：CN119193555A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411453598.X
申请日：2023-11-22
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开了一种阿魏酸脱羧酶高活性突变体及其应用，属于酶工程和基因工程技术领域。本发明所述阿魏酸脱羧酶突变体的氨基酸序列为SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.14或SEQ ID NO.16。本发明解决了天然阿魏酸脱羧酶Fdc1催化活性低的技术问题，可用于4‑乙酰氧基苯乙烯的生物合成。本发明所述突变体提升了阿魏酸脱羧酶对4‑乙酰氧基肉桂酸的脱羧活性，且提高了该酶的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN115851797B
公开(公告)日：2024-12-10
申请号：CN202211358436.9
申请日：2022-11-01
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开了一种高效供给阿魏酸脱羧酶的辅因子prFMN的工程菌及构建方法与应用，属于基因工程技术和发酵工程技术领域。以过表达异丙基转移酶UbiX以及阿魏酸脱羧Fdc的大肠杆菌工程菌株(SC‑2)为基础，进一步过表达黄素还原酶Fre、甲酸脱氢酶FDH、二甲氨基吡啶活化酶ThiM及核黄素激酶RFK形成工程菌株SC‑6，进而提供充足Fdc辅因子prFMN，将重组工程菌全细胞作为催化剂。同SC‑2相比，以肉桂酸为底物(苯乙烯为脱羧产物)，SC‑6的脱羧活性提升约45倍，而且以苯乙烯为底物(肉桂酸为羧化产物)，其羧化活性提升近20倍。辅因子prFMN高效供给的工程菌株SC‑6在Fdc的脱羧及羧化活性提升，尤其在合成肉桂酸型等高值产物上具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN119061094A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411352527.0
申请日：2024-09-26
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开一种酶法制备β‑烟酰胺单核苷酸的方法，属于生物技术领域。本发明以D‑核糖、烟酰胺、腺嘌呤核苷三磷酸ATP为原料，以核糖激酶、磷酸核糖焦磷酸激酶以及烟酰胺磷酸核糖转移酶催化合成NMN，同时反应体系引入了多聚磷酸激酶和多聚磷酸盐形成了ATP的再生循环，引入了焦磷酸水解酶水解PPi，保证了ATP循环利用的同时，消除了副产物ADP和PPi对产率产生的不利影响；并利用AMP核苷酶构建了AMP回收系统，将副产物AMP转化成5磷酸核糖，进而转化为PRPP，实现了在不额外投料的条件下增加PRPP的合成途径，进一步增加NMN合成效率。该发明最终获得NMN的产率达90％以上，实现了低酶量条件下高效合成NMN。
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公开(公告)号：CN119000915A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411072699.2
申请日：2024-08-06
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开了脂酰基化合物在肝细胞癌诊断中的应用，属于生物技术领域。本发明首先将测试者血细胞经过衍生化后采用气相色谱仪检测其中脂酰基化合物的含量，并通过计算十八烷酸(C18:0)、9‑十八碳单烯酸(C18:1n9)、二十碳四烯酸(C20:4n6)百分含量关系，若满足C20:4n6质量百分含量≤15.5％、C18:0与C18:1n9含量比值≥1.86、C18:1n9与C20:4n6含量比值≥0.97中的一项或两项以上，则诊断为肝细胞癌。本发明可用来对肝细胞癌患者进行筛查，也可以对甲胎蛋白(AFP)变化隐蔽的患者进行早期诊断，为肝细胞癌诊断提供了一种分子水平的评价方法，提高检出率并缩短检出时间。
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公开(公告)号：CN103207117A
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201310073309.9
申请日：2013-03-07
Applicant: 大连理工大学
IPC: G01N3/10
Abstract: 本发明涉及一种高速铁路无缝钢轨静载荷模拟实验系统。该实验系统由无碴钢轨路段、钢轨两端的固定装置、温度力模拟装置和测量钢轨应变的传感装置组成，无碴钢轨路段上的两根钢轨通过弹条扣件连接在轨道板上，两端固定,其中一根钢轨被切断，在切缝处设置温度力模拟装置，通过伸缩油缸施加拉力，模拟钢轨温度应力及断轨，另一根钢轨用于模拟自然温度下钢轨内部温度力的变化。由应变片和温度传感器组成的传感装置用于测量钢轨的应变、应力及温度。该实验系统提高了实验的可重复性，省时省力，减小了实验场地，大大降低了实验成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115960935A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202211216586.6
