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公开(公告)号:CN113528619B
公开(公告)日:2023-03-17
申请号:CN202110918528.7
申请日:2021-08-11
Applicant: 复旦大学附属中山医院
IPC: C12Q1/6806
Abstract: 本发明涉及一种提取肺泡灌洗液全核酸的方法,包括以下步骤:1)肺泡灌洗液中加入Buffer CDL,以及蛋白酶K,消化处理;2)将消化处理后液体冷却至室温,加入Tracer,再加入预冷的异丙酮,混匀,离心处理,弃上清,留沉淀;3)往沉淀中加入Buffer CDB,在液面下加入BufferCDD,混匀;4)加入无水乙醇,涡旋振荡混匀;5)液体移入微量核酸吸附柱中,离心,倒掉收集管中的液体;6)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW1,离心,倒掉收集管中的液体;7)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW2,离心,倒掉收集管中的液体;8)换用新的收集管容纳微量核酸吸附柱,再离心;9)将微量核酸吸附柱套在离心管中,开盖孵育;10)往微量核酸吸附柱滴加Buffer CDE,闭盖孵育,离心,收集样品全核酸。
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公开(公告)号:CN113528619A
公开(公告)日:2021-10-22
申请号:CN202110918528.7
申请日:2021-08-11
Applicant: 复旦大学附属中山医院
IPC: C12Q1/6806
Abstract: 本发明涉及一种提取肺泡灌洗液全核酸的方法,包括以下步骤:1)肺泡灌洗液中加入Buffer CDL,以及蛋白酶K,消化处理;2)将消化处理后液体冷却至室温,加入Tracer,再加入预冷的异丙酮,混匀,离心处理,弃上清,留沉淀;3)往沉淀中加入Buffer CDB,在液面下加入BufferCDD,混匀;4)加入无水乙醇,涡旋振荡混匀;5)液体移入微量核酸吸附柱中,离心,倒掉收集管中的液体;6)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW1,离心,倒掉收集管中的液体;7)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW2,离心,倒掉收集管中的液体;8)换用新的收集管容纳微量核酸吸附柱,再离心;9)将微量核酸吸附柱套在离心管中,开盖孵育;10)往微量核酸吸附柱滴加Buffer CDE,闭盖孵育,离心,收集样品全核酸。
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