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公开(公告)号：CN109182565A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811088581.3
申请日：2018-09-18
申请人： 吉林大学
摘要： 本发明提供一种可广泛检测致病性钩端螺旋体的试剂盒及引物，3对退火温度一致，目的条带大小相同的引物组合，可放在同一反应体系，能够准确检测出15中钩体血清型。选择LigL32基因作为检测对象，应用3对特异性引物，实现广泛检测致病性钩端螺旋体的目的。本发明提供了一种省时省力，特异性和敏感性优异，可广泛检测中国钩端螺旋体的PCR引物及试剂盒。本发明提供的引物和试剂盒，可用于钩端螺旋体病的早期诊断在该实验中，建立并组装的广泛检测致病性钩端螺旋体病PCR方法特异性强，并且检测钩体浓度的灵敏度可达到1个钩体的DNA含量。
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公开(公告)号：CN106754765A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611183096.5
申请日：2016-12-20
申请人： 吉林大学
摘要： 本发明属于新城疫疫苗技术领域，具体涉及一种新城疫病毒样颗粒、制备方法及其应用的专利申请。该病毒样颗粒由新城疫病毒M蛋白、F蛋白、NP蛋白和HN蛋白自行组装形成的空心化结构的蛋白颗粒；其中M蛋白对应的M1基因的碱基序列如SEQ ID NO.1所示，F蛋白对应的F1基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示，NP蛋白对应的NP1基因的碱基序列如SEQ ID NO.3所示，HN蛋白对应的HN1基因的碱基序列如SEQ ID NO.4所示。本发明具有结构蛋白表达水平高、病毒样颗粒自行组装，免疫原性与真实病毒粒子更为接近、病毒样颗粒的产量和纯度高、免疫效果好等技术优势。
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公开(公告)号：CN104195267A
公开(公告)日：2014-12-10
申请号：CN201410456381.4
申请日：2014-09-09
申请人： 吉林大学
CPC分类号： C12Q1/702 , C12Q1/6862 , C12Q2561/125
摘要： 本发明提供了一种快速检测鹿粘膜病病毒BVDV的方法，通过将LDR与PCR技术相结合的检测导致梅花鹿粘膜病的BVDV，具体为：首先，从NCBI中下载BVDV全序列，通过软件比对BVDV的5’-UTR进行病毒特异性序列的设计，并以副猪嗜血杆菌的引物为通用引物进行探针合成；探针包括上游探针和下游探针，上游探针从左到右依次是上游通用引物对应序列、上游病毒特异序列，下游探针从左到右依次是下游病毒特异序列、下游通用引物对应序列。以病毒基因组RNA反转录的cDNA为模板进行LDR、PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳检测。此方法的建立对鹿粘膜病病毒的流行病学调查和疫情控制具有重要的意义。
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公开(公告)号：CN102305859B
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201110212152.4
申请日：2011-07-27
申请人： 吉林大学
IPC分类号： G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/531
摘要： 本发明涉及一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的活毒抗体试剂盒，其特征在于：将待检血清用样品稀释液2倍稀释后100ul加入ELISA板中37℃孵育1h，设置阳性对照、阴性对照和空白对照。用洗涤液清洗5次，每次2min；然后加入结合单抗每孔100ul，37℃孵育1h，洗涤液清洗5次，每次2min；然后加入羊抗小鼠IgG-HRP结合物37℃作用1h，洗涤液清洗5次，每次2min；然后加入显色底物溶液，将底物A和底物B以1:1混合，100ul加入ELISA孔中，避光显色15min，加入50ul终止液，测其OD490值。判定结果是这样设定的：抑制率PI=(OD未抑制-OD样品)/OD未抑制*100%，PI>30%对应的样品为阳性，小于则为阴性。该试剂盒方法技术成熟，重复性强，能够有效区分猪繁殖与呼吸综合征病毒活毒和灭活毒抗体，一般研究人员即可完成。
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公开(公告)号：CN102759624A
公开(公告)日：2012-10-31
申请号：CN201210248861.2
申请日：2012-07-18
申请人： 吉林大学
IPC分类号： G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/531 , C12N5/18
摘要： 本发明涉及一种快速检测梅花鹿粘膜病病毒的胶体金试纸条，其特征在于：试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫依次粘附在不吸水的支撑薄片上；其中结合垫上包被有胶体金标记的BVDV单克隆抗体；硝酸纤维素膜上分别包被有BVDV纯化的多克隆抗体构成的检测线T线和葡萄球菌蛋白A(SPA)构成的质控线C线。其具有特异性强、灵敏度高、操作简单和诊断快速的显著优点，可用于梅花鹿粘膜病病毒的快速检测及疫病诊断。
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公开(公告)号：CN102618581A
