公开(公告)号：CN113528619B

公开(公告)日：2023-03-17

申请号：CN202110918528.7

申请日：2021-08-11

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 江峥增 ,  纪元 ,  张新 ,  胡沁 ,  李晓静 ,  李春 ,  张新宇 ,  宿杰阿克苏 ,  张小垒 ,  高峰 ,  倪筝 ,  彭睿 ,  洪杨 ,  蔡儒婧

IPC: C12Q1/6806

Abstract: 本发明涉及一种提取肺泡灌洗液全核酸的方法，包括以下步骤：1)肺泡灌洗液中加入Buffer CDL，以及蛋白酶K，消化处理；2)将消化处理后液体冷却至室温，加入Tracer，再加入预冷的异丙酮，混匀，离心处理，弃上清，留沉淀；3)往沉淀中加入Buffer CDB，在液面下加入BufferCDD，混匀；4)加入无水乙醇，涡旋振荡混匀；5)液体移入微量核酸吸附柱中，离心，倒掉收集管中的液体；6)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW1，离心，倒掉收集管中的液体；7)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW2，离心，倒掉收集管中的液体；8)换用新的收集管容纳微量核酸吸附柱，再离心；9)将微量核酸吸附柱套在离心管中，开盖孵育；10)往微量核酸吸附柱滴加Buffer CDE，闭盖孵育，离心，收集样品全核酸。

公开(公告)号：CN113832146A

公开(公告)日：2021-12-24

申请号：CN202111347672.6

申请日：2021-11-15

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 江峥增 ,  缪青 ,  岳蕾 ,  张苗苗 ,  纪元 ,  程韵枫 ,  尚果果 ,  王玲燕 ,  沈琦 ,  宿杰阿克苏 ,  张小垒 ,  徐磊 ,  沈立承 ,  洪杨 ,  彭睿

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明提供了一种福尔马林固定石蜡包埋样本提取病原微生物核酸的方法，该方法包括如下步骤：向装有福尔马林固定石蜡包埋样本的离心管中加入二甲苯，离心；弃去离心管中的二甲苯，加入无水乙醇进行离心；弃去离心管中的无水乙醇，孵育直至无水乙醇全部蒸发；向离心管中加入超纯水，并吹打混匀至匀质；将匀质液澄清，再涡旋，加入洗脱缓冲液离心，纯化得到病原微生物核酸；本发明的病原微生物核酸宏基因的结果显示都在10％以下，经过宏基因高通量检测证实确实有效的方法，且去人源性的核酸能力极强，故本发明的福尔马林固定石蜡包埋样本提取病原微生物核酸的方法可以最大程度地去除人源背景，做到仅抽提病原微生物核酸的目的。

公开(公告)号：CN113528619A

公开(公告)日：2021-10-22

申请号：CN202110918528.7

申请日：2021-08-11

Applicant: 复旦大学附属中山医院

Inventor： 江峥增 ,  纪元 ,  张新 ,  胡沁 ,  李晓静 ,  李春 ,  张新宇 ,  宿杰阿克苏 ,  张小垒 ,  高峰 ,  倪筝 ,  彭睿 ,  洪杨 ,  蔡儒婧

IPC: C12Q1/6806

Abstract: 本发明涉及一种提取肺泡灌洗液全核酸的方法，包括以下步骤：1)肺泡灌洗液中加入Buffer CDL，以及蛋白酶K，消化处理；2)将消化处理后液体冷却至室温，加入Tracer，再加入预冷的异丙酮，混匀，离心处理，弃上清，留沉淀；3)往沉淀中加入Buffer CDB，在液面下加入BufferCDD，混匀；4)加入无水乙醇，涡旋振荡混匀；5)液体移入微量核酸吸附柱中，离心，倒掉收集管中的液体；6)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW1，离心，倒掉收集管中的液体；7)往微量核酸吸附柱中加入Buffer CW2，离心，倒掉收集管中的液体；8)换用新的收集管容纳微量核酸吸附柱，再离心；9)将微量核酸吸附柱套在离心管中，开盖孵育；10)往微量核酸吸附柱滴加Buffer CDE，闭盖孵育，离心，收集样品全核酸。