同时检测AIV-HPAIV-NDV的一步法荧光RT-PCR试剂盒

    公开(公告)号:CN102409111B

    公开(公告)日:2016-08-03

    申请号:CN201110423390.X

    申请日:2011-12-16

    申请人: 吉林大学

    IPC分类号: C12Q1/70 C12Q1/68 C12R1/93

    摘要: 本发明提供了一种同时检测AI?HPAI?ND病毒的一步法荧光RT?PCR试剂盒,其特征在于:该试剂盒由反转录引物、反转录体系、PCR体系、阳性对照、阴性对照组成,其中反转录引物为通用的随机引物;反转录体系包括反转录酶、RNase抑制剂、Buffer、dNTPs;PCR体系包括Buffer、dNTPs、混合上下游引物、探针、Taq酶、DEPC水;阳性对照为通用型\H5\H7\H9AIV与NDV纯化的质粒;阴性对照为灭菌的DEPC水;其采用自身设计的特异性引物和Taqman探针,使用FAM/BHQ荧光标记素标记,实现对通用型AI?H5/H7/H9亚型AI?ND病毒的一管多型检测,具有特异性强、灵敏度高、快速、操作简单方便等优点,可以为禽类养殖和禽产品的“绿色产业”提供技术保障,主要应用于农牧企业和监管机构。

    共表达两种亚型猪流感病毒HA基因重组腺病毒的制备

    公开(公告)号:CN102719479A

    公开(公告)日:2012-10-10

    申请号:CN201210069489.9

    申请日:2012-03-16

    申请人: 吉林大学

    IPC分类号: C12N15/861 C12N15/66

    摘要: 本发明涉及一种共表达两种亚型猪流感病毒HA基因重组腺病毒的制备,其特征在于:首先分别设计针对H1N1和H3N2亚型SIVHA及FMD2A引物序列,然后将其与酶切后的腺病毒穿梭载体pAdTrack连接,进行同源重组,经PCR和酶切鉴定得重组腺病毒质粒;将得到的重组腺病毒质粒线性化后转染293T细胞,包装后将得到的病毒原液感染293T细胞或MDCK细胞。该重组腺病毒为H3、H1亚型猪流感病毒双价核酸疫苗的研制提供病毒模型,也为进一步研究开发基因工程疫苗奠定了基础。2009年3月至今,流行于全球许多国家人群中的H1N1亚型流感进一步突出了SI在人类公共卫生方面具有的潜在危害性,研制高效、安全的疫苗为SI的防制提供物质储备。

    鹅副粘病毒病胶体金快速诊断试纸条

    公开(公告)号:CN101968488A

    公开(公告)日:2011-02-09

    申请号:CN201010518667.2

    申请日:2010-10-26

    申请人: 吉林大学

    摘要: 本发明涉及一种鹅副粘病毒病胶体金快速诊断试纸条,其特征在于:试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫依次粘附在不吸水的支撑薄片上;其中结合垫上包被有胶体金标记的抗鹅副粘病毒单克隆抗体2B8;硝酸纤维素膜上分别包被有抗鹅副粘病毒单克隆抗体3E9构成的检测线T线和兔抗Balb/c小鼠免疫球蛋白抗体IgG构成的质控线C线。其具有特异性强、灵敏度高、操作简单和诊断快速的显著优点,可用于鹅副粘病毒病的快速诊断。

    表面展示猪传染性胃肠炎病毒S1蛋白的细菌样颗粒的制备方法

    公开(公告)号:CN115109800B

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202210714503.X

    申请日:2022-06-22

    申请人: 吉林大学

    摘要: 本发明适用于疫苗研制技术领域,提供了表面展示猪传染性胃肠炎病毒S1蛋白的细菌样颗粒的制备方法,具体为表面展示猪传染性胃肠炎病毒表面刺突蛋白胞外域S1的乳酸乳球菌BLP的制备方法。该BLP立足于革兰氏阳性增强基质(GEM)‑锚钩蛋白(PA),利用昆虫细胞‑杆状病毒表达系统,构建表面展示猪传染性胃肠炎病毒表面刺突蛋白胞外域S1的细菌样颗粒,该系统具备高度的安全性、抗原展示密度大、具有自体佐剂效应等优点,尤其在黏膜疫苗的研发上可望与病毒样颗粒疫苗一道成为最有前景的基因工程亚单位疫苗;该BLP为猪传染性胃肠炎的疫苗研发提供了技术支持,为猪传染性胃肠炎的防控提供了可行的备选策略。

