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公开(公告)号:CN113528619B
公开(公告)日:2023-03-17
申请号:CN202110918528.7
申请日:2021-08-11
Applicant: 复旦大学附属中山医院
IPC: C12Q1/6806
Abstract: 本发明涉及一种提取肺泡灌洗液全核酸的方法,包括以下步骤:1)肺泡灌洗液中加入Buffer CDL,以及蛋白酶K,消化处理;2)将消化处理后液体冷却至室温,加入Tracer,再加入预冷的异丙酮,混匀,离心处理,弃上清,留沉淀;3)往沉淀中加入Buffer CDB,在液面下加入BufferCDD,混匀;4)加入无水乙醇,涡旋振荡混匀;5)液体移入微量核酸吸附柱中,离心,倒掉收集管中的液体;6)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW1,离心,倒掉收集管中的液体;7)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW2,离心,倒掉收集管中的液体;8)换用新的收集管容纳微量核酸吸附柱,再离心;9)将微量核酸吸附柱套在离心管中,开盖孵育;10)往微量核酸吸附柱滴加Buffer CDE,闭盖孵育,离心,收集样品全核酸。
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公开(公告)号:CN118562952A
公开(公告)日:2024-08-30
申请号:CN202410777340.9
申请日:2024-06-17
Applicant: 复旦大学附属中山医院
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C40B50/06
Abstract: 本发明公开一种人心肌病相关基因捕获测序探针、试剂盒及检测方法,属于高通量测序技术领域。本发明提供一组筛选优化得到的人心肌病相关基因捕获测序探针,仅针对特定基因进行检测,与常规的全外显子组测序相比,检测范围小,检测效率高。进一步,本发明提供一种试剂盒用于人心肌病相关基因检测,显著降低检测成本,有利于心肌病基因检测在临床中推广应用。
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公开(公告)号:CN114606302A
公开(公告)日:2022-06-10
申请号:CN202210363358.5
申请日:2022-04-08
Applicant: 复旦大学附属中山医院
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种提取口腔黏膜核酸进行全基因组高通量测序的方法。本发明的方法包括:在采集的口腔黏膜样本中加入GT Buffer和蛋白酶K依次进行提取、裂解、离心后,采用仪器自动抽提口腔黏膜样本gDNA;将样本gDNA进行PCR片段化、末端修复加A,获得加A后的gDNA;将加A后的gDNA与接头连接,获得连接产物;将上述连接产物进行纯化后,上机测序。本发明还提供了一种提取口腔黏膜核酸进行全基因组高通量测序的试剂盒。本发明通过对口腔黏膜样本核酸抽提后进行全基因组高通量测序,具有采集方便、可以实现全自动化抽提核酸的优点,且无需抽取血液,属于无创检测,为临床病理研究提供了新的高效测序方法。
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公开(公告)号:CN113528619A
公开(公告)日:2021-10-22
申请号:CN202110918528.7
申请日:2021-08-11
Applicant: 复旦大学附属中山医院
IPC: C12Q1/6806
Abstract: 本发明涉及一种提取肺泡灌洗液全核酸的方法,包括以下步骤:1)肺泡灌洗液中加入Buffer CDL,以及蛋白酶K,消化处理;2)将消化处理后液体冷却至室温,加入Tracer,再加入预冷的异丙酮,混匀,离心处理,弃上清,留沉淀;3)往沉淀中加入Buffer CDB,在液面下加入BufferCDD,混匀;4)加入无水乙醇,涡旋振荡混匀;5)液体移入微量核酸吸附柱中,离心,倒掉收集管中的液体;6)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW1,离心,倒掉收集管中的液体;7)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW2,离心,倒掉收集管中的液体;8)换用新的收集管容纳微量核酸吸附柱,再离心;9)将微量核酸吸附柱套在离心管中,开盖孵育;10)往微量核酸吸附柱滴加Buffer CDE,闭盖孵育,离心,收集样品全核酸。
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