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公开(公告)号:CN108410909A
公开(公告)日:2018-08-17
申请号:CN201810323843.3
申请日:2018-04-12
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种利用植物激素ABA及小分子物质PYR调节细胞通路的方法。将拟南芥内ABA受体蛋白ABI1以及PYR1构建在人细胞表达载体上,然后分别转入HEK293T细胞,加入ABA,两个受体蛋白就会发生诱导性互作,加入抑制剂PYR后,互作程度会减弱。将其他人细胞信号通路关键蛋白与这两个受体蛋白融合后,两个受体蛋白在ABA诱导下互作,导致融合的信号通路也发生ABA诱导性聚集。本发明选择了人Wnt通路上的关键蛋白LRP6。融合表达ABA受体以及LRP6以后,LRP6会在ABA诱导下聚集,进而促进β-连环蛋白的产生,打开细胞内的信号通路,加入PYR抑制后,β-连环蛋白产生量减少,细胞通路关闭。
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公开(公告)号:CN119040420A
公开(公告)日:2024-11-29
申请号:CN202411246743.7
申请日:2024-09-06
Applicant: 吉林大学
Abstract: 一种利用重组巴斯德毕赤酵母生产金环蛇抗菌肽的方法,属于生物发酵技术领域。本发明的目的是加快酵母生长速度,提高抗菌肽表达产量,缩短发酵周期,降低生产成本,适合金环蛇抗菌肽cathelicin‑BF的大规模发酵生产的利用重组巴斯德毕赤酵母生产金环蛇抗菌肽的方法。本发明在甲醇诱导表达阶段向发酵培养基中加入谷氨酰胺和胆固醇两种生长调节剂,能够有效减轻酵母生长过程中的代谢负担,加快酵母生长速度,促进蛋白质合成,提高抗菌肽的产量。使用本发明的培养基表达金环蛇抗菌肽cathelicin‑BF,可以使蛋白产量提高17%以上,节约了生产成本,特别适用于金环蛇抗菌肽cathelicin‑BF的工业化大规模生产,其发酵产物具有抗衰、抗皱、抗氧化等功能,在医疗、化妆品等领域有着广阔的应用价值和市场前景。
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公开(公告)号:CN108410909B
公开(公告)日:2021-08-03
申请号:CN201810323843.3
申请日:2018-04-12
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种利用植物激素ABA及小分子物质PYR调节细胞通路的方法。将拟南芥内ABA受体蛋白ABI1以及PYR1构建在人细胞表达载体上,然后分别转入HEK293T细胞,加入ABA,两个受体蛋白就会发生诱导性互作,加入抑制剂PYR后,互作程度会减弱。将其他人细胞信号通路关键蛋白与这两个受体蛋白融合后,两个受体蛋白在ABA诱导下互作,导致融合的信号通路也发生ABA诱导性聚集。本发明选择了人Wnt通路上的关键蛋白LRP6。融合表达ABA受体以及LRP6以后,LRP6会在ABA诱导下聚集,进而促进β‑连环蛋白的产生,打开细胞内的信号通路,加入PYR抑制后,β‑连环蛋白产生量减少,细胞通路关闭。
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公开(公告)号:CN117924442A
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202311596811.8
申请日:2023-11-28
Applicant: 吉林大学
IPC: C07K14/325 , C12N15/10 , A01N63/50 , A01P7/04
Abstract: 一种基于蛋白定向进化的BT毒蛋白,属于虫害防治生物技术领域。本发明的目的是针对玉米螟钙黏蛋白的BT毒蛋白(Cry3Aa),能够更高效的抑制并杀灭玉米螟,应用于转基因作物和农药制剂中的基于蛋白定向进化的BT毒蛋白。本发明毒蛋白在SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列中,具有下述的一个或多个氨基酸位置上的氨基酸取代:第20位、第136位、第215位、第374位。本发明专门针对玉米螟BT毒蛋白(Cry3Aa)受体钙粘蛋白进行进化,如果应用于玉米转基因,将极大地提高抗虫效率。
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公开(公告)号:CN108410908A
公开(公告)日:2018-08-17
申请号:CN201810323796.2
申请日:2018-04-12
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种利用植物激素GA及小分子物质PAC调节细胞通路的方法,实现了人细胞内信号通路的调控开关。将拟南芥内GA受体蛋白GID1及GAI构建在人细胞表达载体上,然后一起转入HEK293T细胞,加入GA,诱导两个蛋白相互作用,加入抑制剂PAC后,互作程度会减弱。利用这种方式,将人细胞信号通路中的关键蛋白与这两个受体蛋白融合表达,两个受体蛋白在GA诱导下互作,导致融合的信号通路也受GA的诱导。本发明选择了人Wnt通路上的关键蛋白LRP6。融合表达GA受体以及LRP6以后,LRP6会在GA诱导下聚集,进而促进β-连环蛋白的产生,打开细胞内的信号通路,加入PAC抑制后,β-连环蛋白产生量减少,细胞通路关闭。