    小鹅瘟、鹅副粘病毒病二联灭活疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN101513527B

    公开(公告)日:2011-07-27

    申请号:CN200910080863.3

    申请日:2009-03-26

    申请人: 吉林大学

    CPC分类号: Y02A50/407

    摘要: 本发明公开了一种小鹅瘟、鹅副粘病毒病二联灭活疫苗及其制备方法。该小鹅瘟病毒病、鹅副粘病毒病二联灭活疫苗,包括小鹅瘟病毒病灭活疫苗和鹅副粘病毒病灭活疫苗,小鹅瘟病毒病灭活疫苗是将禽胚胎接种小鹅瘟病毒鸭胚化弱毒株得到的胚液灭活得到的;鹅副粘病毒病灭活疫苗是将禽胚胎接种鹅副粘病毒强毒株得到的胚液灭活得到的。方法,是将接种小鹅瘟病毒鸭胚化弱毒株的禽胚胎和接种鹅副粘病毒强毒株的禽胚胎孵育,挑选在孵育96~216小时之间死亡的胚胎,收集胚液,在胚液中加入甲醛灭活得到小鹅瘟病毒病、鹅副粘病毒病二联灭活疫苗。

    一种猪用串联乙肝核心病毒样颗粒的制备方法

    公开(公告)号:CN115010815A

    公开(公告)日:2022-09-06

    申请号:CN202210759726.8

    申请日:2022-06-29

    申请人: 吉林大学

    摘要: 本发明适用于疫苗研制技术领域,提供了一种猪用串联乙肝核心病毒样颗粒的制备方法,具体为串联表达猪传染性胃肠炎病毒刺突蛋白抗原表位的乙肝核心病毒样颗粒(VLPs)的制备方法,该VLPs是由重组猪传染性胃肠炎病毒表面刺突蛋白A、D抗原表位的乙型肝炎病毒衣壳蛋白自行组装形成的空心化结构蛋白颗粒,其不仅拥有天然病毒的形状、大小,可以同时诱导特异性细胞和体液免疫应答,而且拥有成本低、生产周期短、理化性质稳定的特点,运用大肠杆菌表达系统即可大量生产。面对抗原多样性和高度变异性的挑战和传统疫苗的不足,该VLPs为猪传染性胃肠炎的疫苗研发提供了技术支持,为猪传染性胃肠炎的防控提供了可行的备选策略。

    一种表达鹅细小病毒VP3基因的重组新城疫病毒及其构建方法

    公开(公告)号:CN104195116A

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201410398258.1

    申请日:2014-08-13

    申请人: 吉林大学

    摘要: 本发明公开了一种表达鹅细小病毒VP3基因的重组新城疫病毒及其构建方法,属于重组病毒疫苗领域。该重组新城疫病毒为鹅源分离株,其F蛋白的裂解位点氨基酸是GRQGRL,P3基因位于新城疫病毒P基因和M基因之间非编码区。将转录质粒pCI-NA-VP3(SEQ ID NO.1)和转录辅助质粒pcDNA-N、pcDNA-P、pcDNA-L(SEQ ID NO.2~4)共转染新城疫病毒复制许可的宿主细胞,培养转染后的宿主细胞,从转染的宿主细胞的细胞悬液中可拯救重组新城疫病毒。本发明的表达鹅细小病毒VP3基因的重组新城疫病毒可作为预防新城疫、鹅细小病毒二联活载体疫苗。