申请日：2022-09-30
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开了一种利用阿魏酸脱羧酶高效催化肉桂酸合成苯乙烯的方法，属于蛋白质与酶工程技术领域。通过构建阿魏酸脱羧酶Fdc以及其辅因子prFMN高效供给的大肠杆菌工程菌株，以菌株粗酶液为全细胞催化剂，在15min条件下，仅转化Fdc的菌株粗酶液测得肉桂酸的转化效率为6％；而辅因子高效供给菌株粗酶液肉桂酸转化效率为43％，相比提升了7倍，在酶量加倍且30min条件下，底物转化效率可达100％。本发明所构建的prFMN辅因子高效供给的阿魏酸脱羧酶Fdc菌株，在苯乙烯生物合成领域具有显著的应用前景。
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公开(公告)号：CN115236251A
公开(公告)日：2022-10-25
申请号：CN202210815521.7
申请日：2022-07-08
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开了一种用于宫颈癌诊断的评价指标，属于生物技术领域。9‑十八碳烯酸(C18:1n9)、11‑十八碳烯酸(C18:1n7)、亚油酸(C18:2n6)、二十二碳六烯酸(C22:6n3)用于制备诊断宫颈癌的诊断。方法采用气相色谱仪测定宫颈癌组织的不饱和脂肪酸‑9‑十八碳烯酸(C18:1n9)、11‑十八碳烯酸(C18:1n7)、亚油酸(C18:2n6)、二十二碳六烯酸(C22:6n3)的含量，并通过公式计算诊断系数B，B
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公开(公告)号：CN118086266A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202311572551.0
申请日：2023-11-22
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开了一种阿魏酸脱羧酶高活性组合突变体及其应用，属于酶工程和基因工程技术领域。本发明构建了阿魏酸脱羧酶的突变体文库，筛选得到了对非天然底物4‑乙酰氧基肉桂酸活性显著提升的组合突变体。本发明所述阿魏酸脱羧酶组合突变体是对如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列进行突变并应用于4‑乙酰氧基苯乙烯的生物合成，包括：将第397位苯丙氨酸突变为缬氨酸，将第398位异亮氨酸突变为亮氨酸，将第438位苏氨酸突变为脯氨酸，将第441位脯氨酸突变为丝氨酸或将第441位脯氨酸突变为缬氨酸中的一种或两种以上的组合。本发明所述突变体提升了阿魏酸脱羧酶对4‑乙酰氧基肉桂酸的脱羧活性，且提高了该酶的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN115851797A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202211358436.9
申请日：2022-11-01
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开了一种高效供给阿魏酸脱羧酶的辅因子prFMN的工程菌及构建方法与应用，属于基因工程技术和发酵工程技术领域。以过表达异丙基转移酶UbiX以及阿魏酸脱羧Fdc的大肠杆菌工程菌株(SC‑2)为基础，进一步过表达黄素还原酶Fre、甲酸脱氢酶FDH、二甲氨基吡啶活化酶ThiM及核黄素激酶RFK形成工程菌株SC‑6，进而提供充足Fdc辅因子prFMN，将重组工程菌全细胞作为催化剂。同SC‑2相比，以肉桂酸为底物(苯乙烯为脱羧产物)，SC‑6的脱羧活性提升约45倍，而且以苯乙烯为底物(肉桂酸为羧化产物)，其羧化活性提升近20倍。辅因子prFMN高效供给的工程菌株SC‑6在Fdc的脱羧及羧化活性提升，尤其在合成肉桂酸型等高值产物上具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN102721501B
公开(公告)日：2014-04-02
申请号：CN201210199354.4
申请日：2012-06-15
Applicant: 大连理工大学
IPC: G01L5/00
Abstract: 本发明测量铁路钢轨断裂纵向力分布的实验方法涉及铁路安全检测技术领域，特别涉及一种铁路钢轨断裂纵向力分布规律测量的实验方法。该方法采用对钢轨预加应力再释放来模拟钢轨断裂时的状态变化，并通过测力传感器组测量钢轨预应力释放前后的钢轨纵向力分布，获得钢轨断裂纵向力分布规律；首先在一定长度轨道的长钢轨上安装测力传感器组，然后将长钢轨的扣件完全松开，并利用钢轨拉伸机对长钢轨施加一定的预应力，再将长钢轨的扣件锁定，最后释放预应力，通过传感节点组和测力传感器组采集钢轨应力数据，用无线网关将该数据发送到计算机，获得钢轨断裂后纵向力分布规律。该方法可以实现准确、可控、低成本的钢轨断裂纵向力分布的实验。
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