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公开(公告)号:CN108251434A
公开(公告)日:2018-07-06
申请号:CN201810070161.6
申请日:2018-01-24
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种利用拟南芥蓝光受体CRY2介导的蓝光诱导细胞凋亡的系统。将CRY2的N端结构域PHR和凋亡相关蛋白caspase8融合,以及将CRY2蓝光特异性互作转录因子CIB1的N端结构域CIBN和caspase8融合,然后分别转入HEK293T细胞,照射蓝光,由于PHR能够发生蓝光特异性聚集,所以导致融合的caspase8也发生蓝光诱导性聚集,同时PHR和CIBN能够发生蓝光特异性互作,所以也使得caspase8发生蓝光诱导性聚集,聚集的caspase8能够发生自剪切,产生活性体p18,激活caspase3,进而导致细胞凋亡。
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公开(公告)号:CN108410908B
公开(公告)日:2021-08-03
申请号:CN201810323796.2
申请日:2018-04-12
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明提供了一种利用植物激素GA及小分子物质PAC调节细胞通路的方法,实现了人细胞内信号通路的调控开关。将拟南芥内GA受体蛋白GID1及GAI构建在人细胞表达载体上,然后一起转入HEK293T细胞,加入GA,诱导两个蛋白相互作用,加入抑制剂PAC后,互作程度会减弱。利用这种方式,将人细胞信号通路中的关键蛋白与这两个受体蛋白融合表达,两个受体蛋白在GA诱导下互作,导致融合的信号通路也受GA的诱导。本发明选择了人Wnt通路上的关键蛋白LRP6。融合表达GA受体以及LRP6以后,LRP6会在GA诱导下聚集,进而促进β‑连环蛋白的产生,打开细胞内的信号通路,加入PAC抑制后,β‑连环蛋白产生量减少,细胞通路关闭。
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公开(公告)号:CN108250284A
公开(公告)日:2018-07-06
申请号:CN201810070162.0
申请日:2018-01-24
Applicant: 吉林大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/82 , C12N15/12
Abstract: 本发明提供了一种生产蜂毒肽的方法,具体利用发根农杆菌K599介导的大豆转基因技术生产蜂毒肽蛋白的方法,能够高效地表达蜂毒肽蛋白。同时,在目的蛋白中间使用蛋白酶切位点,保证了蜂毒肽不会杀死植物细胞,纯化后加入肠激酶后,蜂毒肽能够被切下来。此发明首次在大豆发根里面成功表达出蜂毒肽蛋白,较之前原核表达的蜂毒肽来说,其活性更强,可溶性更高,而且植物体内表达的蜂毒肽蛋白粗提取就可以用来做药,因为植物体内没有对人体有害的物质。
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公开(公告)号:CN106967742A
公开(公告)日:2017-07-21
申请号:CN201710232127.X
申请日:2017-04-11
Applicant: 吉林大学
CPC classification number: C12N15/70 , C07K16/18 , C07K2317/14 , C07K2317/622 , C08B37/0039 , C08H1/00
Abstract: 本发明提供了一种绿色荧光蛋白结合蛋白偶联的琼脂糖的制备方法,以pcr扩增的方式获得GBP基因产物,回收后和线性化的PET 28a载体连接,转化DH5a,菌落pcr验证大小正确的克隆送测序,测序正确的单菌落提取质粒并保菌;将取得的质粒用于目的蛋白的诱导表达及纯化;NHS偶联获得绿色荧光蛋白结合蛋白偶联的琼脂糖。获得琼脂糖能够高效特异地结合绿色荧光蛋白GFP,其结合效率可高达4微克/10微升,相比于直接运用GFP抗体和proteinA/G偶联的Beads,其效率要高很多。
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公开(公告)号:CN106591339A
公开(公告)日:2017-04-26
申请号:CN201710029440.3
申请日:2017-01-16
Applicant: 吉林大学
CPC classification number: C12N15/63 , C12N15/85 , C12N2800/107
Abstract: 本发明提供了一种瞬时转染试剂及其应用方法。其转染试剂转染效率高而且稳定,与Lipofectamine3000(后文简称lipo3000)转染效率相当,无论是质粒单转染还是共转染,都有相当高的转染效率;对细胞毒性极小;操作相当简便,比起lipo3000省略了分别稀释质粒和转染试剂的步骤,10分钟之内就可完成转染。溶液稳定性高,在4℃下可长期保存。该转染试剂成本低,转染效率极高,稳定性高,操作简便,适应宿主细胞范围广,培养基中抗生素对其转染效率没有影响,所以,该转染试剂对于大量做瞬时转染的实验室是一种绝佳的选择。
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