公开(公告)日：2012-08-01
申请号：CN201210069488.4
申请日：2012-03-16
申请人： 吉林大学
IPC分类号： C12N15/867 , C12N15/66
摘要： 本发明是一种利用慢病毒载体介导RNAi的方法，具体是：先对鹅源副粘病毒NA-1株NP、M基因的核酸序列进行同源性分析，找出保守区域，设计出针对保守区的siRNA；将siRNA克隆到慢病毒表达质粒pLKD-EGFP后，再与pCMV-dR8.2和pCMV-VSV-G共同转染293T细胞中，收集转染后细胞上清，经超速离心、纯化、浓缩后形成了表达siRNA的高滴度的慢病毒载体，然后将其转导入靶细胞，使其在细胞内稳定表达，发挥抗病毒效应。本发明因其高效的转导率及严格的控制体系可以真实的评价siRNA在体内的抗病毒作用，可为禽类动物分子抗病育种奠定分子生物学基础；同时为新城疫等动物源性病毒病的防治提供新的途径。
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公开(公告)号：CN101513527A
公开(公告)日：2009-08-26
申请号：CN200910080863.3
申请日：2009-03-26
申请人： 吉林大学
IPC分类号： A61K39/295 , A61K39/12 , A61K39/17 , A61P31/14 , A61P31/20
CPC分类号： Y02A50/407
摘要： 本发明公开了一种小鹅瘟、鹅副粘病毒病二联灭活疫苗及其制备方法。该小鹅瘟病毒病、鹅副粘病毒病二联灭活疫苗，包括小鹅瘟病毒病灭活疫苗和鹅副粘病毒病灭活疫苗，小鹅瘟病毒病灭活疫苗是将禽胚胎接种小鹅瘟病毒鸭胚化弱毒株得到的胚液灭活得到的；鹅副粘病毒病灭活疫苗是将禽胚胎接种鹅副粘病毒强毒株得到的胚液灭活得到的。方法，是将接种小鹅瘟病毒鸭胚化弱毒株的禽胚胎和接种鹅副粘病毒强毒株的禽胚胎孵育，挑选在孵育96～216小时之间死亡的胚胎，收集胚液，在胚液中加入甲醛灭活得到小鹅瘟病毒病、鹅副粘病毒病二联灭活疫苗。
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公开(公告)号：CN112458118B
公开(公告)日：2022-07-26
申请号：CN202011336386.5
申请日：2020-11-25
申请人： 吉林大学
IPC分类号： C12N15/866 , C12N5/10 , C12N15/45 , C12N15/44 , C12N15/34 , C12N15/40 , A61K39/295 , A61K39/17 , A61K39/12 , A61K39/145 , A61K39/235 , A61P31/14 , A61P31/16
摘要： 新流法腺四联病毒样颗粒及其制备方法和应用，属于四联疫苗研发领域，制备方法包括：目的基因的优化及合成、重组穿梭质粒的构建、重组杆粒的构建、重组杆状病毒的拯救、嵌合病毒样颗粒的制备及纯化，最终获得嵌合病毒样颗粒NDV‑AIV‑IBDV‑FAdV4 cVLPs。通过本发明的制备方法制备的新流法腺四联病毒样颗粒具有以下优点：该新流法腺四联病毒样颗粒能够重复高密度的展现外源抗原，具有较强的免疫原性；同时不含有病毒核酸，绿色、安全，有利于新流法腺的净化，符合现代绿色、安全的养殖理念；疫苗种毒与流行毒株匹配；一针多防，简化疫苗免疫程序，避免了多种疫苗的相互干扰；适合大规模悬浮培养及批量生产。
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公开(公告)号：CN110161246A
公开(公告)日：2019-08-23
申请号：CN201910449511.4
申请日：2019-05-28
申请人： 吉林大学
IPC分类号： G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , C07K16/10
摘要： 区分新城疫病毒样颗粒疫苗免疫血清与野毒感染血清的间接竞争ELISA方法及试剂盒，属于病毒检测领域。本发明以NP蛋白为免疫抗原，以单克隆抗体为抗体诊断试剂，利用棋盘法对包被抗原及单抗浓度进行优化，对包被时间、一抗浓度及孵育时间、二抗浓度及孵育时间等条件优化；根据工作浓度将免疫抗原包被于ELISA孔中，同时以不同稀释倍数的样本血清与固定稀释倍数的单克隆抗体混合后进行阻断实验，将混合物与固相抗原结合作用，再以辣根过氧化物酶标记的羊抗小鼠IgG为二抗继续孵育，用TMB显色液显色，加入2M硫酸溶液终止反应。本发明可有效移除传染源，消灭持久疫源地的存在，为新城疫的净化提供理论依据，具有检测灵敏、准确，操作简便及特异性强的优点。
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公开(公告)号：CN105525038A
公开(公告)日：2016-04-27
申请号：CN201510979921.1
申请日：2015-12-23
申请人： 吉林大学
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2521/107 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/101
摘要： 本发明提供的新城疫病毒强、弱毒一步法实时荧光RT-PCR检测试剂盒，包括引物组和探针组，引物组有引物F和R，它们分别具有序列表SEQ.ID.NO.1和2的碱基序列。探针组有探针V-T和L-T,它们分别具有序列表SEQ.ID.NO.3和4的碱基序列。强毒探针V-T的5＇端标记有报告荧光染料FAM，3＇端标记有淬灭荧光染料BHQ1；弱毒探针L-T的5＇端标记有报告荧光染料JOE，3＇端标记有淬灭荧光染料BHQ2。对新城疫病毒的防控具有检测时间短、检测敏感性高且特异性强的优点。
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